基因工程操作步骤

1、关于基因工程专利的申请步骤1、就即将申请的基因专利主题进行自我检索，不必花钱去检索（如利用国家知识产权局网站：www.sipo.gov.cn 和外国专利局网站可由 www.sipo.gov.cn 链接)进行检索，或者利用基因 BANK 数据库进行比对（如果分离了新的基因可以在基因 BANK 进行检索，但是千万不要将打算申报专利的基因到该数据库登录，切记在向国内外专利局递交专利申请以前，基因 BANK 的收录就意味丧失了申请专利的新颖性，这是非常不利的，几乎等于自杀）。尽管目前我国国家知识产权局数据库检索不是很全面，但是检索过后可以作到心中有数。2、。

2、运载体质粒 DNA双链环状 DNA 分子，少量为线状-复制子：含 DNA 复制起始位点的一段DNA选择性标志：显性的，通常编码对某抗生素有抗性的基因克隆位点：内切酶切割位点质粒的选择：基本特征载体大小，载体的拷贝数，多接头及选择和筛选插入片段的能力保存；菌液低温保存。制取：碱裂解法是最常用的质粒 DNA 制备方法。纯化：可用离子交换层析和分子筛质粒导入细菌细胞：CaCl2 和相对高效的电转换方法。R 噬菌体：优点，体外 DNA 能插入载体并且包装到噬菌体里，包装效率 10%,但在大肠杆菌上形成菌斑效率就是 100%,质粒转化入细胞内千分之一。

3、基因工程技术操作1. 为什么要学习基因工程技术操作？1）只有在实验室才能真正学会和掌握基因工程的重要概念和相关原理。2）只有在实验室才能真正增长知识和才干。3）只有亲手做过的实验才能记忆犹新。2. 珍惜实验课的体会：1)基因工程实验的开设来之不易。2)实验课上的学习内容将为你今后的科学生涯打下宝贵的基础。3. 实验室常见的仪器设备及用途：1)纯水仪：用途：制纯水注意事项：防止爆炸，防止发水。2)天平：托盘天平（配平实用）电子天平（0.01、0.001、0.0001）3)磁力搅拌器（具有加热功能） 4）酸度计用途：配置药品 调 PH 值注意。

4、基因工程原理,田 宝 玉 福 建 师 范 大 学,课程设计,课程分为： 一、基因工程的概念以及发展（材料阅读和讨论） 二、基因工程的基本内容与步骤 （讲课） 三、常用的微生物表达系统 （讲课） 四、基因工程的成果与发展前景 （自学）综述：基因工程技术在酶中的应用研究进展 五、基因工程试验设计 （考试考查）,参考书目： 1 基因工程原理与技术（上、下） 2 Gene（第八版） 3 分子克隆实验指南 （第二版） 4 途径工程-第三代基因工程 （张惠展） 5 基因工程概论（张惠展） 参考阅读：秘境追踪：方舟子破解世界之谜,基因工程的概念以及发展,。

5、知识回顾：杂交育种 1、原理2、过程3、优点4、不足,基因重组具有不同优良性状的亲本杂交获得F1， F1自交获得F2，鉴别、选择需要的类型。可以把多个优良性状集于一个个体上只能利用已有的基因重组，不能产生新 的基因；进程缓慢、过程繁琐、育种时 间长；不能克服远缘杂交不亲和的生殖 障碍。,水母,一、基因工程的原理,基因拼接技术或DNA重组技术,生物体外,基因,DNA分子水平,剪切,拼接,导入,表达,定向地改造生物的遗传性状,基因重组,可按照人们意愿定向改变生物性状，培育新品种；克服远缘杂交不亲和的生殖障碍。,二、基因工程操作的工具,1。

