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单分子水平上表面吸附行为的研究.doc

上传人:cjc2202537 文档编号:1522442 上传时间:2018-07-24 格式:DOC 页数:38 大小:71.32KB
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1、分析化学专业毕业论文 精品论文 单分子水平上表面吸附行为的研究关键词:单分子吸附 疏水表面 亲水表面 脂质体包裹量子点摘要:本文主要使用普通型荧光显微镜研究了固液两相界面的单分子吸附行为,包括建立了单分子水平上定量吸附分析的数据统计方法;比较了不同条件对蛋白分子吸附/解吸行为的影响;用量子点作为染料标记分子,观察脂质体与 -DNA 相互作用。具体工作如下: 1.由于噪音的存在使得信号在一定范围内波动,引起数据统计过程中的误差,这种误差对于定量分析而言是有较大干扰的。荧光信号强度和背景强度都会随着入射光强度的变化而变化,但是它们的变化趋势的不同将会引起信号噪音比、信号背景比的变化,在入射光强度一

2、定的条件下,选择最合适的曝光时间以获取最大的信号噪音比及信号背景比;保证数据采集过程中参数设置的最优化,最大限度的减小误差干扰;实验是在单分子水平上进行的,所以需要通过浓度与点数关系、单步漂白和荧光的特异性来进行单分子的确定;为了保证数据的稳定性和重现性,采用多次测量取均值和统计分布频率的数据处理方式减小误差。 2.用 Alexa Fluor.594 染料对牛血清白蛋白(BSA)、溶菌酶(Lysozyme)进行了标记,通过观察、统计荧光点数,分别分析了“软蛋白”BSA 在 pH=3.91、4.89、6.78 时以及“硬蛋白”溶菌酶在pH=4.03、6.82、11.05 时,在亲水性的玻璃和疏水

3、性的聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)两种不同性质的表面上的吸附量的变化。其变化与蛋白质的结构、蛋白电荷分布及表面电性有密切关系,因而表现一定的规律性。 3.初步研究了分别包裹量子点 QD525、585、655 的脂质体对 YOYO-1-DNA 和 EthD-2-DNA 在玻璃表面上吸附行为的影响。当 pHgt;5.5 时,-DNA 是处于自由扩散的运动状态,加入包裹量子点的脂质体能使其吸附固定于玻璃表面。而且脂质体与 DNA 相互作用存在一定的比例关系,并研究了作用时间、加入表面活性剂和有机物乙醇对它们相互作用的影响。正文内容本文主要使用普通型荧光显微镜研究

4、了固液两相界面的单分子吸附行为,包括建立了单分子水平上定量吸附分析的数据统计方法;比较了不同条件对蛋白分子吸附/解吸行为的影响;用量子点作为染料标记分子,观察脂质体与 -DNA 相互作用。具体工作如下: 1.由于噪音的存在使得信号在一定范围内波动,引起数据统计过程中的误差,这种误差对于定量分析而言是有较大干扰的。荧光信号强度和背景强度都会随着入射光强度的变化而变化,但是它们的变化趋势的不同将会引起信号噪音比、信号背景比的变化,在入射光强度一定的条件下,选择最合适的曝光时间以获取最大的信号噪音比及信号背景比;保证数据采集过程中参数设置的最优化,最大限度的减小误差干扰;实验是在单分子水平上进行的,

5、所以需要通过浓度与点数关系、单步漂白和荧光的特异性来进行单分子的确定;为了保证数据的稳定性和重现性,采用多次测量取均值和统计分布频率的数据处理方式减小误差。 2.用 Alexa Fluor.594 染料对牛血清白蛋白(BSA)、溶菌酶(Lysozyme)进行了标记,通过观察、统计荧光点数,分别分析了“软蛋白”BSA 在 pH=3.91、4.89、6.78 时以及“硬蛋白”溶菌酶在pH=4.03、6.82、11.05 时,在亲水性的玻璃和疏水性的聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)两种不同性质的表面上的吸附量的变化。其变化与蛋白质的结构、蛋白电荷分布及表面电性有密

