微生物限度检查记录

1、页 码： 第1页，共12页文件编码： ZYCWJ-TS-07156-01起草部门：质量管理部 版本号：01标题 微生物限度检查方法验证方案起草人 起草时间审核人 审核时间批准人 批准时间颁发部门 质 量 管 理 部 生效日期分发部门份数 质 量 管 理 部 生产部 设备部 物料部 行 政 人 事 部 销售部 财务部 变更记载：修订号 批准日期 执行日期 变更原因页 码：第 2 页 共 12 页文件编码：ZYCWJ-TS-07156-01版 本 号： 01题 目：微生物限度检查方法验证方案微生物验证实施小组主要成员：部 门 质量管理部 质量管理部 质量管理部 质量管理部 质量管理部姓 名职。

2、大连天宇奥森制药有限公司 GMP 文件编号： SMP09-122/01制定： 年 月 日审核： 年 月 日标题：微生物限度检查室管理规程终审： 年 月 日生效日期 2010 年 10 月 1 日 批准： 年 月 日分发部门 质量部 颁发部门： 质量部第 1 页 共 3 页目 的：建立微生物检验室进出的标准规程，维护微生物检验室的洁净环境，避免人员、物料进出时带入异物污染环境。适用范围：适用于微生物限度检查室。责 任 人：质量部 QC 微生物检验室工作人员内 容：1 按我国现行药典标准微生物限度检查全过程应遵守无菌操作，严防再污染，因此微生物限度检查室在以静态。

3、1饮用水 取样 于 500ml 玻璃瓶中加入 2 毫升 1.5%硫代硫酸钠溶液，加盖后高压蒸汽灭菌。（121，30 分钟）。取样前，先用酒精灯将水龙头烧灼消毒，然后把水龙头完全打开，放水 13 分钟后取样。 细菌数检查（不得过 100 个/ml） 以无菌操作方法用灭菌吸管吸取 1ml 充分混匀的水样，注入灭菌平皿中，倾注约15ml 已融化并冷却至 45左右的营养琼脂培养基，每个水样应倾注二个平皿，待培养基冷却后将平皿置于 37恒温箱内培养 24 小时。 菌落计数 按微生物限度检查法菌落计数项进行计数。 菌落计数的报告：菌落数在 100 以内时按实有数报告，大于。

4、主要内容1 背景和相关概念2 无菌检查、微生物限度检查相关知识34 供试品处理方法常用术语药品微生物检查主要概念药品微生物检查微生物限度检查微生物计数控制菌检查无菌检查细菌、霉菌、酵母菌微生物检查意义控制药品使用过程对使用者的影响，避免用药感染。控制药品性状稳定。优点：成本低缺点：取样量小，抑菌性产品难以检查直接接种法1优点：检验量大，可冲洗检查抑菌性检品缺点：需要与用装置，检品必须是分子足够小的真溶液，需和滤膜化学相容薄膜过滤法2微生物检查方法药品微生物检查方法薄膜过滤法应优先采用封闭式薄膜过滤器，也。

5、 北京红林制药有限公司微生物限度检查记录（抑菌物质-方法 4）品 名： 批 号：_数 量： 规 格：_来 源： 检验日期：_紫 外 光 照 时 间 ： 报告日期：_供 试 液 制 备 ： 供试液注入量 ml 稀释级 空白对照123 4 5 6 7 8 9 细菌总数3035平皿号10 平均总菌落数 培养时间： 日 时 日 时 菌落数报告供试液注入量 ml 稀释级 空白对照123 4 5 6 7 8 9 霉菌和酵母菌数2328平皿号10 平均总菌落数 培养时间：。

6、 非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法 浙江省食品药品检验研究院 郑小玲 主要内容 1 计数方法的概况 2 计数培养基适用性检查 3 供试品计数方法适用性检查 4 供试品检查 5 结果判断 计数方法的概况 有氧条件下生长的嗜温细菌和真菌的计数 平皿法 不适用活菌制剂的检查薄膜过滤法MPN法 受控环境洁净环境下的局部洁净度不低于B级 确。