6、1、编码区：能转录相应的信使RNA，能编码蛋白质的序列。,2、非编码区 ：调控遗传信息表达的核苷酸序列(启动子、终止子），不编码蛋白质。,基因的结构（补充知识）,与RNA聚合酶结合位点,终止子,RNA聚合酶能够识别调控序列中的结合位点，并与其结合。,转录开始后，RNA聚合酶沿DNA分子移动，并以DNA分子的一条链为模板合成RNA。,转录完毕后，RNA链释放出来，紧接着RNA聚合酶也从DNA模板链上脱落下来。,一、原核细胞的基因结构,二、真核细胞的基因结构,编码区,内含子,外显子,启动子,终止子,基因的结构（补充知识）,与RNA聚合酶结合位点,1、编。

7、基因工程的步骤好有真原核基因区别,基因工程的基本步骤,人类基因组计划,基因工程名词解释,2020基因工程长生不老,基因工程属于什么专业,基因工程的四个步骤,基因工程取得的成果,基因工程的优点,基因工程是什么。

8、1.2 基因工程的基本操作程序,1.明确如何从基因文库中获取目的基因及理解PCR扩增目的基因的方法。 2.理解基因表达载体的构建是基因工程的核心。 3.掌握将目的基因导入受体细胞的方法。 4.促进目的基因的检测与鉴定。,课前自主学案,一、目的基因的获取 1.目的基因：指编码蛋白质的 _。 2.获取目的基因的方法 （1）从基因文库中获取目的基因 基因文库的含义：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入 _的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。 基因文库的种类 基因组文库：含有一种生物的所有基因 部分基因文。

9、,EcoR,黏性末端,黏性末端,Go back,Sma,平末端 平末端,可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，,Ecoli DNA连接酶 或T4DNA连接酶,即恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键,T4 DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来，但效率较低,T4DNA连接酶,1.2基因工程的基本操作程序,提问:基因工程的基本操作程序主要包括哪几个步骤？,提取目的基因， 目的基因与运载体结合， 将目的基因导入受体细胞， 目的基因的表达和检测,一、目的基因的获取,1、目的基因：主要指的是 的结构基因，也可以是一些具有 的因子. 2、获取方法： （1）、从基因。

10、基因工程操作 Gene Engineering Operation 1实验课程课号：09610011z 适用专业：生工、生技、生科(本硕博)、生科(四) 理论课总学时：48学时 实验总学时（周学时）： 72（72）学时 学分： 2学分 开出实验个数： 12 （验证实验：0个；综合实验：8个；综合设计实验：3个；创新性实验 1个） 应开实验学期： 第六学期 2实验课程简介 基因工程操作是高等农业院校。

11、课题导入：,请从基因工程的概念思考获得“蓝色妖姬” 的基本操作程序,1.2基因工程的基本操作程序,目标引领：,1、能说出基因工程基本操作程序的四个步骤 2、能准确描述获取目的基因的方法 3、能说出基因表达载体的具体元件,独立自学：阅读教材P8-10思考：,1、基因工程的基本操作程序包括那四个步骤,2、何为目的基因，获取目的基因的方法有那几种？,3、何为基因文库，有几种类型，如何构建？它们之 间有何区别？,4、PCR技术的具体过程包括几步，需要哪些条件？,6、基因表达载体构建的目的是什么？应包括那些具体元件？,5、人工合成目的基因。

12、1.2 基因工程的基本操作程序,1、目的基因的获取,2、基因表达载体的构建,3、将目的基因导入受体细胞,4、目的基因的检测与鉴定,基因工程基本操作的四个步骤,一、目的基因的获取,获取目的基因的常用方法有哪些?,1、从基因文库中获取,2、利用PCR技术扩增,3、人工合成,在这三种方法中，哪些方法是要求知道基因的核苷酸序列的？,要求知道基因的核苷酸序列,1、从基因文库中获取目的基因,（1）.基因文库,将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。,种类,基因组文库：含有。