6、切关系,因而表现一定的规律性。 3.初步研究了分别包裹量子点 QD525、585、655 的脂质体对 YOYO-1-DNA 和 EthD-2-DNA 在玻璃表面上吸附行为的影响。当 pHgt;5.5 时,-DNA 是处于自由扩散的运动状态,加入包裹量子点的脂质体能使其吸附固定于玻璃表面。而且脂质体与 DNA 相互作用存在一定的比例关系,并研究了作用时间、加入表面活性剂和有机物乙醇对它们相互作用的影响。本文主要使用普通型荧光显微镜研究了固液两相界面的单分子吸附行为,包括建立了单分子水平上定量吸附分析的数据统计方法;比较了不同条件对蛋白分子吸附/解吸行为的影响;用量子点作为染料标记分子,观察脂质体

7、与 -DNA相互作用。具体工作如下: 1.由于噪音的存在使得信号在一定范围内波动,引起数据统计过程中的误差,这种误差对于定量分析而言是有较大干扰的。荧光信号强度和背景强度都会随着入射光强度的变化而变化,但是它们的变化趋势的不同将会引起信号噪音比、信号背景比的变化,在入射光强度一定的条件下,选择最合适的曝光时间以获取最大的信号噪音比及信号背景比;保证数据采集过程中参数设置的最优化,最大限度的减小误差干扰;实验是在单分子水平上进行的,所以需要通过浓度与点数关系、单步漂白和荧光的特异性来进行单分子的确定;为了保证数据的稳定性和重现性,采用多次测量取均值和统计分布频率的数据处理方式减小误差。 2.用

8、Alexa Fluor.594 染料对牛血清白蛋白(BSA)、溶菌酶(Lysozyme)进行了标记,通过观察、统计荧光点数,分别分析了“软蛋白”BSA 在 pH=3.91、4.89、6.78 时以及“硬蛋白”溶菌酶在pH=4.03、6.82、11.05 时,在亲水性的玻璃和疏水性的聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)两种不同性质的表面上的吸附量的变化。其变化与蛋白质的结构、蛋白电荷分布及表面电性有密切关系,因而表现一定的规律性。 3.初步研究了分别包裹量子点 QD525、585、655 的脂质体对 YOYO-1-DNA 和 EthD-2-DNA 在玻璃表面上吸附

9、行为的影响。当 pHgt;5.5 时,-DNA 是处于自由扩散的运动状态,加入包裹量子点的脂质体能使其吸附固定于玻璃表面。而且脂质体与 DNA 相互作用存在一定的比例关系,并研究了作用时间、加入表面活性剂和有机物乙醇对它们相互作用的影响。本文主要使用普通型荧光显微镜研究了固液两相界面的单分子吸附行为,包括建立了单分子水平上定量吸附分析的数据统计方法;比较了不同条件对蛋白分子吸附/解吸行为的影响;用量子点作为染料标记分子,观察脂质体与 -DNA相互作用。具体工作如下: 1.由于噪音的存在使得信号在一定范围内波动,引起数据统计过程中的误差,这种误差对于定量分析而言是有较大干扰的。荧光信号强度和背景

10、强度都会随着入射光强度的变化而变化,但是它们的变化趋势的不同将会引起信号噪音比、信号背景比的变化,在入射光强度一定的条件下,选择最合适的曝光时间以获取最大的信号噪音比及信号背景比;保证数据采集过程中参数设置的最优化,最大限度的减小误差干扰;实验是在单分子水平上进行的,所以需要通过浓度与点数关系、单步漂白和荧光的特异性来进行单分子的确定;为了保证数据的稳定性和重现性,采用多次测量取均值和统计分布频率的数据处理方式减小误差。 2.用 Alexa Fluor.594 染料对牛血清白蛋白(BSA)、溶菌酶(Lysozyme)进行了标记,通过观察、统计荧光点数,分别分析了“软蛋白”BSA 在 pH=3.

