1、 硕 士 学 位 论 文日粮中不同水平的维生素 C 对团头鲂幼鱼生长及免疫的影响指导教师 研究员 专业名称 水产养殖 研究方向 水产动物营养与饲料 答辩日期 年 月 目录I目录摘要 .VABSTRACT .VII第一章 文献综述 11 维生素 C 的概述 .111 维生素 C 基本结构和性质 112 鱼类对维生素 C 的合成能力 113 维生素 C 源的种类及其稳定性 22 维生素 C 在水产饲料中应用的研究进展 .321 维生素 C 对水产动物生理功能的研究 322 维生素 C 在水产动物中的应用 42.3 维生素 C 缺乏症 724 水产动物对维生素 C 需要量的研究 83 研究目的、意义
2、及展望 9第二章 日粮维生素 C 对团头鲂幼鱼生长、血液学及肌肉理化指标的影响 .111 材料与方法 111.1 试验鱼种、添加剂及日粮 .111.2 饲养管理 .131.3 采样与处理 .131.4 测定指标与方法 .131.5 数据统计与分析 .152 结果与分析 152.1 维生素 C 对团头鲂幼鱼生长的影响 152.2 维生素 C 对团头鲂幼鱼血液常规参数的影响 172.3 维生素 C 对团头鲂幼鱼血液生化指标的影响 172.4 维生素 C 对团头鲂幼鱼肌肉相关指标的影响 173 讨论 183.1 维生素 C 对团头鲂幼鱼幼鱼生长性能的影响 183.2 维生素 C 对团头鲂幼鱼血液相关
3、参数的影响 193.3 维生素 C 对团头鲂幼鱼肌肉理化指标的影响 20第三章 日粮维生素 C 对团头鲂幼鱼非特异性免疫及肝脏三种 HSPs mRNA 表达的影响 211 材料与方法 211.1 试验鱼种、添加剂及日粮 .211.2 饲养管理 .211.3 采样与处理 .211.4 测定指标与方法 .211.5 数据统计与分析 .232 结果与分析 232.1 维生素 C 对团头鲂幼鱼血清免疫相关指标的影响 23目录II2.2 维生素 C 对团头鲂幼鱼肝脏抗氧化指标的影响 232.3 维生素 C 对团头鲂幼鱼肝脏三种 HSPs mRNA 表达水平的影响 243 讨论 253.1 维生素 C 对
4、团头鲂幼鱼血清免疫指标的影响 253.2 维生素 C 对团头鲂幼鱼肝脏抗氧化指标的影响 263.3 维生素 C 对团头鲂幼鱼肝脏三种 HSPs mRNA 表达水平的影响 27第四章 日粮维生素 C 对团头鲂幼鱼抗 pH 应激的影响 291 材料与方法 291.1 试验鱼种、添加剂及日粮 .291.2 饲养管理 .291.3 pH 应激试验 .291.4 采样与处理 .291.5 测定指标与方法 .301.6 数据统计与分析 .302 结果与分析 302.1 维生素 C 对团头鲂幼鱼血清谷丙转氨酶、碱性磷酸酶和总蛋白的影响 302.2 维生素 C 对团头鲂幼鱼血清补体 3、补体 4 和皮质醇的影
5、响 .322.3 维生素 C 对团头鲂幼鱼肝脏抗氧化指标的影响 332.4 维生素 C 对团头鲂幼鱼肝脏三种热休克蛋白 mRNA 表达水平的影响 .353 讨论 363.1 pH 应激下维生素 C 对团头鲂幼鱼血液生化指标的影响 373.2 pH 应激下维生素 C 对团头鲂幼鱼肝脏抗氧化指标的影响 383.3 pH 应激下维生素 C 对团头鲂幼鱼肝脏三种 HSPs mRNA 表达水平的影响 38第五章 pH 应激下日粮维生素 C 对团头鲂幼鱼抗嗜水气单胞菌感染的影响 .411 材料与方法 411.1 试验鱼种、添加剂及日粮 .411.2 饲养管理 .411.3 攻毒试验 .411.4 采样与处
6、理 .421.5 测定指标与方法 .421.6 数据统计与分析 .422 结果与分析 422.1 维生素 C 对团头鲂幼鱼感染嗜水气单胞菌后死亡率的影响 422.2 维生素 C 对团头鲂幼鱼血液常规参数的影响 432.3 维生素 C 对团头鲂幼鱼血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性的影响 452.4 维生素 C 对团头鲂幼鱼肝脏抗氧化指标的影响 452.5 维生素 C 对团头鲂幼鱼血清总蛋白、皮质醇和葡萄糖水平的影响 472.6 维生素 C 对团头鲂幼鱼肝脏三种 HSPs mRNA 表达水平的影响 483 讨论 503.1 维生素 C 对团头鲂幼鱼感染嗜水气单胞菌后死亡率的影响 503.2 维生素
