免疫学实验指导刘佳斌编生命科学学院生物技术系2005.3实验 1动物的注射采血及血清制备家兔采血有耳静脉采血,耳 动脉放血,心 脏采血和劲动 脉放血法,耳缘静脉采血一般适用于只需少量血液,常用于免疫注射采少量血,测其效价,心脏采血和耳动脉采血法,耳缘静脉采血一般只适用少量采血。常用于免疫注射采少量
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1、 免疫学实验指导刘佳斌编生命科学学院生物技术系2005.3实验 1动物的注射采血及血清制备家兔采血有耳静脉采血,耳 动脉放血,心 脏采血和劲动 脉放血法,耳缘静脉采血一般适用于只需少量血液,常用于免疫注射采少量血,测其效价,心脏采血和耳动脉采血法,耳缘静脉采血一般只适用少量采血。常用于免疫注射采少量血,测其效价。心脏采血和耳缘动脉采血可采大量血有能保存动物,从 动脉可采大量, 动物死去。兔一般采血 20ML 不影响其存活。鸡一般用心脏采血法,每只鸡 一次取血 20ML,不影响其存活,经 36 个月后,可再次采血。注射途径一般。
2、对流免疫电泳,一、基本原理 在pH值8.6的琼脂凝胶中,抗体球蛋白只带有微弱的负电荷,而且它分子又较大,所以泳动慢,受电渗作用的影响也大,往往不能抵抗电渗作用,故在电泳时,反而向负极倒退。而一般抗原蛋白质常带较强的负电荷,分子又较小,所以泳动快,虽然由于电渗作用泳动速度减慢,但仍能向正极泳动。如将抗原置阴极,抗体置阳极,电泳时,两种成分相对泳动,一定时间后抗原和抗体将在两孔之间相遇,并在比例适当的地方形成肉眼可见的沉淀线。这样由于电泳的作用,不仅帮助抗体定向移动,因而加速了反应的出现,而且也限制了琼脂。
3、资料内容仅供您学习参考,如有不当或者侵权,请联系改正或者删除。 医学免疫学实验技术 概述 免疫学是一门既古老又崭新的学科, 涉及医学各个领域, 并与理 工农各学科相互渗透。医学免疫学是生命科学的前沿学科 , 也是医学生的主干必修课程之一。 当前免疫学的研究已经进入了一个崭新 的时代。现代免疫学的研究和应用涉及到生物医学的各个领域。 它与分子生物学一样是生物医学基础研究和临床工作不可缺的。
4、1第 1 次课教学整体设计课 题 第十四章 超敏反应授课时间 第 周 星期 ( 月 日) 第 节 课时 2授课类型 理论课()实验课( )实训课( )习题课( )讨论课( )现场教学( )其它:教学资源 挂图( ) 模型( ) 实物( ) 多媒体( ) 音像( ) 报纸( ) 其它:黑板教学方法讲授法() 讨论法() 启发式() 案例教学法( ) 现场教学法( ) 角色扮演法( ) 项目教学法( ) 情境教学法( ) 其它:教学目标(包括态度、技能、知识目标)态度目标:培养学生勤于思考,做事认真的良好作风;培养学生勇于创新,敬业、乐业的工作作风。
5、医学免疫学实验技术概 述免疫学是一门既古老又崭新的学科,涉及医学各个领域,并与理工农各学科相互渗透。医学免疫学是生命科学的前沿学科,也是医学生的主干必修课程之一。目前免疫学的研究已经进入了一个崭新的时代。现代免疫学的研究和应用涉及到生物医学的各个领域。它与分子生物学一样是生物医学基础研究和临床工作不可缺的工具。医学免疫学是一门实践性、应用性很强的学科,教学过程分为理论教学和实验教学。实验教学作为免疫学教学的重要环节,直接影响大人才的培养目标的实现,特别是在培养学生的科学态度、实践技能、创新能力方。