7、微生物限度检查法细菌及控制菌培养温度为 3035；霉菌、酵母菌培养温度为 2328。检验结果以 1g、1ml、10g、10ml 或 10cm2 为单位报告，特殊品种可以最小包装单位报告。检验量检验量即一次试验所用的供试品量(g、ml 或 cm2)。除另有规定外，一般供试品的检验量为 10g 或 10ml；膜剂为 100cm2；贵重药品、微量包装药品的检验量可以酌减。要求检查沙门菌的供试品，其检验量应增加 20g 或 20ml(其中10g 或 10ml 用于阳性对照试验)。检验时，应从 2 个以上最小包装单位中抽取供试品，大蜜丸还不得少于 4 丸，膜剂还不得少于 4 片。一般应随机抽。

8、USP 微生物限度检查 中文61）微生物限度检测 （MICROBIAL LIMIT TESTS）此章提供方法来检测可能存在的好氧微生物其他制药过程中可能出现的微生物的数量，包括原材料和成品中的。如果经过验证确认可以得到相同或更好的检测结论，也允许采用自动化的检测方法。在样品检测过程中须进行无菌操作。若无特别说明，则“培养（incubate）”一词指在 3035的培养箱内培养 24 至 48 小时；“生长（growth）”一词用于专门的判定，说明“存在和可能存在活的微生物”。准备实验 (Preparatory Testing)本章涉及实验结果的有效性取决于：提供的被检测样品。

9、微生物限度检查知识培训1、微生物方法验证，要求菌株回收率70%，是否有上限要求？（如不得高于100%或者 110%） 。答：没有上限。但一般不会高于 100%，因为加进去的菌量是一样的，如果超过100%可看成是操作上的误差。按微生物的特性，如果不超过太多，是可以接受的，但没有具体上限。 （本所控制在 110%以内） 。2、在微生物方法验证时，霉菌、酵母菌计数验证只用黑曲霉及白色念珠菌做方法学验证，在操作培养过程中发现：在玫瑰红钠琼脂培养生长的白色念珠菌的形态太小与营养琼脂上培养的细菌的某些形态大小相同，这样如何判断营养琼脂上。

10、微 生 物 限 度 检 查 方 法 验 证 原 始 记 录 （ 平 皿 法 ）验 证 类 别 ： 初 次 验 证 周 期 性 再 验 证样 品 来 源 ： 研 发 中 试 产 品 研 发 试 生 产 产 品 正 式 生 产 产 品验 证 药 品 名 称 ： 规 格 ：验 证 起 止 时 间 ： 年 月 日 年 月 日一 、 计 数 方 法 验 证1、 实 验 条 件样 品 名 称 ： 批 号 ：培 养 基 ： 营 养 肉 汤 培 养 基 批 号 ： 配 制 日 期 ：营 养 琼 脂 培 养 基 批 号 ： 配 制 日 期 ：改 良 马 丁 液 体 培 养 基 批 号 ： 配 制 日 期 ：改 良 马 丁 琼 脂 培 养 基 批 号 ： 配 制 日 期 。

11、微生物限度检验记录文件编号：检验编号：请验单位：品 名 取样日期来 源 报告日期检验依据培养日期 月 日 时 取出日期 月 日 时供试液 空白对照 菌检室小 时 48 72 48 72 721 左2 中平皿号 3 右平均菌落数细菌数cfu/ml30-35报告数供试液 空白对照 菌检室小 时 48 72 48 72 48 7212平皿号 3平均菌落数霉菌、酵母菌总数cfu/ml23-28报告数控制菌检查 取出时间 月 日 时营养肉汤 36，24h 甘露醇高盐琼脂平板 36，24h 染色镜检 血浆凝固酶试验检品阳性对照阴性对照金黄色葡萄球菌检查结论胆盐乳糖增菌液 36，24h溴化十六烷基三甲铵琼脂平板 36。

12、 纯化水微生物限度检查记录检验日期 年 月 日 报告日期 年 月 日检验依据 中国药典2015 年版二部、四部通则微生物检查法需氧菌总数检查：取纯化水 50ml，用薄膜过滤器（0.450.02um，50MM 直径）过滤，减压抽干。取出滤膜，将滤膜放入制备好的 R2A 培养基平板上，在 3035培养 3 天，计数。需氧菌阴性对照：取 50ml 已灭菌的纯化水按供试品同法处理， 作为阴性对照。R2A 琼脂培养基配制批号 培养温度放入培养时间 取出培养时间 累计培养时间年 月 日 时 年 月 日 时 h取样点编号培养时间 / 阴性对照124h2长菌未长菌148h 2长菌未长菌172h2长。

