1、信息生物学专业优秀论文 AcMNPV 多角体蛋白42 突变对包涵体结构的影响研究关键词：杆状病毒 多角体基因 定点突变 Bac-to-Bac 系统 多角体蛋白摘要：杆状病毒 (Baculovirus) 作为安全生物杀虫剂已广泛应用于有害昆虫的防治。此外，杆状病毒作为一种高效的真核表达系统及表达外源蛋白使其在基因治疗方面也获得了人们的关注。因此，对杆状病毒的基因结构和功能的研究具有重要意义。 多角体蛋白基因 (polyhedrin，polh) 是杆状病毒中保守性程度很高的基因。它编码由 245 个核苷酸组成的多肽，这种分子量为 29K 的多肽(多角体蛋白)是多角体的主要结构成份。由多角体蛋白构成
2、的蛋白质晶体对包埋在其中的病毒体具有保护作用，它使病毒体在自然环境中保持稳定和侵染能力。目前，多数杆状病毒产生包涵体都具有特定形状与特性。本论文是在用生物信息学系统研究杆状病毒多角体蛋白 N 端一、二级结构对多角体形态特征的影响，选取了氨基酸序列上 11 个位点的前提下，对其中的 142 进行定点突变，进而研究突变对包涵体特性的影响。 本文首先采用两步重叠 PCR 的方法对polh 基因的 I42 位点进行 I42S 和 I42N 的定点突变；然后采用 Bac-to-Bac 表达系统将突变的多角体蛋白(polyhedrin，polh) 基因转座到不含 polh 基因的Bacmid 中，构建了野
3、生型重组杆状病毒 AcMNPVwt 及含突变位点的两种重组杆状病毒 AcMNPVI42S 和 AcMNPVI42N；最后提取三种 Bacmid 转染 sf-9 细胞后，收取病毒上清并测定病毒滴度，把收集的病毒上清以病毒侵染复数为 5 TCID50/细胞感染 sf-9 细胞，同时光学显微镜观察拍照。结果显示 I42 位点的突变不影响病毒粒子的包埋，并且形成的多角体形状没有发生显著变化。正文内容杆状病毒 (Baculovirus) 作为安全生物杀虫剂已广泛应用于有害昆虫的防治。此外，杆状病毒作为一种高效的真核表达系统及表达外源蛋白使其在基因治疗方面也获得了人们的关注。因此，对杆状病毒的基因结构和功
4、能的研究具有重要意义。 多角体蛋白基因 (polyhedrin，polh) 是杆状病毒中保守性程度很高的基因。它编码由 245 个核苷酸组成的多肽，这种分子量为 29K 的多肽(多角体蛋白)是多角体的主要结构成份。由多角体蛋白构成的蛋白质晶体对包埋在其中的病毒体具有保护作用，它使病毒体在自然环境中保持稳定和侵染能力。目前，多数杆状病毒产生包涵体都具有特定形状与特性。本论文是在用生物信息学系统研究杆状病毒多角体蛋白 N 端一、二级结构对多角体形态特征的影响，选取了氨基酸序列上 11 个位点的前提下，对其中的 142 进行定点突变，进而研究突变对包涵体特性的影响。 本文首先采用两步重叠 PCR 的
5、方法对polh 基因的 I42 位点进行 I42S 和 I42N 的定点突变；然后采用 Bac-to-Bac 表达系统将突变的多角体蛋白(polyhedrin，polh) 基因转座到不含 polh 基因的Bacmid 中，构建了野生型重组杆状病毒 AcMNPVwt 及含突变位点的两种重组杆状病毒 AcMNPVI42S 和 AcMNPVI42N；最后提取三种 Bacmid 转染 sf-9 细胞后，收取病毒上清并测定病毒滴度，把收集的病毒上清以病毒侵染复数为 5 TCID50/细胞感染 sf-9 细胞，同时光学显微镜观察拍照。结果显示 I42 位点的突变不影响病毒粒子的包埋，并且形成的多角体形状没