6、免疫实验抗血清制备及抗体效价检测摘要:用具有抗原性的物质牛血清白蛋白(BSA)注入到健康动物例如鼠、兔的机体后,将引起免疫应答,并会形成浆细胞,分泌抗体。抗体主要存在于血清中,经多次免疫,使血清中的抗体量达到要求浓度,然后采集动物血液,再从血液中分离析出血清,从而获得抗血清。抗血清,是指含有免疫蛋白的血清。抗体效价指抗体的物理状态及其在体内滞留时间,以其与抗原反应的多少来表示其免疫效果。此次实验主要是进行小鼠的牛血清白蛋白(BSA)抗血清的制备过程,并通过酶免疫吸附试验(ELISA)对其进行抗体效价检测。关。
7、实 验 一 凝 集 试 验颗 粒 性 抗 原 (细 菌 、 螺 旋 体 、 红 细 胞 等 )与 相 应 抗 体 结 合 后 , 在 有 适 量 电 解 质 存 在下 , 抗 原 颗 粒 可 相 互 凝 集 成 肉 眼 可 见 的 凝 集 块 , 称 为 凝 集 反 应 (Agglutination reaction)或凝 集 试 验 。 参 与 凝 集 反 应 的 抗 原 称 为 凝 集 原 ( Agglutinogen) , 抗 体 称 为 凝 集 素( Agglutinin) 。细 菌 或 其 它 凝 集 原 都 带 有 相 同 的 负 电 荷 , 在 悬 液 中 相 互 排 斥 而 呈 现 均 匀 的 分 散 状态 。 抗 原 与 相 应 抗 体 相 遇 后 可 以 发 生 特。
8、动动动 物物物 免免免 疫疫疫 学学学 实实实 验验验 指指指 导导导第 二 版徐 春 厚 谢 为 天 雍 艳 红 编动 物 医 学 生 物 技 术 专 业 用广 东 海 洋 大 学 教 材 科 出 版二 00 七 年 二 月 二 十 八 日1目 录实 验 一 凝 集 试 验 1实 验 二 沉 淀 试 验 4实 验 三 溶 血 试 验 8实 验 四 病 毒 的 血 凝 及 血 凝 抑 制 试 验 10实 验 五 E-玫 瑰 花 环 试 验 13实 验 六 EA 玫 瑰 花 环 试 验 15实 验 七 EAC 玫 瑰 花 环 试 验 17实 验 八 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 18实 验 九 荧 光 抗 体 技 术 20实 验 十 多 克 隆 抗。
9、免疫学应用实验一、E-玫瑰花环形成实验 掌握人 T 淋巴细胞形成 E-花环的实验原理和操作方法; 熟悉 T 淋巴细胞的功能检测方法。二、中性粒细胞吞噬功能测定 掌握中性粒细胞吞噬金黄色葡萄球菌实验的操作过程;瑞氏染色的基本 步骤及吞噬百分率的计算。三、抗原抗体反应及免疫学标本片的观察 掌握抗原抗体反应的特异性;熟悉凝集反应的原理、方法和分类。掌握 胶乳凝集试验的原理,熟悉试验方法,了解其应用;熟悉沉淀反应的原理;熟悉双向琼脂扩散、单向琼脂扩散的操作方法和结果分析。(1)凝集反应 类风湿因子的检测(2)观察琼脂中抗原。
10、实验 1 红细胞与白细胞的计数(必修)目的与原理掌握鱼类采血技术和鱼类红、白细胞计数的原理和方法,并测定不同鱼类的红、白细胞含量及其差异。采用稀释法计数鱼类单位容积血液内的红细胞和白细胞数。由于血液中红、白血细胞数很多无法直接计数,故需用适当的溶液将血液稀释。然后将稀释血滴入血细胞计数板上,在显微镜下计数一定容积的红、白细胞数。再将所得的结果换算为每立方 mm 血液中红、白细胞个数。实验对象 鲤、鲫或草鱼。试剂与器材显微镜,血细胞计数板 29,计数器 29,鱼用注射器(1ml 或 5ml,6 号针头) ,吸血管,凹瓷盘。
