1、急诊与危重病学专业优秀论文 血管紧张素血管紧张素1 型受体途径在介导急性肺损伤大鼠肺部炎症反应中的作用研究关键词：血管紧张素 血管紧张素1 型受体 肺部炎症 急性肺损伤 脂多糖 细胞凋亡摘要：第一部分，目的：探讨血管紧张素(Ang )介导大鼠肺部炎症反应激活的作用及其受体途径。 方法：清洁级 SD 大鼠 24 只，随机分为 4 组：对照组：持续皮下注射与 Ang等体积的生理盐水 72 h；Ang组：皮下注射Ang1gkglt;#39;-1gt;minlt;#39;-1gt;持续 72 h；Ang+氯沙坦组：Ang 注射前 24 h 及 Ang 持续皮下注射的 72 h 过程中，予氯沙坦 10
2、mg.kglt;#39;-1gt;dlt;#39;-1gt;灌胃；氯沙坦组：氯沙坦10mg.kglt;#39;-1gt;dlt;#39;-1gt;灌胃4 d。光镜观察肺组织病理改变并测定肺组织肺湿/干重比(W/D)。凝胶迁移率改变电泳法(EMSA)测定肺组织核因子-B(NF-B)活性，逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织肿瘤坏死因子-(TNF-)、Ang 1 型受体(ATR1)mRNA表达水平，酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆中血管性血友病因子(vWF)的含量反映内皮细胞损伤，比色法测定髓过氧化物酶(MPO)和丙二醛(MDA)含量，TUNEL分析肺组织细胞凋亡情况，Western
3、 Blot 方法检测肺组织 ATR1 蛋白表达水平。结果：Ang组大鼠肺 W/D 为(4.800.23)，明显高于对照组(4.260.34)、Ang +氯沙坦组(4.130.48)和氯沙坦组(3.800.48)(Plt;0.05)。Ang +氯沙坦组肺 W/D 明显低于 Ang组，但与对照组和氯沙坦组相比无显著差异(Pgt;0.05)。Ang可导致肺泡间隔增宽、出血及大量炎性细胞浸润等急性肺损伤病理改变，预先应用氯沙坦阻断 Ang1 型受体 ATR1 可缓解由 Ang所致的肺组织病理损伤。Ang组肺组织 NF-B 活性、TNF- mRNA 表达、MPO、MDA 及 vWF 含量均明显高于对照组
4、(Plt;0.05)，Ang +氯沙坦组肺组织 NF-B 活性、TNF-mRNA 表达、MPO、MDA 及 vWF 含量较 Ang组明显下降，但与对照组和氯沙坦组相比无显著差异(Pgt;0.05)。Ang 组支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞 TUNEL 阳性细胞数较对照组明显增加，Ang+氯沙坦组阳性细胞数较 Ang组明显下降，但仍显著高于对照组及氯沙坦组水平(Plt;0.05)。Ang组 ATR1mRNA 表达水平明显高与对照组、Ang+氯沙坦组及氯沙坦组，但对照组、Ang组、Ang+氯沙坦组和氯沙坦组 ATR1 蛋白表达水平无显著差异(Pgt;0.05)。 结论：Ang可激活肺部炎症反应和细胞
5、凋亡并导致急性肺损伤，Ang在肺部的促炎作用主要是通过其 1 型受体介导的。 第二部分，目的：探讨血管紧张素(Ang )通过血管紧张素1 型受体(ATR1)途径在介导脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤大鼠肺部炎症反应中的作用。 方法：清洁级 SD 大鼠 18 只，随机分为：对照组：静脉注射与 LPS 等量的生理盐水；ALI 组：静脉注射 LPS 10 mg/kg 复制 ALI 模型；ALI+氯沙坦组：静脉注射 LPS 10 mg/kg 前 30 min，予以静脉注射 losartan 20 ug/kg并以 20 ugkglt;#39;-1gt;minlt;#39;-1gt;持续静脉泵入。实验过程
6、中股动脉置管每小时监测平均动脉压(MAP)，LPS 注射 6h 后处死动物。另 18 只 SD 大鼠进行 LPSR 寸血浆及肺组织 Ang 浓度影响实验。大鼠随机分为：LPS 3 h 组、LPS 9 h 组和 LPS 12 h 组，分别在LPS 注射 3、9 和 12 h 后处死。光镜观察肺组织病理改变并测定肺组织肺湿/干重比(W/D)。放射免疫分析法测定血浆及肺组织 Ang 浓度。凝胶迁移率改变电泳法(EMSA)测定肺组织核因子-B(NF-B)活性，逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织肿瘤坏死因子-(TNF-)及 ATR1 mRNA 表达水平，酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆中