7、C 对团头鲂幼鱼血液常规参数的影响 503.3 维生素 C 对团头鲂幼鱼血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性的影响 51目录III3.4 维生素 C 对团头鲂幼鱼肝脏抗氧化指标的影响 513.5 维生素 C 对团头鲂幼鱼血清总蛋白、皮质醇和葡萄糖水平的影响 523.6 维生素 C 对团头鲂幼鱼肝脏三种 HSPs mRNA 表达水平的影响 53全文总结 55参考文献 57致 谢 71攻读学位期间参与学术会议及发表的学术论文 73摘要IV日粮中不同水平的维生素 C 对团头鲂幼鱼生长及生长的影响摘要以团头鲂幼鱼为研究对象，以酪蛋白和明胶为蛋白源，豆油为脂肪源配制团头鲂幼鱼基础饲料，制成维生素 C 水平为
8、0.2 mg/kg、33.4 mg/kg、65.8 mg/kg、133.7 mg/kg、251.5 mg/kg 和 501.5 mg/kg 的 6 种等氮等能的试验饲料。每种试验饲料随机投喂 3 组实验团头鲂幼鱼，每天投喂 3 次，达饱食水平，试验周期为 90d。1维生素 C 对团头鲂幼鱼生长、血液学及肌肉理化指标的影响。随着饲料中维生素 C 添加量的增加，增重率（WG） 、特定生长率（SGR）呈先上升而后趋于平缓的趋势，其中 251.5 mg/kg 和 501.5 mg/kg Vc 添加组团头鲂 WG、SGR 显著高于对照组（P0.05） 。以鱼体增重率为评价指标，经折线模型（Broken
9、line model）回归分析，得到团头鲂幼鱼饲料中 Vc 的适宜添加量为 150mg/kg。2. 日粮中不同水平维生素 C 对团头鲂幼鱼非特异性免疫、抗氧化能力以及肝脏三种 HSPs mRNA 表达的影响。通过测定血清相关免疫指标、肝脏抗氧化指标、三种 HSPs mRNA 表达以及抗病原菌能力等指标，研究 Vc 对团头鲂幼鱼免疫力的影响。结果表明，维生素 C 对团头鲂幼鱼血清中补体 3（C3） 、补体 4（C4）的浓度、肝脏超氧化物歧化酶（SOD） 、抗超氧阴离子（ASAFR）的活性、三种 HSPs mRNA 表达以及抗病原菌能力有显著的影响（P0.05） 。综上所述，Vc 作为免疫刺激剂能
10、有效地增强团头鲂幼鱼的免疫力。3. 日粮中不同水平的维生素 C 对团头鲂幼鱼抗 pH 应激的影响。养殖试验结束摘要V后，各槽中选取 20 尾鱼进行连续 15 d 的 pH 应激试验（pH9.5 ） ，分别于 0 d、1 d、5 d、10 d 和 15 d 采样，并分析团头鲂幼鱼血液和肝脏的生化指标以及肝脏三种HSPs mRNA 的表达水平。结果表明，与 pH 应激前相比，团头鲂幼鱼在 pH 应激后血清血清碱性磷酸酶（ALP） 、总蛋白（TP） 、补体 3（C3） 、补体 4（C4）以及肝脏超氧化物歧化酶（SOD）和抗超氧阴离子（ASAFR）的水平显著降低；血清谷丙转氨酶（ALT） 、皮质醇（C
11、OR）和肝脏丙二醛（MDA）的水平以及肝脏三种 HSPs mRNA 的表达水平显著升高（P0.05). The fish body indices were not significantly different among groups, except the viscerosomatic index in fish with 133.7 mg/kg Vc was significantly higher then the control group (P0.05). Based on broken-line model analyses at this study, the minimum
12、 dietary vitamin C level is 150 mg/kg to get optimal WG.2. Effects of dietary vitamin C on the non-specific immunity and three HSPs mRNA expression of juvenile Wuchang bream (Megalobrama amblycephala). After 90 days feeding, the serum immunological and liver antioxidant indices, the the basal expres
