酶的相关实验

1培优点三 设计酶的相关实验一、 “对照实验法”设计酶的相关实验应用 1:“对比实验法”探究酶的催化作用典例 1.食虫植物是一种会捕获并消化动物的植物,为了验证其分泌液中有蛋白酶,某学生设计了两组实验,如图所示,在适宜温度的水浴中保温一段时间后,试管 1、2 中加入适量双缩脲试剂,试管 3、4 不加

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1、1培优点三 设计酶的相关实验一、 “对照实验法”设计酶的相关实验应用 1:“对比实验法”探究酶的催化作用典例 1.食虫植物是一种会捕获并消化动物的植物,为了验证其分泌液中有蛋白酶,某学生设计了两组实验,如图所示,在适宜温度的水浴中保温一段时间后,试管 1、2 中加入适量双缩脲试剂,试管 3、4 不加任何试剂,下列有关实验的叙述正确的是( )A如果试管 1 中出现紫色反应,即能证明分泌液中有蛋白酶B实验的观测指标能证明分泌液中有蛋白酶C由试管 2、3 构成的对照实验,即可得出实验结论D实验是对照组、实验为实验组,两组一起才能。

2、实验十,DNA的限制性 内切酶酶切,一、实验目的,了解核酸限制性内切酶的特点及其对DNA的酶切过程 学会设计构建体外重组DNA分子的方法,并根据目的基因合理选择载体与限制性内切酶以及DNA的酶切技术,二、实验原理,EcoRI限制性内切酶的识别与切割顺序为:5GAATTC33CTTAAG5 Xhol I限制性内切酶的识别与切割顺序为:5CTCGAG33TAGCTC5,三、实验材料,仪器:水浴锅、制冰机、离心机、电泳设备、各式移液枪、核酸紫外检测仪等。 1.5ml离心管、移液枪枪头等。 DNA样品:上一个实验获得的质粒DNA 限制性内切酶Xhol I和EcoR I(Takara),四、实验步骤,。

3、三、酶的特性实验设计,1、高效性 2、专一性 3、作用条件温和性,(一)、酶具有高效性,说明过氧化氢酶比Fe3+的催化效率高得多。,比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率,(二)、酶具有专一 性,加入淀粉酶2滴,振荡,试管下半部浸入60左右的热水中,反应5min,2号试管中加入2mL 蔗糖溶液,加入斐林试剂,振荡,约60水浴2min,1号试管中加入2mL 淀粉溶液,蓝色,无变化,棕色,砖红色沉淀,淀粉酶只能催化淀粉水解,不能催化蔗糖水解。,探究淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用,该实验能用碘液检测实验结果不?为什么?,(三)、作用条件温和性,能不能设计一个实验。

4、影响酶促反应的因素,课堂目标 1掌握影响酶作用的几个因素及 实验的原理 2以严谨的科学态度进行实验操作,准确记录。并对结果进行讨论分析,完成实验报告,实验原理酶促反应在低温时,反应速度较慢甚至停止。随着温度升高,反应速度逐渐加快。当达到最适温度时,酶促反应速度达最大值。人体内大多数酶的最适温度在 37左右。如温度过高,反应速度反而下降,甚至停止。这主要由于酶蛋白因高温变性失活之故。 酶活性与溶液pH有关,pH既影响酶蛋白本身构象,也影响底物解离程度,从而改变酶与底物结合和催化作用。故每种酶都有其最适pH的作用环。

5、名称:探究淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用,目的: 1初步学会探索酶催化特定化学反应的方法。 2. 探索淀粉酶是否只能催化特定的化学反应。,实验原理:淀粉和蔗糖都是非还原糖,它们在酶的催化作用下都能水解成还原糖,还原糖能够与斐林试剂发生氧化还原反应,生成砖红色沉淀。,器材及药品:滴管、试管、火柴、试管架、温度计、三脚架、石棉网、酒精灯、烧杯、质量分数为2%的新鲜淀粉酶溶液、质量分数为3%的可溶性淀粉溶。

6、实验 9,影响酶促反应的因素 温度、pH、激活剂及抑制剂,实验目的,1.学习酶的催化作用特点及影响酶活力的主要因素 2.学习测定酶活力的实验方法,实验原理,生物机体广泛存在各种不同功能的酶,催化不同的生物化学反应:过氧化氢酶能催化过氧化氢分解释放氧气和水;唾液淀粉酶可将淀粉逐步水解成各种糊精、麦芽糖,用碘显色或本尼迪试剂可以检验酶催化的水解反应产物,并比较反应速度,从而衡量酶的比活性。通过试管颜色反应,可以定性研究影响酶活性的因素。,酶催化反应的活力受到温度、酸碱度和离子强度等因素的影响。一般,温度每增高10,反。