11、免疫学实验技术,抗体,定义:指机体的免疫系统在抗原刺激下,由B淋巴细胞或记忆细胞增殖分化成的浆细胞所产生的、可与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。,医学应用:,科研应用:免疫共沉淀、免疫印迹、染色质免疫共沉淀、免疫荧光技术、ELISA等,1.诊断:各类血清学检测,抗人球蛋白测试,早孕检测 等,2.治疗:单克隆抗体疗法(类风湿性关节炎多发性硬化症等),肿瘤治疗。,多抗来源,动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系,具有不同基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因。
12、免疫学实验课件,生化与免疫学实验室,中性粒细胞的吞噬作用,【实验目的】1.熟悉中性粒细胞吞噬实验的原理和方法。2.通过本实验理解机体的非特异性免疫机制。,【实验原理】中性粒细胞具有吞噬杀菌功能,当与颗粒性物质(如葡萄球菌等)混合孵育一定时间后,颗粒性物质被吞噬杀灭,根据吞噬率、吞噬指数可反映该细胞的吞噬功能。,【实验材料】1.表皮(白色)葡萄球菌菌液(浓度610亿/ml)。2.肝素溶液(25U/ml);甲醇,碱性美蓝(或瑞氏)染液。3.血红蛋白吸管,凹玻片,载玻片,采血针,微量加样器,湿盒,显微镜,恒温培养箱,75%酒精,棉。
13、免疫学实验整理 一、凝集试验、吞噬试验 ( 一)凝集试验 1、直接凝集反应( ABO 血型鉴定) 2、间接凝集反应(类风湿因子测定) 3、金黄色葡萄球菌协同凝集试验 (二)吞噬试验(示教) 1、中性粒细胞的吞噬作用(小吞噬) 2、巨噬细胞的吞噬作用(大吞噬) 名解: 1.免疫学检测技术: 利用免疫学原理来检测抗原、免疫分子(抗体、补体、细胞因子和粘附分子等)及免疫细胞等免疫学研究对象的实验过程。 如凝集反应可用于检测抗原抗体,吞噬十堰可用于检测免疫细胞等。 2.凝集反应( agglutination reaction) :在一定浓度的电解质溶液中。
14、免疫学教案第一章 免疫学概论课程名称:免疫学 授课内容:免疫学概论授课对象:06 级生物类本科各专业 授课学时:2.5 学时授课方式:理论 教材:医学免疫学 (第五版 金伯泉主编)一、教学目的要求1.掌握:免疫的概念,免疫应答的类型:固有性免疫和适应性免疫的含义,免疫系统的组成及其功能,克隆选择学说。2.了解:两种免疫应答的参与成分;免疫学发展简史及展望。二、教学内容及时间分配前言及导入 10 分钟免疫系统的组成及其基本功能 30 分钟免疫应答的类型及特点 20 分钟免疫学的应用 10 分钟免疫学发展简史及展望 55 分钟三、重点。
15、医学免疫学教案2医学免疫学 概述 第一章 抗原(一)授课日期 15.9.12授课时数:2 学时教学目标掌握免疫的功能、抗原的概念。熟悉影响抗原免疫原性的因素。教学重难点抗原的两种特性授课内容医学免疫学 概述一、免疫的概念与功能免疫:指机体识别和排除抗原性异物,执行免疫防卫,维持自身生理平衡与稳定的功能。免疫功能分三种:1.免疫防御 反应过强,将引起超敏反应性疾病;反应过弱会导致持续感染或免疫缺陷病。2.免疫稳定 功能发生紊乱可引起自身免疫病。3.免疫监视 功能异常将导致肿瘤的发生。二、免疫的类型1.非特异性免疫 也称固有。