6、有发生显著变化。杆状病毒 (Baculovirus) 作为安全生物杀虫剂已广泛应用于有害昆虫的防治。此外，杆状病毒作为一种高效的真核表达系统及表达外源蛋白使其在基因治疗方面也获得了人们的关注。因此，对杆状病毒的基因结构和功能的研究具有重要意义。 多角体蛋白基因 (polyhedrin，polh) 是杆状病毒中保守性程度很高的基因。它编码由 245 个核苷酸组成的多肽，这种分子量为 29K 的多肽(多角体蛋白)是多角体的主要结构成份。由多角体蛋白构成的蛋白质晶体对包埋在其中的病毒体具有保护作用，它使病毒体在自然环境中保持稳定和侵染能力。目前，多数杆状病毒产生包涵体都具有特定形状与特性。本论文是在
7、用生物信息学系统研究杆状病毒多角体蛋白 N 端一、二级结构对多角体形态特征的影响，选取了氨基酸序列上 11 个位点的前提下，对其中的 142 进行定点突变，进而研究突变对包涵体特性的影响。 本文首先采用两步重叠 PCR 的方法对 polh 基因的 I42 位点进行 I42S 和 I42N 的定点突变；然后采用 Bac-to-Bac 表达系统将突变的多角体蛋白(polyhedrin，polh) 基因转座到不含 polh 基因的 Bacmid中，构建了野生型重组杆状病毒 AcMNPVwt 及含突变位点的两种重组杆状病毒AcMNPVI42S 和 AcMNPVI42N；最后提取三种 Bacmid 转染
8、 sf-9 细胞后，收取病毒上清并测定病毒滴度，把收集的病毒上清以病毒侵染复数为 5 TCID50/细胞感染 sf-9 细胞，同时光学显微镜观察拍照。结果显示 I42 位点的突变不影响病毒粒子的包埋，并且形成的多角体形状没有发生显著变化。杆状病毒 (Baculovirus) 作为安全生物杀虫剂已广泛应用于有害昆虫的防治。此外，杆状病毒作为一种高效的真核表达系统及表达外源蛋白使其在基因治疗方面也获得了人们的关注。因此，对杆状病毒的基因结构和功能的研究具有重要意义。 多角体蛋白基因 (polyhedrin，polh) 是杆状病毒中保守性程度很高的基因。它编码由 245 个核苷酸组成的多肽，这种分子
9、量为 29K 的多肽(多角体蛋白)是多角体的主要结构成份。由多角体蛋白构成的蛋白质晶体对包埋在其中的病毒体具有保护作用，它使病毒体在自然环境中保持稳定和侵染能力。目前，多数杆状病毒产生包涵体都具有特定形状与特性。本论文是在用生物信息学系统研究杆状病毒多角体蛋白 N 端一、二级结构对多角体形态特征的影响，选取了氨基酸序列上 11 个位点的前提下，对其中的 142 进行定点突变，进而研究突变对包涵体特性的影响。 本文首先采用两步重叠 PCR 的方法对 polh 基因的 I42 位点进行 I42S 和 I42N 的定点突变；然后采用 Bac-to-Bac 表达系统将突变的多角体蛋白(polyhedr
10、in，polh) 基因转座到不含 polh 基因的 Bacmid中，构建了野生型重组杆状病毒 AcMNPVwt 及含突变位点的两种重组杆状病毒AcMNPVI42S 和 AcMNPVI42N；最后提取三种 Bacmid 转染 sf-9 细胞后，收取病毒上清并测定病毒滴度，把收集的病毒上清以病毒侵染复数为 5 TCID50/细胞感染 sf-9 细胞，同时光学显微镜观察拍照。结果显示 I42 位点的突变不影响病毒粒子的包埋，并且形成的多角体形状没有发生显著变化。杆状病毒 (Baculovirus) 作为安全生物杀虫剂已广泛应用于有害昆虫的防治。此外，杆状病毒作为一种高效的真核表达系统及表达外源蛋白使
11、其在基因治疗方面也获得了人们的关注。因此，对杆状病毒的基因结构和功能的研究具有重要意义。 多角体蛋白基因 (polyhedrin，polh) 是杆状病毒中保守性程度很高的基因。它编码由 245 个核苷酸组成的多肽，这种分子量为 29K 的多肽(多角体蛋白)是多角体的主要结构成份。由多角体蛋白构成的蛋白质晶体对包埋在其中的病毒体具有保护作用，它使病毒体在自然环境中保持稳定和侵染能力。目前，多数杆状病毒产生包涵体都具有特定形状与特性。本论文是在用生物信息学系统研究杆状病毒多角体蛋白 N 端一、二级结构对多角体形态特征的影响，选取了氨基酸序列上 11 个位点的前提下，对其中的 142 进行定点突变，