13、 表：2.1-024 微生物限度检查记录（通用）样品名称 检验编号批 号 剂 型检验日期 完成日期供试液制备1.常规法：取供试品 10g ml,用胰酪大豆胨液体培养基稀释至 100ml，用匀浆仪等适宜的方法混匀，制成 1:10 供试液。2.薄膜过滤法：取供试品 10g ml,用胰酪大豆胨液体培养基稀释至 100ml，用匀浆仪等适宜的方法混匀，制成 1:10 供试液。吸取 1:10 的供试液 10ml，过滤，加 0.1%无菌蛋白胨水溶液300ml 分三次冲洗，每次 100ml；冲洗后，将滤膜正贴于胰酪大豆胨固体培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基上，每种培养基平行制备 2 个平皿。按平皿法测。

14、纯化水微生物限度记录 检品编号： 取样点： 批号： 1.检查方法（薄膜过滤法） 仪器型号：HYTYSTERITEST-601 型集菌仪；仪器使用登记 。 供试品：取供试品 ml，加 pH 7.0 无菌氯化钠蛋白胨缓冲液 ml，混合均 匀，用薄膜过滤器过滤，用镊子小心将滤膜取出。每套滤器有两张滤膜，分贴于营养琼脂 培养基皿和玫瑰红钠琼脂培养皿内，菌面均朝上。 阴性对。

15、微生物限度检测解读,一 微生物基础知识二 微生物限度检验三 2005版药典与2010版药典的区别,一微生物检测基础知识,基本知识1.1什么是微生物? 微生物是一群形体非常微小,肉眼看不到或很难看清它的生物,只有通过光学或电子显微镜,放大几百倍或几十万倍才能看清楚.,微生物的分类,1.2 非细胞生物(病毒) 微生物 原核生物(细菌) 细胞生物 真核生物(酵母菌),1.3图片资料,病毒原核生物,真核生物,1.4微生物的特点,1)个体微小（小于0.1mm，肉眼不可见）,结构简单.微生物多数是单细胞2。

16、 微生物限度检查记录 文件编码：RD/QC-082-04第 1 页 共 2 页微生物限度检查记录 检品名称 批 号请检部门 检品来源包装规格 取样日期取 样 量 开检日期检验目的 报告日期检验依据 中国药典2015 年版四部通则操作规程 非无菌产品微生物限度检查法标准操作规程供试液的制备1.常规法：供试品 cm2 加稀释剂 ml 擦拭法 淋洗法 2.具抑菌活性：供试品 g(ml) 加稀释剂 ml 薄膜过滤法（冲洗：蛋白胨水溶液 ml）稀释剂 0.9%无菌氯化钠溶液 pH7.0 无菌氯化钠 -蛋白胨缓冲液需氧菌总数（3035，120h）培养基配制批号 培养箱型号/编号 PYX-DHS-50X65-BS 。

17、微生物限度检查法（05 年兽药典）微生物限度检查法系检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方法。检查项目包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌检查。微生物限度检查应在环境洁净度 10000 级下的局部洁净度 100 级的单向流空气区域内进行。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。单向流空气区域、工作台面及环境应定期按医药工业洁净室( 区) 悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法 的现行国家标准进行洁净度验证。供试品检查时，如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂，应证明其有效性及对微生物的生长和存活无影响。。

18、微生物检查记录（验证）表-ZL00122名 称： 批 次： 取样量： 取样地点： 取样时间： 取样点： 检验日期： 检验依据： 供试品溶液的制备：取经过灭菌的棉球，用灭菌生理盐水润湿，然后分别擦拭于药品直接接触部位，每个部位 25cm2，擦拭后放入盛有 10ml 灭菌生理盐水的容器内，晃动 10 分钟后，即得供试液。按微生物限度操作法进行检查。细菌菌落数测定 培养温度（3035）始温 末温 培养时间 月 日 时 分至 月 日 时 分取样点 稀释度 碟号 1 碟号 2平 均菌落数总菌落数报 告菌落数 空白培养基名 称标准规定 结论供试液阴性对照供试液阴性对。