16、 实验一 免疫球蛋白的粗提(盐析法)一、 实验目的1、 学习免疫球蛋白的粗提方法2、 实践 IgG 分离纯化过程3、 了解分离纯化抗体的原理二、 实验原理随着免疫学的发展和需要,免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多,有单一法,常用盐析法、凝胶柱层析、离子交换剂层析以及免疫亲和层析等技术对血清抗体进行分离纯化。但大多数采用二步法以上相结合的方法,特别是以硫酸铵提纯为基础,再经过透析或层析柱的方法来提高免疫球蛋白及其各成分的纯度最为常用。硫酸铵溶液能使蛋白质胶体脱水并中和其电荷而使之沉。
17、第一章 免疫学概要1. 免疫:免疫是指机体免疫系统识别“自身”与“非己”抗原,并通过面已经打排除抗原异物,以维持机体生理平衡的功能。2. 免疫防御:免疫防御是指机体排斥外源性抗原异物的一种免疫保护功能,这是机体不受外来物质干扰,保持物种纯洁的生理机制。3. 免疫自稳:免疫自稳是指机体识别和清除自身衰老残损的组织、细胞的能力,是机体维持正常内环境稳定的重要生理机制。4. 免疫监视:免疫监视是指机体识别和清除病毒感染的细胞和异常突变细胞的一种生理功能,借以监视和抑制恶性肿瘤在体内生长。5. TCR:TCR 即 T 细胞抗原受。
18、实 验 一 凝 集 试 验颗 粒 性 抗 原 (细 菌 、 螺 旋 体 、 红 细 胞 等 )与 相 应 抗 体 结 合 后 , 在 有 适 量 电 解 质 存 在下 , 抗 原 颗 粒 可 相 互 凝 集 成 肉 眼 可 见 的 凝 集 块 , 称 为 凝 集 反 应 (Agglutination reaction)或凝 集 试 验 。 参 与 凝 集 反 应 的 抗 原 称 为 凝 集 原 ( Agglutinogen) , 抗 体 称 为 凝 集 素( Agglutinin) 。细 菌 或 其 它 凝 集 原 都 带 有 相 同 的 负 电 荷 , 在 悬 液 中 相 互 排 斥 而 呈 现 均 匀 的 分 散 状态 。 抗 原 与 相 应 抗 体 相 遇 后 可 以 发 生 特。
19、 医学免疫学课程实验教案实 验 一实验名称:E-玫瑰花环形成实验 计划学时:4 学时实验目的与要求:1.掌握人 T 淋巴细胞形成 E-花环的实验原理和操作方法。2.熟悉 T 淋巴细胞的功能检测方法。实验仪器、试剂:淋巴细胞分层液(Ficou) 、1%绵羊红细胞、肝素抗凝人血、无钙镁 Hanks 液、水平离心机、0.8% 戊二醛、37 水浴箱、显微镜、其他。实验对象:实验同学实验原理:体外测定人外周血中 T 淋巴细胞数量的方法有多种 ,以玫瑰花环试验最为简易常用,T 淋巴细胞数量的变化与机体的细胞免疫功能状态有一定关系。人周围血液中 T 淋巴细胞表面。
20、键入公司名称免疫学实验教案研究生教育实习潘熙萍(Y20090201)2011/1/14在此处键入文档的摘要。摘要通常是对文档内容的简短总结。在此处键入文档的摘要。摘要通常是对文档内容的简短总结。实验一 免疫血清的制备一、实验目的熟悉免疫血清的制备过程;了解动物实验的基本知识。二、实验原理将抗原物质经适当途径,按照预先制定的免疫方案免疫动物,经过一定时间,可刺激机体产生特异抗体并释放入血液,当血中抗体达到一定效价时采血,分离血清,即为特异性免疫血清(又称为抗血清) 。因抗原具有多种表位,可激活多个克隆的 B 细胞活化产生。