7、血管性血友病因子(vWF)的含量反映内皮细胞损伤，比色法测定髓过氧化物酶(MPO)和丙二醛(MDA)含量，TUNEL 分析肺组织细胞凋亡情况，Western Blot 方法检测肺组织 ATR1 蛋白表达水平。 结果：对照组大鼠实验过程中 MAP 维持稳定，ALI 组及 ALI+氯沙坦组大鼠 LPS 注射后 MAP 均明显下降，但相同时间点 ALI 和 ALI+氯沙坦组 MAP 无明显差异。ALI 组肺组织W/D 为(5.020.0.18)，明显高于对照组(3.390.32)。应用氯沙坦组预先阻断 ATR1(ALI+氯沙坦组)可使肺组织 W/D(4.680.60)较 ALI 组明显下降，但仍显著
8、高于对照组水平(Plt;0.05)。LPS 诱导 ALI 肺组织病理检查见肺泡萎陷，肺泡间隔增宽，肺泡间质内大量出血及炎细胞渗出，肺泡间质血管充血，应用氯沙坦预先阻断 ATR1 受体可使 ALI 大鼠肺组织病理损伤明显减轻。LPS 注射后，大鼠血浆及肺组织 Ang 浓度均逐渐升高，9h 时达峰值。ALI 组肺组织NF-B 活性、TNF-mRNA 表达、MPO、MDA、vWF 含量及凋亡指数均明显高于对照组，应用氯沙坦组预先阻断 ATR1 受体可使 ALI 大鼠肺组织上述指标明显下降，但 NF-B 活性、MPO 含量及凋亡指数仍明显高于对照组(Plt;0.05)。ALI组 TUNEL 染色见支气
9、管上皮细胞、肺泡上皮细胞 TUNEL 阳性细胞较对照组数明显增加，ALI+氯沙坦组阳性细胞数较 ALI 组明显下降，但仍显著高于对照组水平。LPS 刺激可导致大鼠肺 ATR1 mRNA 及蛋白表达水平明显升高，预先用氯沙坦阻断 ATR1 受体可使 ATR1 mRNA 表达明显下降(Plt;0.05)，但对 ATR1 蛋白表达影响不明显(Pgt;0.05)。 结论：LPS 诱导 ALI 时，升高的 Ang可通过 ATR1 途径加重肺部炎症反应，损伤血管内皮细胞并促进肺组织细胞调亡，阻断 ATR1 可缓解 Ang 的上述作用并减轻肺损伤。正文内容第一部分，目的：探讨血管紧张素(Ang )介导大鼠肺
10、部炎症反应激活的作用及其受体途径。 方法：清洁级 SD 大鼠 24 只，随机分为 4 组：对照组：持续皮下注射与 Ang等体积的生理盐水 72 h；Ang组：皮下注射Ang1gkglt;#39;-1gt;minlt;#39;-1gt;持续 72 h；Ang+氯沙坦组：Ang 注射前 24 h 及 Ang 持续皮下注射的 72 h 过程中，予氯沙坦 10 mg.kglt;#39;-1gt;dlt;#39;-1gt;灌胃；氯沙坦组：氯沙坦10mg.kglt;#39;-1gt;dlt;#39;-1gt;灌胃4 d。光镜观察肺组织病理改变并测定肺组织肺湿/干重比(W/D)。凝胶迁移率改变电泳法(EMS
11、A)测定肺组织核因子-B(NF-B)活性，逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织肿瘤坏死因子-(TNF-)、Ang 1 型受体(ATR1)mRNA表达水平，酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆中血管性血友病因子(vWF)的含量反映内皮细胞损伤，比色法测定髓过氧化物酶(MPO)和丙二醛(MDA)含量，TUNEL分析肺组织细胞凋亡情况，Western Blot 方法检测肺组织 ATR1 蛋白表达水平。结果：Ang组大鼠肺 W/D 为(4.800.23)，明显高于对照组(4.260.34)、Ang +氯沙坦组(4.130.48)和氯沙坦组(3.800.48)(Plt;0.05)。Ang +氯
12、沙坦组肺 W/D 明显低于 Ang组，但与对照组和氯沙坦组相比无显著差异(Pgt;0.05)。Ang可导致肺泡间隔增宽、出血及大量炎性细胞浸润等急性肺损伤病理改变，预先应用氯沙坦阻断 Ang1 型受体 ATR1 可缓解由 Ang所致的肺组织病理损伤。Ang组肺组织 NF-B 活性、TNF- mRNA 表达、MPO、MDA 及 vWF 含量均明显高于对照组(Plt;0.05)，Ang +氯沙坦组肺组织 NF-B 活性、TNF-mRNA 表达、MPO、MDA 及 vWF 含量较 Ang组明显下降，但与对照组和氯沙坦组相比无显著差异(Pgt;0.05)。Ang 组支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞 TUN