11、91、4.89、6.78 时以及“硬蛋白”溶菌酶在pH=4.03、6.82、11.05 时,在亲水性的玻璃和疏水性的聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)两种不同性质的表面上的吸附量的变化。其变化与蛋白质的结构、蛋白电荷分布及表面电性有密切关系,因而表现一定的规律性。 3.初步研究了分别包裹量子点 QD525、585、655 的脂质体对 YOYO-1-DNA 和 EthD-2-DNA 在玻璃表面上吸附行为的影响。当 pHgt;5.5 时,-DNA 是处于自由扩散的运动状态,加入包裹量子点的脂质体能使其吸附固定于玻璃表面。而且脂质体与 DNA 相互作用存在一定的比例

12、关系,并研究了作用时间、加入表面活性剂和有机物乙醇对它们相互作用的影响。本文主要使用普通型荧光显微镜研究了固液两相界面的单分子吸附行为,包括建立了单分子水平上定量吸附分析的数据统计方法;比较了不同条件对蛋白分子吸附/解吸行为的影响;用量子点作为染料标记分子,观察脂质体与 -DNA相互作用。具体工作如下: 1.由于噪音的存在使得信号在一定范围内波动,引起数据统计过程中的误差,这种误差对于定量分析而言是有较大干扰的。荧光信号强度和背景强度都会随着入射光强度的变化而变化,但是它们的变化趋势的不同将会引起信号噪音比、信号背景比的变化,在入射光强度一定的条件下,选择最合适的曝光时间以获取最大的信号噪音比

13、及信号背景比;保证数据采集过程中参数设置的最优化,最大限度的减小误差干扰;实验是在单分子水平上进行的,所以需要通过浓度与点数关系、单步漂白和荧光的特异性来进行单分子的确定;为了保证数据的稳定性和重现性,采用多次测量取均值和统计分布频率的数据处理方式减小误差。 2.用 Alexa Fluor.594 染料对牛血清白蛋白(BSA)、溶菌酶(Lysozyme)进行了标记,通过观察、统计荧光点数,分别分析了“软蛋白”BSA 在 pH=3.91、4.89、6.78 时以及“硬蛋白”溶菌酶在pH=4.03、6.82、11.05 时,在亲水性的玻璃和疏水性的聚二甲基硅氧烷(polydimethylsilox

14、ane,PDMS)两种不同性质的表面上的吸附量的变化。其变化与蛋白质的结构、蛋白电荷分布及表面电性有密切关系,因而表现一定的规律性。 3.初步研究了分别包裹量子点 QD525、585、655 的脂质体对 YOYO-1-DNA 和 EthD-2-DNA 在玻璃表面上吸附行为的影响。当 pHgt;5.5 时,-DNA 是处于自由扩散的运动状态,加入包裹量子点的脂质体能使其吸附固定于玻璃表面。而且脂质体与 DNA 相互作用存在一定的比例关系,并研究了作用时间、加入表面活性剂和有机物乙醇对它们相互作用的影响。本文主要使用普通型荧光显微镜研究了固液两相界面的单分子吸附行为,包括建立了单分子水平上定量吸附

15、分析的数据统计方法;比较了不同条件对蛋白分子吸附/解吸行为的影响;用量子点作为染料标记分子,观察脂质体与 -DNA相互作用。具体工作如下: 1.由于噪音的存在使得信号在一定范围内波动,引起数据统计过程中的误差,这种误差对于定量分析而言是有较大干扰的。荧光信号强度和背景强度都会随着入射光强度的变化而变化,但是它们的变化趋势的不同将会引起信号噪音比、信号背景比的变化,在入射光强度一定的条件下,选择最合适的曝光时间以获取最大的信号噪音比及信号背景比;保证数据采集过程中参数设置的最优化,最大限度的减小误差干扰;实验是在单分子水平上进行的,所以需要通过浓度与点数关系、单步漂白和荧光的特异性来进行单分子的

16、确定;为了保证数据的稳定性和重现性,采用多次测量取均值和统计分布频率的数据处理方式减小误差。 2.用 Alexa Fluor.594 染料对牛血清白蛋白(BSA)、溶菌酶(Lysozyme)进行了标记,通过观察、统计荧光点数,分别分析了“软蛋白”BSA 在 pH=3.91、4.89、6.78 时以及“硬蛋白”溶菌酶在pH=4.03、6.82、11.05 时,在亲水性的玻璃和疏水性的聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)两种不同性质的表面上的吸附量的变化。其变化与蛋白质的结构、蛋白电荷分布及表面电性有密切关系,因而表现一定的规律性。 3.初步研究了分别包裹量子点 Q

