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过氧化氢酶(CAT)酶活测定方法.doc

上传人:11xg27ws 文档编号:9209555 上传时间:2019-07-29 格式:DOC 页数:1 大小:25.50KB
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过氧化氢酶酶活测定方法一 配溶液:1. 1.5% NaBO34H2:称取 1.5g NaBO34H2O 溶于 100ml 纯水2. 0.067M 磷酸盐缓冲:称取磷酸氢二钠 2.398g 溶于 100ml 纯水,另称取磷酸二氢钠 1.05g溶于 100ml 纯水中,按配方配置成 PH 为 6.8 的 PBS3. 1M 硫:10.87ml 浓硫酸加入 200ml 纯水中4. 0.05M 高锰:0.79g 高锰酸钾溶于 100ml 纯水中。5. HCl 溶液:调 PH二 仪器:37水浴箱,滴定管, PH 试纸,移液器,15ML 的离心管,烧杯三 步骤:1.预先用 HCL 将 pH 调至 6.8 的 1.5%NaBO34H2O 8mL 加入含有 1.5mL 0.067M ph6.8 的磷酸盐缓冲液的烧杯中。2.在 37下保持 20min 后,实验组加入 0.5ml 酶,对照组加入等量的缓冲液,混合摇匀。35 分钟后,加入到 10ml1M 硫酸中4. 在烧瓶中用 0.05M 高锰酸钾滴定。5. 结果表示为硼酸单位/每克酶四 计算公式:酶活力=(V blankVsample)0.05稀释倍数/(样品浓度0.5) (1000/5min)1000(U/g)

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