13、EL 阳性细胞数较对照组明显增加，Ang+氯沙坦组阳性细胞数较 Ang组明显下降，但仍显著高于对照组及氯沙坦组水平(Plt;0.05)。Ang组 ATR1mRNA 表达水平明显高与对照组、Ang+氯沙坦组及氯沙坦组，但对照组、Ang组、Ang+氯沙坦组和氯沙坦组 ATR1 蛋白表达水平无显著差异(Pgt;0.05)。 结论：Ang可激活肺部炎症反应和细胞凋亡并导致急性肺损伤，Ang在肺部的促炎作用主要是通过其 1 型受体介导的。 第二部分，目的：探讨血管紧张素(Ang )通过血管紧张素1 型受体(ATR1)途径在介导脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤大鼠肺部炎症反应中的作用。 方法：清洁级 SD
14、 大鼠 18 只，随机分为：对照组：静脉注射与 LPS 等量的生理盐水；ALI 组：静脉注射 LPS 10 mg/kg 复制 ALI 模型；ALI+氯沙坦组：静脉注射 LPS 10 mg/kg 前 30 min，予以静脉注射 losartan 20 ug/kg并以 20 ugkglt;#39;-1gt;minlt;#39;-1gt;持续静脉泵入。实验过程中股动脉置管每小时监测平均动脉压(MAP)，LPS 注射 6h 后处死动物。另 18 只 SD 大鼠进行 LPSR 寸血浆及肺组织 Ang 浓度影响实验。大鼠随机分为：LPS 3 h 组、LPS 9 h 组和 LPS 12 h 组，分别在LPS
15、 注射 3、9 和 12 h 后处死。光镜观察肺组织病理改变并测定肺组织肺湿/干重比(W/D)。放射免疫分析法测定血浆及肺组织 Ang 浓度。凝胶迁移率改变电泳法(EMSA)测定肺组织核因子-B(NF-B)活性，逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织肿瘤坏死因子-(TNF-)及 ATR1 mRNA 表达水平，酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆中血管性血友病因子(vWF)的含量反映内皮细胞损伤，比色法测定髓过氧化物酶(MPO)和丙二醛(MDA)含量，TUNEL 分析肺组织细胞凋亡情况，Western Blot 方法检测肺组织 ATR1 蛋白表达水平。 结果：对照组大鼠实验过程中 MAP
16、 维持稳定，ALI 组及 ALI+氯沙坦组大鼠 LPS 注射后 MAP 均明显下降，但相同时间点 ALI 和 ALI+氯沙坦组 MAP 无明显差异。ALI 组肺组织W/D 为(5.020.0.18)，明显高于对照组(3.390.32)。应用氯沙坦组预先阻断 ATR1(ALI+氯沙坦组)可使肺组织 W/D(4.680.60)较 ALI 组明显下降，但仍显著高于对照组水平(Plt;0.05)。LPS 诱导 ALI 肺组织病理检查见肺泡萎陷，肺泡间隔增宽，肺泡间质内大量出血及炎细胞渗出，肺泡间质血管充血，应用氯沙坦预先阻断 ATR1 受体可使 ALI 大鼠肺组织病理损伤明显减轻。LPS 注射后，大鼠
17、血浆及肺组织 Ang 浓度均逐渐升高，9h 时达峰值。ALI 组肺组织NF-B 活性、TNF-mRNA 表达、MPO、MDA、vWF 含量及凋亡指数均明显高于对照组，应用氯沙坦组预先阻断 ATR1 受体可使 ALI 大鼠肺组织上述指标明显下降，但 NF-B 活性、MPO 含量及凋亡指数仍明显高于对照组(Plt;0.05)。ALI组 TUNEL 染色见支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞 TUNEL 阳性细胞较对照组数明显增加，ALI+氯沙坦组阳性细胞数较 ALI 组明显下降，但仍显著高于对照组水平。LPS 刺激可导致大鼠肺 ATR1 mRNA 及蛋白表达水平明显升高，预先用氯沙坦阻断 ATR1 受体可
18、使 ATR1 mRNA 表达明显下降(Plt;0.05)，但对 ATR1 蛋白表达影响不明显(Pgt;0.05)。 结论：LPS 诱导 ALI 时，升高的 Ang可通过 ATR1 途径加重肺部炎症反应，损伤血管内皮细胞并促进肺组织细胞调亡，阻断 ATR1 可缓解 Ang 的上述作用并减轻肺损伤。第一部分，目的：探讨血管紧张素(Ang )介导大鼠肺部炎症反应激活的作用及其受体途径。 方法：清洁级 SD 大鼠 24 只，随机分为 4 组：对照组：持续皮下注射与 Ang等体积的生理盐水 72 h；Ang组：皮下注射Ang1gkglt;#39;-1gt;minlt;#39;-1gt;持续 72 h；A