12、进而研究突变对包涵体特性的影响。 本文首先采用两步重叠 PCR 的方法对 polh 基因的 I42 位点进行 I42S 和 I42N 的定点突变；然后采用 Bac-to-Bac 表达系统将突变的多角体蛋白(polyhedrin，polh) 基因转座到不含 polh 基因的 Bacmid中，构建了野生型重组杆状病毒 AcMNPVwt 及含突变位点的两种重组杆状病毒AcMNPVI42S 和 AcMNPVI42N；最后提取三种 Bacmid 转染 sf-9 细胞后，收取病毒上清并测定病毒滴度，把收集的病毒上清以病毒侵染复数为 5 TCID50/细胞感染 sf-9 细胞，同时光学显微镜观察拍照。结果显
13、示 I42 位点的突变不影响病毒粒子的包埋，并且形成的多角体形状没有发生显著变化。杆状病毒 (Baculovirus) 作为安全生物杀虫剂已广泛应用于有害昆虫的防治。此外，杆状病毒作为一种高效的真核表达系统及表达外源蛋白使其在基因治疗方面也获得了人们的关注。因此，对杆状病毒的基因结构和功能的研究具有重要意义。 多角体蛋白基因 (polyhedrin，polh) 是杆状病毒中保守性程度很高的基因。它编码由 245 个核苷酸组成的多肽，这种分子量为 29K 的多肽(多角体蛋白)是多角体的主要结构成份。由多角体蛋白构成的蛋白质晶体对包埋在其中的病毒体具有保护作用，它使病毒体在自然环境中保持稳定和侵染
14、能力。目前，多数杆状病毒产生包涵体都具有特定形状与特性。本论文是在用生物信息学系统研究杆状病毒多角体蛋白 N 端一、二级结构对多角体形态特征的影响，选取了氨基酸序列上 11 个位点的前提下，对其中的 142 进行定点突变，进而研究突变对包涵体特性的影响。 本文首先采用两步重叠 PCR 的方法对 polh 基因的 I42 位点进行 I42S 和 I42N 的定点突变；然后采用 Bac-to-Bac 表达系统将突变的多角体蛋白(polyhedrin，polh) 基因转座到不含 polh 基因的 Bacmid中，构建了野生型重组杆状病毒 AcMNPVwt 及含突变位点的两种重组杆状病毒AcMNPVI
15、42S 和 AcMNPVI42N；最后提取三种 Bacmid 转染 sf-9 细胞后，收取病毒上清并测定病毒滴度，把收集的病毒上清以病毒侵染复数为 5 TCID50/细胞感染 sf-9 细胞，同时光学显微镜观察拍照。结果显示 I42 位点的突变不影响病毒粒子的包埋，并且形成的多角体形状没有发生显著变化。杆状病毒 (Baculovirus) 作为安全生物杀虫剂已广泛应用于有害昆虫的防治。此外，杆状病毒作为一种高效的真核表达系统及表达外源蛋白使其在基因治疗方面也获得了人们的关注。因此，对杆状病毒的基因结构和功能的研究具有重要意义。 多角体蛋白基因 (polyhedrin，polh) 是杆状病毒中保
16、守性程度很高的基因。它编码由 245 个核苷酸组成的多肽，这种分子量为 29K 的多肽(多角体蛋白)是多角体的主要结构成份。由多角体蛋白构成的蛋白质晶体对包埋在其中的病毒体具有保护作用，它使病毒体在自然环境中保持稳定和侵染能力。目前，多数杆状病毒产生包涵体都具有特定形状与特性。本论文是在用生物信息学系统研究杆状病毒多角体蛋白 N 端一、二级结构对多角体形态特征的影响，选取了氨基酸序列上 11 个位点的前提下，对其中的 142 进行定点突变，进而研究突变对包涵体特性的影响。 本文首先采用两步重叠 PCR 的方法对 polh 基因的 I42 位点进行 I42S 和 I42N 的定点突变；然后采用