13、sion level of three heat shock peoteins (HSPs) mRNA and the resistance of Aeromonas ABSTRACTVIIhydrophila were measured. The results showed Vc significantly enhanced the contents of serum C3 and C4, the activities of SOD, ASAFR, the basal expression level of three heat shock peoteins (HSPs) mRNA and
14、 the resistance of Aeromonas hydrophila of juvenile Wuchang bream (P0.05). Vc could promoting immunity of juvenile Wuchang bream.3. Effects of dietary vitamin C on the non-specific immunity and three HSPs mRNA expression of juvenile Wuchang bream (Megalobrama amblycephala) under pH stress. After 90
15、days feeding, 20 fish per tank were exposed to pH stress (pH9.5) for 15 days, the serum immunological and liver antioxidant indices, and the basal expression level of three heat shock peoteins (HSPs) mRNA were investigated at 0 d,1 d,5 d,10 d and 15 d, respectively. The results showed that compared
16、with the fish before pH stress, the serum ALP, TP, C3, C4 and liver SOD, ASAFR levels were significantly reduced (P5 mg/L，氨氮0.05） 。表 2-3 日粮中不同水平的 Vc 对团头鲂幼鱼血细胞的影响 Tab.2-3 Effects of various levels of Vc on blood cell of juvenile M. amblycephala (meanSE,n=9)Vc 添加量Vc/ (mg/kg)白细胞WBC/ (109 个/L)红细胞RBC/( 1
17、012 个/L)血红蛋白HGB/(g/L)血栓细胞PLT/(109 个/L)0.2 156.425.45a 1.440.08 72.335.78 60.3313.5733.4 146.586.85ab 1.360.09 60.676.67 54.334.1865.8 136.375.07bc 1.460.06 66.673.28 66.336.06133.7 128.765.62c 1.250.08 57.333.84 52.677.84251.5 131.745.54bc 1.340.06 60.672.96 52.3310.10501.5 139.134.77bc 1.410.08 67.
18、674.05 82.6729.33注 : 同一列数据中有不同上标英文字母表示有显著差异 (P0.05)。Notes :Values with different superscript letters in the same column are significantly different (P0.05).2.3 维生素 C 对团头鲂幼鱼血液生化指标的影响由表 4 可知，与对照组相比，65.8 mg/kg 试验组血清谷草转氨酶（AST）活性显著降低了 33.03%；133.7 mg/kg 和 501.5 mg/kg 试验组谷丙转氨酶（ALT ）的含量分别显著降低了 22.84%、18.53%；501.5 mg/kg 试验组甘油三酯（ TG）的水平显著提高了 43.75%（ P0.05 ） 。2.4 维生素 C 对团头鲂幼鱼肌肉相关指标的影响从表 5 可以看出，随饲料中维生素 C 添加量的增大，超氧化物歧化酶（SOD）活性呈先增大后降低趋势，在添加量为 133.7 mg/kg 时达到最高。与对照组相比，133.7 mg/kg 试验组 T-SOD 活性显著增大了 13.37%（P 0.05） 。各组肌肉滴水损失（DL） 、蒸煮损失（CL）和丙二醛（MDA）差异不显著（P0.05） 。