19、ng+氯沙坦组：Ang 注射前 24 h 及 Ang 持续皮下注射的 72 h 过程中，予氯沙坦 10 mg.kglt;#39;-1gt;dlt;#39;-1gt;灌胃；氯沙坦组：氯沙坦10mg.kglt;#39;-1gt;dlt;#39;-1gt;灌胃4 d。光镜观察肺组织病理改变并测定肺组织肺湿/干重比(W/D)。凝胶迁移率改变电泳法(EMSA)测定肺组织核因子-B(NF-B)活性，逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织肿瘤坏死因子-(TNF-)、Ang 1 型受体(ATR1)mRNA表达水平，酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆中血管性血友病因子(vWF)的含量反映内皮细胞损伤，
20、比色法测定髓过氧化物酶(MPO)和丙二醛(MDA)含量，TUNEL分析肺组织细胞凋亡情况，Western Blot 方法检测肺组织 ATR1 蛋白表达水平。结果：Ang组大鼠肺 W/D 为(4.800.23)，明显高于对照组(4.260.34)、Ang +氯沙坦组(4.130.48)和氯沙坦组(3.800.48)(Plt;0.05)。Ang +氯沙坦组肺 W/D 明显低于 Ang组，但与对照组和氯沙坦组相比无显著差异(Pgt;0.05)。Ang可导致肺泡间隔增宽、出血及大量炎性细胞浸润等急性肺损伤病理改变，预先应用氯沙坦阻断 Ang1 型受体 ATR1 可缓解由 Ang所致的肺组织病理损伤。A
21、ng组肺组织 NF-B 活性、TNF- mRNA 表达、MPO、MDA 及 vWF 含量均明显高于对照组(Plt;0.05)，Ang +氯沙坦组肺组织 NF-B 活性、TNF-mRNA 表达、MPO、MDA 及 vWF 含量较 Ang组明显下降，但与对照组和氯沙坦组相比无显著差异(Pgt;0.05)。Ang 组支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞 TUNEL 阳性细胞数较对照组明显增加，Ang+氯沙坦组阳性细胞数较 Ang组明显下降，但仍显著高于对照组及氯沙坦组水平(Plt;0.05)。Ang组 ATR1mRNA 表达水平明显高与对照组、Ang+氯沙坦组及氯沙坦组，但对照组、Ang组、Ang+氯沙坦组
22、和氯沙坦组 ATR1 蛋白表达水平无显著差异(Pgt;0.05)。 结论：Ang可激活肺部炎症反应和细胞凋亡并导致急性肺损伤，Ang在肺部的促炎作用主要是通过其 1 型受体介导的。 第二部分，目的：探讨血管紧张素(Ang )通过血管紧张素1 型受体(ATR1)途径在介导脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤大鼠肺部炎症反应中的作用。 方法：清洁级 SD 大鼠 18 只，随机分为：对照组：静脉注射与 LPS 等量的生理盐水；ALI 组：静脉注射 LPS 10 mg/kg 复制 ALI 模型；ALI+氯沙坦组：静脉注射 LPS 10 mg/kg 前 30 min，予以静脉注射 losartan 20 u
23、g/kg并以 20 ugkglt;#39;-1gt;minlt;#39;-1gt;持续静脉泵入。实验过程中股动脉置管每小时监测平均动脉压(MAP)，LPS 注射 6h 后处死动物。另 18 只 SD 大鼠进行 LPSR 寸血浆及肺组织 Ang 浓度影响实验。大鼠随机分为：LPS 3 h 组、LPS 9 h 组和 LPS 12 h 组，分别在LPS 注射 3、9 和 12 h 后处死。光镜观察肺组织病理改变并测定肺组织肺湿/干重比(W/D)。放射免疫分析法测定血浆及肺组织 Ang 浓度。凝胶迁移率改变电泳法(EMSA)测定肺组织核因子-B(NF-B)活性，逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测
24、肺组织肿瘤坏死因子-(TNF-)及 ATR1 mRNA 表达水平，酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆中血管性血友病因子(vWF)的含量反映内皮细胞损伤，比色法测定髓过氧化物酶(MPO)和丙二醛(MDA)含量，TUNEL 分析肺组织细胞凋亡情况，Western Blot 方法检测肺组织 ATR1 蛋白表达水平。 结果：对照组大鼠实验过程中 MAP 维持稳定，ALI 组及 ALI+氯沙坦组大鼠 LPS 注射后 MAP 均明显下降，但相同时间点 ALI 和 ALI+氯沙坦组 MAP 无明显差异。ALI 组肺组织W/D 为(5.020.0.18)，明显高于对照组(3.390.32)。应用氯沙坦组预先
