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制药用水微生物限度检查.doc

上传人:hskm5268 文档编号:7280657 上传时间:2019-05-12 格式:DOC 页数:2 大小:36.50KB
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1、1饮用水 取样 于 500ml 玻璃瓶中加入 2 毫升 1.5%硫代硫酸钠溶液,加盖后高压蒸汽灭菌。(121,30 分钟)。取样前,先用酒精灯将水龙头烧灼消毒,然后把水龙头完全打开,放水 13 分钟后取样。 细菌数检查(不得过 100 个/ml) 以无菌操作方法用灭菌吸管吸取 1ml 充分混匀的水样,注入灭菌平皿中,倾注约15ml 已融化并冷却至 45左右的营养琼脂培养基,每个水样应倾注二个平皿,待培养基冷却后将平皿置于 37恒温箱内培养 24 小时。 菌落计数 按微生物限度检查法菌落计数项进行计数。 菌落计数的报告:菌落数在 100 以内时按实有数报告,大于 100 时,采用二位有效数字,在

2、二位有效数字后面的数值,以四舍五入方法计算。大肠菌群(不得检出)取 10ml 水样接种到 10ml 双料乳糖蛋白胨培养液中,取 1ml 水样接种到 10ml 单料乳糖蛋白胨培养液中,另取 1ml 水样注入到 9ml 灭菌生理盐水中,混匀后吸取 1ml(即0.1ml 水样)注入到 10ml 单料乳糖蛋白胨培养液,每一稀释度接种 5 管。对已处理过的出厂自来水,可直接种 5 份 10ml 水样双料培养基,每份接种 10ml 水样。 分 离 培 养 将 产 酸 产 气 的 发 酵 管 分 别 转 种 在 伊 红 美 蓝 琼 脂 平 板 上 , 于 36 1 培 养 箱内 培 养 18h 24h, 观

3、 察 菌 落 形 态 , 挑 取 符 合 下 列 特 征 的 菌 落 作 革 兰 氏 染 色 , 镜 检 和 证 实 实验 。深紫黑色,具有金属光泽的菌落;紫黑色,不带或略带金属光泽的菌落;淡紫红色,中心较深的菌落。 证实实验经上述染色镜检为革兰氏阴性无芽孢杆菌,同时接种乳糖蛋白胨培养液,置 361培养箱中培养 18h24h,有产酸产气者,即证实有总大肠菌群存在。 结果报告根据证实为总大肠菌群阳性的管数,查 MPN 检索表,报告每 100ml 水样中的总大肠菌群最可能数(MPN)值。5 管法结果见表表 2 用 5 份 10ml 水样时各种阳性和阴性结果组合时的最可能数(MPN)5 个 10ml

4、 管中阳性管数 最可能数(MPN)0 2.21 2.22 5.13 9.24 16.05 162.纯化水测定:取供试品 10ml,加 pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至 100ml,取 10ml,照薄膜过滤法,过滤,取出滤膜,菌面朝上,分别贴于营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基平板上培养,每种培养基至少制备一张滤膜。滤膜贴于平板上时不得有空隙或气泡,否则影响微生物的生长。 结果判定 细菌、霉菌和酵母菌总数每 1ml 不得过 100 个。3.注射用水 测定:取供试品 200ml,照薄膜过滤法,过滤,取出滤膜,菌面朝上,分别贴于营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基平板上培养,每种培养基至少制备一张滤膜。滤膜贴于平板上时不得有空隙或气泡,否则影响微生物的生长。 结果判定 细菌、霉菌和酵母菌总数每 100ml 不得过 10 个。

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