7、实验三、质粒DNA的限制性酶切鉴定、割胶回收与纯化(10学时),1. 内切酶的作用原理2. 常用的酶切体系及作用条 3. 影响酶切的因素 4. 电泳检测 5. 胶回收试剂盒的操作步骤及注意事项,概述 没有核酸限制性内切酶的发现和应用,就没有分子生物学的兴旺发展,在基因工程和分子生物学中,没有一种酶像限制性内切酶那样举足轻重和应用广泛。 限制性内切酶均来源于原核生物,它们的功能类似高等动物的免疫系统,用于抗击外来DNA的入侵。 核酸限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链。

8、实验三 DNA限制性内切酶消化酶切,实验原理,限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。,限制性内切酶可分为三类,类限制性内切酶,类酶切割位点在识别序列中,有的在对称轴处切割, 产生平末端的DNA片段(如Sma: 5-CCCGGG-3);有的切割位点在对称轴一侧,产生带有单链突出末端的DNA片段称粘性末端,如EcoR切割识别序列后产生两个互补的粘性末端。5GAATTC3 5 G AATTC3 3CTTAAG 5 3 CTTAA G5,实验材料和试剂,实验材料:玉米基因组DNA 实验试剂: BamH I 酶及其酶切缓冲液:购买成。

9、探究酶的高效性,上海市真如中学 孔慧敏 08-04,实验目的,了解酶的催化特性。,实验原理,通过改变酶的作用环境,了解酶的作用条件。 通过和非生物催化剂的比较,了解酶的作用特性。,实验材料,新鲜猪肝匀浆。 经高温处理的猪肝匀浆。 3.5%FeCl溶液。 经高温处理的3.5%FeCl溶液。,仪器和试剂,试管5支,标号15。 试管架。 3%H2O2 蒸馏水 量筒 滴管 线香 火柴,实验步骤,按下表加入试剂:,观察与检验,各试管内气泡发生情况。 以点燃的线香检验放出气体。,记录、分析、讨论,记录观察结果并完成实验报告。 讨论题 2、3号试管中放出气泡数是否相等? 。

10、2019年高考生物与酶相关的实验探究同步 练习(含答案) 在酶的催化反应体系中,反应物分子被称为底物,底物 通过酶的催化转化为另一种分子。以下是与酶相关的实验探 究同步练习,希望对考生复习有帮助。 (福建理综,26)大菱鳏是我国重要的海水经济鱼类。研究性 学习小组尝试对大菱鲜消化道中蛋白酶的活性进行研究。 查询资料得知,18 C时,在不同pH条件下大菱鲜消化道 各部位蛋白酶活性如图1。由图可知,在。

11、实验四 酶的特性 实验目的 加深对酶的性质的认识 实验内容 温度对酶活力的影响pH对酶活力的影响酶的激活及抑制剂酶的专一性 温度对酶活力的影响 一 原理 酶的催化作用受温度的影响 在最适温度下 酶的反应速度最高 大多数动物酶的最适温度为37。

12、实验九 酶的特性 实验目的 加深对酶的性质的认识 实验内容 温度对酶活力的影响pH对酶活力的影响酶的激活及抑制剂酶的专一性 温度对酶活力的影响 一 原理 酶的催化作用受温度的影响 在最适温度下 酶的反应速度最高 大多数动物酶的最适温度为37。

13、酶的特性,【目的要求】,加深对酶的性质的认识。,【基本原理】,本实验由温度对酶活力的影响;PH对酶活力的影响;酶的激活剂及抑制剂;酶的专一性4组实验组成。(一)温度对酶活力的影响酶的催化作用受温度的影响。在最适温度下,酶的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为37-40,植物酶的最适温度为50-60。酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些酶的干燥制剂,虽加热到100,其活性并无明显的改变,但在100的溶液中却很快地完全失去活性。低温能降低酶或抑制酶的活性,但不能使酶失活。淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色,糊精按其分子的大小。

14、酶的特性,一、目的 加深对酶的认识 二、内容 本实验由温度对酶活力的影响;pH对酶活力的影响;酶的激活剂以及抑制剂;酶的专一性4组实验。,(一)温度对酶活力的影响,酶的催化作用受温度的影响很大。在最适温度下,酶的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为3740,植物酶的最适温度为5060。 酶对温度的稳定性与其存在形式有关。已经证明大多数酶在干燥的固体状态下比较稳定,能在室温下保存数月以至一年。 低温能降低或抑制酶的活性,但不能使酶失活。,【实验步骤】,取三只试管,编号后按下表加入试剂。,摇匀后,将1、3号管放入37度恒温。