25、阻断 ATR1(ALI+氯沙坦组)可使肺组织 W/D(4.680.60)较 ALI 组明显下降，但仍显著高于对照组水平(Plt;0.05)。LPS 诱导 ALI 肺组织病理检查见肺泡萎陷，肺泡间隔增宽，肺泡间质内大量出血及炎细胞渗出，肺泡间质血管充血，应用氯沙坦预先阻断 ATR1 受体可使 ALI 大鼠肺组织病理损伤明显减轻。LPS 注射后，大鼠血浆及肺组织 Ang 浓度均逐渐升高，9h 时达峰值。ALI 组肺组织NF-B 活性、TNF-mRNA 表达、MPO、MDA、vWF 含量及凋亡指数均明显高于对照组，应用氯沙坦组预先阻断 ATR1 受体可使 ALI 大鼠肺组织上述指标明显下降，但 NF
26、-B 活性、MPO 含量及凋亡指数仍明显高于对照组(Plt;0.05)。ALI组 TUNEL 染色见支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞 TUNEL 阳性细胞较对照组数明显增加，ALI+氯沙坦组阳性细胞数较 ALI 组明显下降，但仍显著高于对照组水平。LPS 刺激可导致大鼠肺 ATR1 mRNA 及蛋白表达水平明显升高，预先用氯沙坦阻断 ATR1 受体可使 ATR1 mRNA 表达明显下降(Plt;0.05)，但对 ATR1 蛋白表达影响不明显(Pgt;0.05)。 结论：LPS 诱导 ALI 时，升高的 Ang可通过 ATR1 途径加重肺部炎症反应，损伤血管内皮细胞并促进肺组织细胞调亡，阻断 ATR
27、1 可缓解 Ang 的上述作用并减轻肺损伤。第一部分，目的：探讨血管紧张素(Ang )介导大鼠肺部炎症反应激活的作用及其受体途径。 方法：清洁级 SD 大鼠 24 只，随机分为 4 组：对照组：持续皮下注射与 Ang等体积的生理盐水 72 h；Ang组：皮下注射Ang1gkglt;#39;-1gt;minlt;#39;-1gt;持续 72 h；Ang+氯沙坦组：Ang 注射前 24 h 及 Ang 持续皮下注射的 72 h 过程中，予氯沙坦 10 mg.kglt;#39;-1gt;dlt;#39;-1gt;灌胃；氯沙坦组：氯沙坦10mg.kglt;#39;-1gt;dlt;#39;-1gt;灌
28、胃4 d。光镜观察肺组织病理改变并测定肺组织肺湿/干重比(W/D)。凝胶迁移率改变电泳法(EMSA)测定肺组织核因子-B(NF-B)活性，逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织肿瘤坏死因子-(TNF-)、Ang 1 型受体(ATR1)mRNA表达水平，酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆中血管性血友病因子(vWF)的含量反映内皮细胞损伤，比色法测定髓过氧化物酶(MPO)和丙二醛(MDA)含量，TUNEL分析肺组织细胞凋亡情况，Western Blot 方法检测肺组织 ATR1 蛋白表达水平。结果：Ang组大鼠肺 W/D 为(4.800.23)，明显高于对照组(4.260.34)、Ang
29、 +氯沙坦组(4.130.48)和氯沙坦组(3.800.48)(Plt;0.05)。Ang +氯沙坦组肺 W/D 明显低于 Ang组，但与对照组和氯沙坦组相比无显著差异(Pgt;0.05)。Ang可导致肺泡间隔增宽、出血及大量炎性细胞浸润等急性肺损伤病理改变，预先应用氯沙坦阻断 Ang1 型受体 ATR1 可缓解由 Ang所致的肺组织病理损伤。Ang组肺组织 NF-B 活性、TNF- mRNA 表达、MPO、MDA 及 vWF 含量均明显高于对照组(Plt;0.05)，Ang +氯沙坦组肺组织 NF-B 活性、TNF-mRNA 表达、MPO、MDA 及 vWF 含量较 Ang组明显下降，但与对
30、照组和氯沙坦组相比无显著差异(Pgt;0.05)。Ang 组支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞 TUNEL 阳性细胞数较对照组明显增加，Ang+氯沙坦组阳性细胞数较 Ang组明显下降，但仍显著高于对照组及氯沙坦组水平(Plt;0.05)。Ang组 ATR1mRNA 表达水平明显高与对照组、Ang+氯沙坦组及氯沙坦组，但对照组、Ang组、Ang+氯沙坦组和氯沙坦组 ATR1 蛋白表达水平无显著差异(Pgt;0.05)。 结论：Ang可激活肺部炎症反应和细胞凋亡并导致急性肺损伤，Ang在肺部的促炎作用主要是通过其 1 型受体介导的。 第二部分，目的：探讨血管紧张素(Ang )通过血管紧张素1 型受体(A