17、Bac-to-Bac 表达系统将突变的多角体蛋白(polyhedrin，polh) 基因转座到不含 polh 基因的 Bacmid中，构建了野生型重组杆状病毒 AcMNPVwt 及含突变位点的两种重组杆状病毒AcMNPVI42S 和 AcMNPVI42N；最后提取三种 Bacmid 转染 sf-9 细胞后，收取病毒上清并测定病毒滴度，把收集的病毒上清以病毒侵染复数为 5 TCID50/细胞感染 sf-9 细胞，同时光学显微镜观察拍照。结果显示 I42 位点的突变不影响病毒粒子的包埋，并且形成的多角体形状没有发生显著变化。杆状病毒 (Baculovirus) 作为安全生物杀虫剂已广泛应用于有害昆
18、虫的防治。此外，杆状病毒作为一种高效的真核表达系统及表达外源蛋白使其在基因治疗方面也获得了人们的关注。因此，对杆状病毒的基因结构和功能的研究具有重要意义。 多角体蛋白基因 (polyhedrin，polh) 是杆状病毒中保守性程度很高的基因。它编码由 245 个核苷酸组成的多肽，这种分子量为 29K 的多肽(多角体蛋白)是多角体的主要结构成份。由多角体蛋白构成的蛋白质晶体对包埋在其中的病毒体具有保护作用，它使病毒体在自然环境中保持稳定和侵染能力。目前，多数杆状病毒产生包涵体都具有特定形状与特性。本论文是在用生物信息学系统研究杆状病毒多角体蛋白 N 端一、二级结构对多角体形态特征的影响，选取了氨
19、基酸序列上 11 个位点的前提下，对其中的 142 进行定点突变，进而研究突变对包涵体特性的影响。 本文首先采用两步重叠 PCR 的方法对 polh 基因的 I42 位点进行 I42S 和 I42N 的定点突变；然后采用 Bac-to-Bac 表达系统将突变的多角体蛋白(polyhedrin，polh) 基因转座到不含 polh 基因的 Bacmid中，构建了野生型重组杆状病毒 AcMNPVwt 及含突变位点的两种重组杆状病毒AcMNPVI42S 和 AcMNPVI42N；最后提取三种 Bacmid 转染 sf-9 细胞后，收取病毒上清并测定病毒滴度，把收集的病毒上清以病毒侵染复数为 5 TC
20、ID50/细胞感染 sf-9 细胞，同时光学显微镜观察拍照。结果显示 I42 位点的突变不影响病毒粒子的包埋，并且形成的多角体形状没有发生显著变化。杆状病毒 (Baculovirus) 作为安全生物杀虫剂已广泛应用于有害昆虫的防治。此外，杆状病毒作为一种高效的真核表达系统及表达外源蛋白使其在基因治疗方面也获得了人们的关注。因此，对杆状病毒的基因结构和功能的研究具有重要意义。 多角体蛋白基因 (polyhedrin，polh) 是杆状病毒中保守性程度很高的基因。它编码由 245 个核苷酸组成的多肽，这种分子量为 29K 的多肽(多角体蛋白)是多角体的主要结构成份。由多角体蛋白构成的蛋白质晶体对包
21、埋在其中的病毒体具有保护作用，它使病毒体在自然环境中保持稳定和侵染能力。目前，多数杆状病毒产生包涵体都具有特定形状与特性。本论文是在用生物信息学系统研究杆状病毒多角体蛋白 N 端一、二级结构对多角体形态特征的影响，选取了氨基酸序列上 11 个位点的前提下，对其中的 142 进行定点突变，进而研究突变对包涵体特性的影响。 本文首先采用两步重叠 PCR 的方法对 polh 基因的 I42 位点进行 I42S 和 I42N 的定点突变；然后采用 Bac-to-Bac 表达系统将突变的多角体蛋白(polyhedrin，polh) 基因转座到不含 polh 基因的 Bacmid中，构建了野生型重组杆状病
22、毒 AcMNPVwt 及含突变位点的两种重组杆状病毒AcMNPVI42S 和 AcMNPVI42N；最后提取三种 Bacmid 转染 sf-9 细胞后，收取病毒上清并测定病毒滴度，把收集的病毒上清以病毒侵染复数为 5 TCID50/细胞感染 sf-9 细胞，同时光学显微镜观察拍照。结果显示 I42 位点的突变不影响病毒粒子的包埋，并且形成的多角体形状没有发生显著变化。杆状病毒 (Baculovirus) 作为安全生物杀虫剂已广泛应用于有害昆虫的防治。此外，杆状病毒作为一种高效的真核表达系统及表达外源蛋白使其在基因治疗方面也获得了人们的关注。因此，对杆状病毒的基因结构和功能的研究具有重要意义。
