1、分 类 号：R725.4 单位代码：10183研究生学号：2006732008 密 级：公 开吉 林 大 学硕士学位论文结缔组织生长因子在病毒性心肌炎中的作用及参麦注射液的干预作用研究Experimental study of function of connective tissue growth factor and effects of Shenmai injection in viral myocarditis作者姓名：张圳专 业：儿科学研究方向：小儿心血管疾病指导教师：孙景辉 教授培养单位：第一临床医院2009 年 03 月结缔组织生长因子在病毒性心肌炎中的作用及参麦注射液的干预作用
2、研究Experimental study of function of connective tissue growth factor and effects of Shenmai injection in viral myocarditis作者姓名：张圳专业名称：儿科学指导教师：孙景辉 教授学位类别：医学硕士答辩日期： 2009 年 5 月 20 日未经本论文作者的书面授权，依法收存和保管本论文书面版本、电子版本的任何单位和个人，均不得对本论文的全部或部分内容进行任何形式的复制、修改、发行、出租、改编等有碍作者著作权的商业性使用（但纯学术性使用不在此限） 。否则，应承担侵权的法律责任。吉林大
3、学硕士学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交学位论文，是本人在指导教师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：张圳日期： 2009 年 04 月 14 日中国优秀博硕士学位论文全文数据库投稿声明研究生院：本人同意中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程的内容，愿意将本人的学位论文委托研究生院向中国学术期刊（光盘版）电子杂志社的中国优秀博硕士学位论文全文数据库投稿，希望中国优秀博硕士学位论
4、文全文数据库给予出版，并同意在中国博硕士学位论文评价数据库和 CNKI 系列数据库中使用，同意按章程规定享受相关权益。 论文级别：硕士 博士 学科专业： 儿科学论文题目： 结缔组织生长因子在病毒性心肌炎中的作用及参麦注射液的干预作用研究作者签名： 张圳 指导教师签名： 孙景辉2009 年 4 月 14 日 作者联系地址（邮编）： 吉林大学第一医院小儿心血管科作者联系电话：13504308397提 要本文观察结缔组织生长因子（CTGF）在病毒性心肌炎（VMC）心肌组织中的表达情况，探讨结缔组织生长因子在 VMC 发病机制中的作用,同时观察参麦注射液对 VMC 的干预作用。实验选取 BALB/C
5、小鼠 110 只，分为对照组、VMC 组和治疗组。应用 CVB3 感染小鼠建立 VMC 模型。记录小鼠死亡情况，称重存活小鼠，测定心肌病理积分，应用 MASSON 染色法观察小鼠心肌胶原纤维分布，计算机图像分析测量胶原容积分数（CVF） ，检测血清CK-MB 水平，应用免疫组织化学方法对 TGF-1、CTGF 蛋白在小鼠心肌中的分布进行定性、半定量分析；应用 RT-PCR 方法检测小鼠心肌组织 TGF-1、 CTGF mRNA 的表达；并作相关性分析。结果显示，VMC 小鼠心肌组织中 CTGF 的表达随病毒感染时间延长而增强； VMC 小鼠心肌组织中 CTGF的表达与 TGF-1 的表达呈显著
6、正相关；VMC 小鼠心肌组织中 CTGF 的表达与心肌纤维化密切相关，但 CTGF 的表达早于心肌纤维化的出现；治疗组与VMC 组比较，小鼠存活率提高，心肌炎症及心肌纤维化程度减轻。从而得出结论，CTGF 参与了 VMC 的发生发展过程；CTGF 可诱导 VMC 的心肌纤维化进程，且该过程由 TGF-1 介导发生；参麦注射液能降低 VMC 的死亡率，改善心肌缺血，减轻心肌炎症；参麦注射液能够减轻心肌纤维化程度，且该作用可能是通过降低体内过氧化物水平来完成的。I目 录英文缩略词 .1第 1 章 绪论 .31.1 病毒性心肌炎发病机制的研究进展 .31.2 结缔组织生长因子在心血管疾病中作用的研究
7、进展 .71.3 病毒性心肌炎的治疗现状及参麦注射液的研究进展 .11第 2 章 材料与方法 .172.1 实验材料 .172.2 实验方法 .19第 3 章 结果 .243.1 VMC 小鼠模型的建立及小鼠表现、死亡情况 .243.2 各组小鼠体重及心脏重量的比较 .263.3 血清 CK-MB 水平分析 .283.4 形态学观察 .293.5 心肌组织 CTGF、TGF- 1蛋白的表达 .323.6 小鼠心肌组织中 CTGF、TGF- 1 mRNA 的表达 .353.7 CTGF 蛋白表达水平与 TGF- 1蛋白表达水平的关系 .373.8 CTGF 蛋白表达水平与心肌病理积分的关系 .3