31、TR1)途径在介导脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤大鼠肺部炎症反应中的作用。 方法：清洁级 SD 大鼠 18 只，随机分为：对照组：静脉注射与 LPS 等量的生理盐水；ALI 组：静脉注射 LPS 10 mg/kg 复制 ALI 模型；ALI+氯沙坦组：静脉注射 LPS 10 mg/kg 前 30 min，予以静脉注射 losartan 20 ug/kg并以 20 ugkglt;#39;-1gt;minlt;#39;-1gt;持续静脉泵入。实验过程中股动脉置管每小时监测平均动脉压(MAP)，LPS 注射 6h 后处死动物。另 18 只 SD 大鼠进行 LPSR 寸血浆及肺组织 Ang 浓度影响
32、实验。大鼠随机分为：LPS 3 h 组、LPS 9 h 组和 LPS 12 h 组，分别在LPS 注射 3、9 和 12 h 后处死。光镜观察肺组织病理改变并测定肺组织肺湿/干重比(W/D)。放射免疫分析法测定血浆及肺组织 Ang 浓度。凝胶迁移率改变电泳法(EMSA)测定肺组织核因子-B(NF-B)活性，逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织肿瘤坏死因子-(TNF-)及 ATR1 mRNA 表达水平，酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆中血管性血友病因子(vWF)的含量反映内皮细胞损伤，比色法测定髓过氧化物酶(MPO)和丙二醛(MDA)含量，TUNEL 分析肺组织细胞凋亡情况，Wes
33、tern Blot 方法检测肺组织 ATR1 蛋白表达水平。 结果：对照组大鼠实验过程中 MAP 维持稳定，ALI 组及 ALI+氯沙坦组大鼠 LPS 注射后 MAP 均明显下降，但相同时间点 ALI 和 ALI+氯沙坦组 MAP 无明显差异。ALI 组肺组织W/D 为(5.020.0.18)，明显高于对照组(3.390.32)。应用氯沙坦组预先阻断 ATR1(ALI+氯沙坦组)可使肺组织 W/D(4.680.60)较 ALI 组明显下降，但仍显著高于对照组水平(Plt;0.05)。LPS 诱导 ALI 肺组织病理检查见肺泡萎陷，肺泡间隔增宽，肺泡间质内大量出血及炎细胞渗出，肺泡间质血管充血，
34、应用氯沙坦预先阻断 ATR1 受体可使 ALI 大鼠肺组织病理损伤明显减轻。LPS 注射后，大鼠血浆及肺组织 Ang 浓度均逐渐升高，9h 时达峰值。ALI 组肺组织NF-B 活性、TNF-mRNA 表达、MPO、MDA、vWF 含量及凋亡指数均明显高于对照组，应用氯沙坦组预先阻断 ATR1 受体可使 ALI 大鼠肺组织上述指标明显下降，但 NF-B 活性、MPO 含量及凋亡指数仍明显高于对照组(Plt;0.05)。ALI组 TUNEL 染色见支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞 TUNEL 阳性细胞较对照组数明显增加，ALI+氯沙坦组阳性细胞数较 ALI 组明显下降，但仍显著高于对照组水平。LPS
35、刺激可导致大鼠肺 ATR1 mRNA 及蛋白表达水平明显升高，预先用氯沙坦阻断 ATR1 受体可使 ATR1 mRNA 表达明显下降(Plt;0.05)，但对 ATR1 蛋白表达影响不明显(Pgt;0.05)。 结论：LPS 诱导 ALI 时，升高的 Ang可通过 ATR1 途径加重肺部炎症反应，损伤血管内皮细胞并促进肺组织细胞调亡，阻断 ATR1 可缓解 Ang 的上述作用并减轻肺损伤。第一部分，目的：探讨血管紧张素(Ang )介导大鼠肺部炎症反应激活的作用及其受体途径。 方法：清洁级 SD 大鼠 24 只，随机分为 4 组：对照组：持续皮下注射与 Ang等体积的生理盐水 72 h；Ang组
36、：皮下注射Ang1gkglt;#39;-1gt;minlt;#39;-1gt;持续 72 h；Ang+氯沙坦组：Ang 注射前 24 h 及 Ang 持续皮下注射的 72 h 过程中，予氯沙坦 10 mg.kglt;#39;-1gt;dlt;#39;-1gt;灌胃；氯沙坦组：氯沙坦10mg.kglt;#39;-1gt;dlt;#39;-1gt;灌胃4 d。光镜观察肺组织病理改变并测定肺组织肺湿/干重比(W/D)。凝胶迁移率改变电泳法(EMSA)测定肺组织核因子-B(NF-B)活性，逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织肿瘤坏死因子-(TNF-)、Ang 1 型受体(ATR1)mRNA表