13、1.2 基因工程的基本操作程序,基因工程基本操作的四个步骤,1、目的基因的获取,2、基因表达载体的构建,3、将目的基因导入受体细胞,4、目的基因的检测与鉴定,一、目的基因的获取,1、目的基因主要是指_,编码蛋白质的结构基因,也有一些具有调控作用的因子,2、获取目的基因的方法,（1）从基因文库中获取,（2）利用PCR技术扩增,（3）人工合成,_,(一)从基因文库中获取目的基因,1.基因文库,将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。,2.基因文库的分类:,种类,基因组文库：。

14、高二年级生物作业 内容：基因工程的基本操作程序 不能决定生命的长度，但你可以扩展它的宽度；不能改变天生的容貌，但你可以 时时展现笑容；高二生物作业第 1 页(共 4 页) 高二生物作业第 2 页(共 4 页)一单选题：（每题 4 分，共 60 分，每小题只有一个选项最符合题意。 ）1下列有关基因工程的叙述，正确的是：（ ）ADNA 连接酶的作用是将两个黏性末端的碱基连接起来B目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变C目的基因与运载体结合的过程发生在细胞外D常使用的运载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等2基因工程的基本操作程序中。

15、1山东省昌乐一中 2011-2012 高二生物学案 必修三 编号 05 2012.1.4班级 姓名 1 2 基因工程的基本操作程序编制：王福玲 徐军胜 审核：王福玲 审批：【学习目标】：简述基因工程原理及基本操作程序。【重点难点】：1. 基因工程基本操作程序的四个步骤。2.从基因文库中获取目的基因。3.利用 PCR 技术扩增目的基因。【自主学习】基因工程的基本操作程序主要包括 4 个步骤： 的获取、基因表达 的构建、将 细胞、 的检测与鉴定。一、目的基因的获取1、概念：目的基因主要是指编码蛋白质的 。也可以是一些具有调控作用的因子。2、来源：（1）可以。

16、基因工程的基本操作程序,1、基因工程包括哪些步骤？,3、基因工程中的核心环节是哪一步？,4、基因表达载体导入到受体细胞有哪些方法？,5、目的基因导入受体细胞就会成功表达吗？ 如何检测和鉴定？,2、什么是目的基因？获取的方法有哪些方法？,思考讨论问题：,基因工程的基本操作程序,一、目的基因的获取,二、基因表达载体的构建,三、将目的基因导入受体细胞,四、目的基因的检测与鉴定,主要是指编码蛋白质的基因,(一）目的基因,目前被广泛提取使用的目的基因有：苏云金杆菌抗虫基因、植物抗病基因（抗病毒、抗细菌)、人胰岛素基因等。,一、。

17、基因工程的基本操作程序,基因工程的基本操作程序,1.目的基因的获取 2.基因表达载体的构建 3.将目的基因导入受体细胞 4.目的基因的检测与鉴定,知识点一：1.原核细胞的基因结构,非编码区,非编码区,编码区,编码区上游,编码区下游,与RNA聚合酶结合位点,启动子,终止子,启动子：位于基因首端一段能与RNA聚合酶结合并能起始mRNA合成的序列。没有启动子，基因就不能转录。 终止子：位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断，它能阻碍RNA聚合酶的移动，并使其从DNA模板链上脱离下来，使转录终止。,RNA聚合酶:能够识别启动子上的结合位点并与其结合的一种。

18、,1.2 基因工程的基本操作程序,知识回顾：,基因工程基本操作的四个步骤,1、目的基因的获取,2、基因表达载体的构建,3、目的基因导入受体细胞,4、目的基因的检测与鉴定,有了目的基因，我们才能赋予一种生物以另一种生物的遗传特性。,使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可进行遗传、表达和发挥作用,载体进入受体细胞稳定表达，才能实现一种生物的基因在另一种生物中的转化。,才能确定目的基因是否真正在受体细胞中稳定遗传和正确表达。,一、目的基因的获取,原核细胞的基因结构,非编码区,非编码区,编码区,编码区上游,编码区下游,与RNA聚合酶结。