15、实验十:酶的特性,实验目的:加深对酶的性质的认识。 实验内容: 温度对酶活力的影响 pH对酶活力的影响 酶的激活及抑制剂 酶的专一性,温度对酶活力的影响,一、原理:酶的催化作用受温度的影响,在最适温度下,酶的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为3740,植物酶的最适温度为5060 。酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些酶的干燥制剂,虽加热到100,其活性并无明显改变,但在100的溶液中却很快地完全失去活性。低温能降低或抑制酶的活性,但不能使酶失活。,二、器材: 试管及试管架 恒温水浴 冰浴 沸水浴,三、试剂和材料: 含0.2。

16、第8讲 酶的本质、特性及相关实验探究,最新考纲 1.酶在代谢中的作用()。2.实验:探究影响酶活性的因素。,考点一 酶的本质和作用,1.酶的本质及作用,蛋白质,RNA,核糖体,活细胞,催化,活化能,助学巧记,巧记酶概念的“二、一、一、一”,2.酶的作用原理,如图曲线表示在无酶催化条件和有酶催化条件下某化学反应的能量变化过程。,(1)无酶催化的反应曲线是 。 (2)有酶催化的反应曲线是 。 (3)ca段的含义是在无催化剂的条件下,反应所需要的活化能。 (4)ba段的含义是酶 。 (5)若将酶催化改为无机催化剂催化该反应,则b点在纵轴上将移动。,降低的活化。

17、比较过氧化氢在不同条件下的分解速率,2ml,2ml,2ml,2ml,3%,3%,3%,3%,常温,90,2滴 FeCl3,2滴肝脏研磨液,不明显,少量,较多,大量,不复燃,不复燃,变亮,复燃,过氧化氢在不同条件下的分解速率不一样,在酶的催化下速率最快。,反应条件,对照组,实验组,【例1】为了探究口腔的分泌液中是否有蛋白酶,某学生设计了两组实验,如图所示。在37 水浴中保温一段时间后,1、2中加入适量双缩 脲试剂,3、4不加任何试剂,下列实验能达到 目的的是,A实验 B实验 C实验、实验都能 D实验、实验都不能,(1)1号和2号试管对比得出的结论是 (2)2号和3号试管对比得出。

18、试管 1 2 3 4H2O22mL H2O22mL H2O22mL H2O22mLFeCL34 滴 肝液 4 滴室温 90 室温 室温步骤观察气泡/带火星的木条现象产生少量气泡或无气泡,竹条不复燃产生气泡,竹条不复燃产生较多气泡,竹条轻微燃烧有大量气泡产生,竹条燃烧酶的催化效率1 与 2 对照,说明加热能催化过氧化氢的分解,提高反应速率。1 与 3、4 对照,说明 Fe3+和新鲜肝脏中的过氧化氢酶都能加快过氧化氢的分解速率。3 与 4 对照,说明过氧化氢酶比 Fe3+的催化效率高的多。资料:过氧化氢在常温下会缓慢地放出氧气 。5 5 6 6 7 7淀粉液2mL淀粉酶2mL淀粉液2mL淀粉酶2mL淀粉。

19、酶与酶相关实验专题,活细胞,催化作用,蛋白质,RNA,活化能,活化能,高效性,专一性,比较温和,过酸、过碱或温度过高,胞内酶、胞外酶,胃蛋白酶、胰蛋白酶、唾液淀粉酶、胰脂肪酶等,水解酶、 氧化酶、 转录酶、逆转录酶、合成酶等,酶的合成过程蛋白质类RNA类,遵循中心法则 包括转录和翻译,原料是氨基酸,只有转录,原料是核糖核苷酸,分泌过程胞外酶合成后要分泌到细胞外发挥作用,也就是蛋白质的分泌过程,它的合成、加工和分泌需要核糖体、内质网、高尔基体、线粒体等。,请同学们找到学海导航P6中每个实验的自变量、因变量和实验衡量标准相关规。

20、比较过氧化氢在不同条件下的分解速率,2ml,2ml,2ml,2ml,3%,3%,3%,3%,常温,90,2滴 FeCl3,2滴肝脏研磨液,不明显,少量,较多,大量,不复燃,不复燃,变亮,复燃,过氧化氢在不同条件下的分解速率不一样,在酶的催化下速率最快。,反应条件,对照组,实验组,【例1】为了探究口腔的分泌液中是否有蛋白酶,某学生设计了两组实验,如图所示。在37 水浴中保温一段时间后,1、2中加入适量双缩 脲试剂,3、4不加任何试剂,下列实验能达到 目的的是,A实验 B实验 C实验、实验都能 D实验、实验都不能,(1)1号和2号试管对比得出的结论是 (2) 2号和3号试管对比得出。

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