37、达水平，酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆中血管性血友病因子(vWF)的含量反映内皮细胞损伤，比色法测定髓过氧化物酶(MPO)和丙二醛(MDA)含量，TUNEL分析肺组织细胞凋亡情况，Western Blot 方法检测肺组织 ATR1 蛋白表达水平。结果：Ang组大鼠肺 W/D 为(4.800.23)，明显高于对照组(4.260.34)、Ang +氯沙坦组(4.130.48)和氯沙坦组(3.800.48)(Plt;0.05)。Ang +氯沙坦组肺 W/D 明显低于 Ang组，但与对照组和氯沙坦组相比无显著差异(Pgt;0.05)。Ang可导致肺泡间隔增宽、出血及大量炎性细胞浸润等急性肺损伤病
38、理改变，预先应用氯沙坦阻断 Ang1 型受体 ATR1 可缓解由 Ang所致的肺组织病理损伤。Ang组肺组织 NF-B 活性、TNF- mRNA 表达、MPO、MDA 及 vWF 含量均明显高于对照组(Plt;0.05)，Ang +氯沙坦组肺组织 NF-B 活性、TNF-mRNA 表达、MPO、MDA 及 vWF 含量较 Ang组明显下降，但与对照组和氯沙坦组相比无显著差异(Pgt;0.05)。Ang 组支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞 TUNEL 阳性细胞数较对照组明显增加，Ang+氯沙坦组阳性细胞数较 Ang组明显下降，但仍显著高于对照组及氯沙坦组水平(Plt;0.05)。Ang组 ATR1m
39、RNA 表达水平明显高与对照组、Ang+氯沙坦组及氯沙坦组，但对照组、Ang组、Ang+氯沙坦组和氯沙坦组 ATR1 蛋白表达水平无显著差异(Pgt;0.05)。 结论：Ang可激活肺部炎症反应和细胞凋亡并导致急性肺损伤，Ang在肺部的促炎作用主要是通过其 1 型受体介导的。 第二部分，目的：探讨血管紧张素(Ang )通过血管紧张素1 型受体(ATR1)途径在介导脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤大鼠肺部炎症反应中的作用。 方法：清洁级 SD 大鼠 18 只，随机分为：对照组：静脉注射与 LPS 等量的生理盐水；ALI 组：静脉注射 LPS 10 mg/kg 复制 ALI 模型；ALI+氯沙坦组
40、：静脉注射 LPS 10 mg/kg 前 30 min，予以静脉注射 losartan 20 ug/kg并以 20 ugkglt;#39;-1gt;minlt;#39;-1gt;持续静脉泵入。实验过程中股动脉置管每小时监测平均动脉压(MAP)，LPS 注射 6h 后处死动物。另 18 只 SD 大鼠进行 LPSR 寸血浆及肺组织 Ang 浓度影响实验。大鼠随机分为：LPS 3 h 组、LPS 9 h 组和 LPS 12 h 组，分别在LPS 注射 3、9 和 12 h 后处死。光镜观察肺组织病理改变并测定肺组织肺湿/干重比(W/D)。放射免疫分析法测定血浆及肺组织 Ang 浓度。凝胶迁移率改变
41、电泳法(EMSA)测定肺组织核因子-B(NF-B)活性，逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织肿瘤坏死因子-(TNF-)及 ATR1 mRNA 表达水平，酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆中血管性血友病因子(vWF)的含量反映内皮细胞损伤，比色法测定髓过氧化物酶(MPO)和丙二醛(MDA)含量，TUNEL 分析肺组织细胞凋亡情况，Western Blot 方法检测肺组织 ATR1 蛋白表达水平。 结果：对照组大鼠实验过程中 MAP 维持稳定，ALI 组及 ALI+氯沙坦组大鼠 LPS 注射后 MAP 均明显下降，但相同时间点 ALI 和 ALI+氯沙坦组 MAP 无明显差异。ALI
42、组肺组织W/D 为(5.020.0.18)，明显高于对照组(3.390.32)。应用氯沙坦组预先阻断 ATR1(ALI+氯沙坦组)可使肺组织 W/D(4.680.60)较 ALI 组明显下降，但仍显著高于对照组水平(Plt;0.05)。LPS 诱导 ALI 肺组织病理检查见肺泡萎陷，肺泡间隔增宽，肺泡间质内大量出血及炎细胞渗出，肺泡间质血管充血，应用氯沙坦预先阻断 ATR1 受体可使 ALI 大鼠肺组织病理损伤明显减轻。LPS 注射后，大鼠血浆及肺组织 Ang 浓度均逐渐升高，9h 时达峰值。ALI 组肺组织NF-B 活性、TNF-mRNA 表达、MPO、MDA、vWF 含量及凋亡指数均明显高