23、多角体蛋白基因 (polyhedrin，polh) 是杆状病毒中保守性程度很高的基因。它编码由 245 个核苷酸组成的多肽，这种分子量为 29K 的多肽(多角体蛋白)是多角体的主要结构成份。由多角体蛋白构成的蛋白质晶体对包埋在其中的病毒体具有保护作用，它使病毒体在自然环境中保持稳定和侵染能力。目前，多数杆状病毒产生包涵体都具有特定形状与特性。本论文是在用生物信息学系统研究杆状病毒多角体蛋白 N 端一、二级结构对多角体形态特征的影响，选取了氨基酸序列上 11 个位点的前提下，对其中的 142 进行定点突变，进而研究突变对包涵体特性的影响。 本文首先采用两步重叠 PCR 的方法对 polh 基因的
24、 I42 位点进行 I42S 和 I42N 的定点突变；然后采用 Bac-to-Bac 表达系统将突变的多角体蛋白(polyhedrin，polh) 基因转座到不含 polh 基因的 Bacmid中，构建了野生型重组杆状病毒 AcMNPVwt 及含突变位点的两种重组杆状病毒AcMNPVI42S 和 AcMNPVI42N；最后提取三种 Bacmid 转染 sf-9 细胞后，收取病毒上清并测定病毒滴度，把收集的病毒上清以病毒侵染复数为 5 TCID50/细胞感染 sf-9 细胞，同时光学显微镜观察拍照。结果显示 I42 位点的突变不影响病毒粒子的包埋，并且形成的多角体形状没有发生显著变化。杆状病毒
25、 (Baculovirus) 作为安全生物杀虫剂已广泛应用于有害昆虫的防治。此外，杆状病毒作为一种高效的真核表达系统及表达外源蛋白使其在基因治疗方面也获得了人们的关注。因此，对杆状病毒的基因结构和功能的研究具有重要意义。 多角体蛋白基因 (polyhedrin，polh) 是杆状病毒中保守性程度很高的基因。它编码由 245 个核苷酸组成的多肽，这种分子量为 29K 的多肽(多角体蛋白)是多角体的主要结构成份。由多角体蛋白构成的蛋白质晶体对包埋在其中的病毒体具有保护作用，它使病毒体在自然环境中保持稳定和侵染能力。目前，多数杆状病毒产生包涵体都具有特定形状与特性。本论文是在用生物信息学系统研究杆状
26、病毒多角体蛋白 N 端一、二级结构对多角体形态特征的影响，选取了氨基酸序列上 11 个位点的前提下，对其中的 142 进行定点突变，进而研究突变对包涵体特性的影响。 本文首先采用两步重叠 PCR 的方法对 polh 基因的 I42 位点进行 I42S 和 I42N 的定点突变；然后采用 Bac-to-Bac 表达系统将突变的多角体蛋白(polyhedrin，polh) 基因转座到不含 polh 基因的 Bacmid中，构建了野生型重组杆状病毒 AcMNPVwt 及含突变位点的两种重组杆状病毒AcMNPVI42S 和 AcMNPVI42N；最后提取三种 Bacmid 转染 sf-9 细胞后，收取
27、病毒上清并测定病毒滴度，把收集的病毒上清以病毒侵染复数为 5 TCID50/细胞感染 sf-9 细胞，同时光学显微镜观察拍照。结果显示 I42 位点的突变不影响病毒粒子的包埋，并且形成的多角体形状没有发生显著变化。特别提醒 ：正文内容由 PDF 文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 http:/ 。如还不能显示，可以联系我 q q 1627550258 ，提供原格式文档。我们还可提供代笔服务，价格优惠，服务周到，包您通过。“垐垯櫃 换烫梯葺铑?endstreamendobj2x 滌甸?*U 躆 跦?l, 墀 VGi?o 嫅#4K 錶 c#x 刔
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