8、83.9 CTGF 蛋白表达水平与心肌胶原含量的关系 .39第 4 章 讨论 .40结 论 .46参考文献 .47II攻读学位期间发表的学术论文及取得的科研成果 .57致 谢 .58中文摘要 .1Abstract.4导师及作者简介 .81英文缩略词英文缩略词英文缩写 英文全称 中文全称及注释bFGF basic Fibroblast Growth Factor 成纤维细胞生长因子CK-MB creatine kinase isoenzyme MB 血清肌酸激酶同工酶CSF colony stimulating factor 集落刺激因子CTGF connective tissue growth
9、 factor 结缔组织生长因子CTL cytolytic T lymphocytes 溶细胞性 T 淋巴细胞CV coxsackie virus 柯萨奇病毒DAB diaminobenzidine 二氨基联苯胺DCM dilated cardiomyopathy 扩张型心肌病ECM extracellular matrix 细胞外基质HRB heart reactive antibody 心脏反应性抗体ICMV intercellular adhesion molecule 细胞间黏附分子IFN interferon 干扰素IL interleukin 白细胞介素LPO lipid pero
10、xidation 血清脂质过氧化物MDA malondialdehyde 丙二醛NGF nerve growth factor 神经生长因子PBS phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液PCR polymerase chain reaction 多聚酶链反应PDGF platete rivied growth factor 血小板源性生长因子2RT-PCR reverse transcription polymerase chain reaction逆转录多聚酶链反应SOD super oxide dimutese 超氧化物歧化酶SP Streptavidinpero
11、xidase immunoperoxidase technique链霉菌抗生素蛋白-过氧化酶连接法TGF- transforming growth factor 转化生长因子-TNF- Tumor necrosis factor- 肿瘤坏死因子 VMC viral myocarditis 病毒性心肌炎第 1 章 绪论3第第 1章章 绪论绪论1.1 病毒性心肌炎发病机制的研究进展心肌炎是指因感染或其他原因引起的弥漫性或局灶性心肌间质的炎性细胞浸润和其近的心肌纤维坏死或退行性病变，可以由多种病原感染引起 1。其中以病毒性心肌炎（Viral Myocarditis，VMC）最为常见。病毒感染不仅可引
12、起心肌细胞的变性和坏死，也可产生心内膜炎、心包炎以及其他脏器的炎性病变，因此病毒性心肌炎既可作为一种独立的疾病，也可表现为全身性感染的一部分。1956 年 Javett 首先报道本病，此后各地学者逐渐认识本病。1986 年日本病理学会尸检年鉴发表：19581977 年 20 年间尸检中心肌炎约占0.11%（434/377841 例） 。欧美学者认为本病较常见，自猝死者尸检中检出心肌炎者占 1%5%。近年来， VMC 的发病率呈逐年上升的趋势 2。我国九省市心肌炎协作组调查 3显示 19781980 年 14 岁以下儿童 VMC 发病率高达29.15/10 万，患病率为 41.86/10 万，心肌炎患儿占住院患儿的 5.97。1996年 78 月，吉林省东丰县发生 VMC 的暴发流行，共发生 38 例，死亡 3 例 4。病毒性心肌炎持续病毒感染易发展成扩张型心肌病，甚至有学者认为扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy, DCM)是病毒性心肌炎的终末期 5。而病毒性心肌炎和扩张型心肌病又是心源性猝死的重要原因，有调查显示二者占心源性猝死原因的 3.1%6.2%6。由此可见，病毒性心肌炎严重影响着儿童身体健康，因此关于 VMC 的发病机制及治疗方法的深入探讨具有一定的理论及实践意义。