43、于对照组，应用氯沙坦组预先阻断 ATR1 受体可使 ALI 大鼠肺组织上述指标明显下降，但 NF-B 活性、MPO 含量及凋亡指数仍明显高于对照组(Plt;0.05)。ALI组 TUNEL 染色见支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞 TUNEL 阳性细胞较对照组数明显增加，ALI+氯沙坦组阳性细胞数较 ALI 组明显下降，但仍显著高于对照组水平。LPS 刺激可导致大鼠肺 ATR1 mRNA 及蛋白表达水平明显升高，预先用氯沙坦阻断 ATR1 受体可使 ATR1 mRNA 表达明显下降(Plt;0.05)，但对 ATR1 蛋白表达影响不明显(Pgt;0.05)。 结论：LPS 诱导 ALI 时，升高的
44、Ang可通过 ATR1 途径加重肺部炎症反应，损伤血管内皮细胞并促进肺组织细胞调亡，阻断 ATR1 可缓解 Ang 的上述作用并减轻肺损伤。第一部分，目的：探讨血管紧张素(Ang )介导大鼠肺部炎症反应激活的作用及其受体途径。 方法：清洁级 SD 大鼠 24 只，随机分为 4 组：对照组：持续皮下注射与 Ang等体积的生理盐水 72 h；Ang组：皮下注射Ang1gkglt;#39;-1gt;minlt;#39;-1gt;持续 72 h；Ang+氯沙坦组：Ang 注射前 24 h 及 Ang 持续皮下注射的 72 h 过程中，予氯沙坦 10 mg.kglt;#39;-1gt;dlt;#39;-
45、1gt;灌胃；氯沙坦组：氯沙坦10mg.kglt;#39;-1gt;dlt;#39;-1gt;灌胃4 d。光镜观察肺组织病理改变并测定肺组织肺湿/干重比(W/D)。凝胶迁移率改变电泳法(EMSA)测定肺组织核因子-B(NF-B)活性，逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织肿瘤坏死因子-(TNF-)、Ang 1 型受体(ATR1)mRNA表达水平，酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆中血管性血友病因子(vWF)的含量反映内皮细胞损伤，比色法测定髓过氧化物酶(MPO)和丙二醛(MDA)含量，TUNEL分析肺组织细胞凋亡情况，Western Blot 方法检测肺组织 ATR1 蛋白表达水平。
46、结果：Ang组大鼠肺 W/D 为(4.800.23)，明显高于对照组(4.260.34)、Ang +氯沙坦组(4.130.48)和氯沙坦组(3.800.48)(Plt;0.05)。Ang +氯沙坦组肺 W/D 明显低于 Ang组，但与对照组和氯沙坦组相比无显著差异(Pgt;0.05)。Ang可导致肺泡间隔增宽、出血及大量炎性细胞浸润等急性肺损伤病理改变，预先应用氯沙坦阻断 Ang1 型受体 ATR1 可缓解由 Ang所致的肺组织病理损伤。Ang组肺组织 NF-B 活性、TNF- mRNA 表达、MPO、MDA 及 vWF 含量均明显高于对照组(Plt;0.05)，Ang +氯沙坦组肺组织 NF
47、-B 活性、TNF-mRNA 表达、MPO、MDA 及 vWF 含量较 Ang组明显下降，但与对照组和氯沙坦组相比无显著差异(Pgt;0.05)。Ang 组支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞 TUNEL 阳性细胞数较对照组明显增加，Ang+氯沙坦组阳性细胞数较 Ang组明显下降，但仍显著高于对照组及氯沙坦组水平(Plt;0.05)。Ang组 ATR1mRNA 表达水平明显高与对照组、Ang+氯沙坦组及氯沙坦组，但对照组、Ang组、Ang+氯沙坦组和氯沙坦组 ATR1 蛋白表达水平无显著差异(Pgt;0.05)。 结论：Ang可激活肺部炎症反应和细胞凋亡并导致急性肺损伤，Ang在肺部的促炎作用主要是通
48、过其 1 型受体介导的。 第二部分，目的：探讨血管紧张素(Ang )通过血管紧张素1 型受体(ATR1)途径在介导脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤大鼠肺部炎症反应中的作用。 方法：清洁级 SD 大鼠 18 只，随机分为：对照组：静脉注射与 LPS 等量的生理盐水；ALI 组：静脉注射 LPS 10 mg/kg 复制 ALI 模型；ALI+氯沙坦组：静脉注射 LPS 10 mg/kg 前 30 min，予以静脉注射 losartan 20 ug/kg并以 20 ugkglt;#39;-1gt;minlt;#39;-1gt;持续静脉泵入。实验过程中股动脉置管每小时监测平均动脉压(MAP)，LPS 注射 6h 后处死动物。另 18 只 SD 大鼠进行 LPSR 寸血浆及肺组织 Ang 浓度影响实验。大鼠随机分为：LPS 3 h 组、LPS 9 h 组和 LPS 12 h 组，分别在LPS 注射 3、9 和 12 h 后处死。光镜观察肺组织病理改变并测定肺组织肺湿/干重