17、D525、585、655 的脂质体对 YOYO-1-DNA 和 EthD-2-DNA 在玻璃表面上吸附行为的影响。当 pHgt;5.5 时,-DNA 是处于自由扩散的运动状态,加入包裹量子点的脂质体能使其吸附固定于玻璃表面。而且脂质体与 DNA 相互作用存在一定的比例关系,并研究了作用时间、加入表面活性剂和有机物乙醇对它们相互作用的影响。本文主要使用普通型荧光显微镜研究了固液两相界面的单分子吸附行为,包括建立了单分子水平上定量吸附分析的数据统计方法;比较了不同条件对蛋白分子吸附/解吸行为的影响;用量子点作为染料标记分子,观察脂质体与 -DNA相互作用。具体工作如下: 1.由于噪音的存在使得信号

18、在一定范围内波动,引起数据统计过程中的误差,这种误差对于定量分析而言是有较大干扰的。荧光信号强度和背景强度都会随着入射光强度的变化而变化,但是它们的变化趋势的不同将会引起信号噪音比、信号背景比的变化,在入射光强度一定的条件下,选择最合适的曝光时间以获取最大的信号噪音比及信号背景比;保证数据采集过程中参数设置的最优化,最大限度的减小误差干扰;实验是在单分子水平上进行的,所以需要通过浓度与点数关系、单步漂白和荧光的特异性来进行单分子的确定;为了保证数据的稳定性和重现性,采用多次测量取均值和统计分布频率的数据处理方式减小误差。 2.用 Alexa Fluor.594 染料对牛血清白蛋白(BSA)、溶

19、菌酶(Lysozyme)进行了标记,通过观察、统计荧光点数,分别分析了“软蛋白”BSA 在 pH=3.91、4.89、6.78 时以及“硬蛋白”溶菌酶在pH=4.03、6.82、11.05 时,在亲水性的玻璃和疏水性的聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)两种不同性质的表面上的吸附量的变化。其变化与蛋白质的结构、蛋白电荷分布及表面电性有密切关系,因而表现一定的规律性。 3.初步研究了分别包裹量子点 QD525、585、655 的脂质体对 YOYO-1-DNA 和 EthD-2-DNA 在玻璃表面上吸附行为的影响。当 pHgt;5.5 时,-DNA 是处于自由扩散的

20、运动状态,加入包裹量子点的脂质体能使其吸附固定于玻璃表面。而且脂质体与 DNA 相互作用存在一定的比例关系,并研究了作用时间、加入表面活性剂和有机物乙醇对它们相互作用的影响。本文主要使用普通型荧光显微镜研究了固液两相界面的单分子吸附行为,包括建立了单分子水平上定量吸附分析的数据统计方法;比较了不同条件对蛋白分子吸附/解吸行为的影响;用量子点作为染料标记分子,观察脂质体与 -DNA相互作用。具体工作如下: 1.由于噪音的存在使得信号在一定范围内波动,引起数据统计过程中的误差,这种误差对于定量分析而言是有较大干扰的。荧光信号强度和背景强度都会随着入射光强度的变化而变化,但是它们的变化趋势的不同将会

21、引起信号噪音比、信号背景比的变化,在入射光强度一定的条件下,选择最合适的曝光时间以获取最大的信号噪音比及信号背景比;保证数据采集过程中参数设置的最优化,最大限度的减小误差干扰;实验是在单分子水平上进行的,所以需要通过浓度与点数关系、单步漂白和荧光的特异性来进行单分子的确定;为了保证数据的稳定性和重现性,采用多次测量取均值和统计分布频率的数据处理方式减小误差。 2.用 Alexa Fluor.594 染料对牛血清白蛋白(BSA)、溶菌酶(Lysozyme)进行了标记,通过观察、统计荧光点数,分别分析了“软蛋白”BSA 在 pH=3.91、4.89、6.78 时以及“硬蛋白”溶菌酶在pH=4.03

22、、6.82、11.05 时,在亲水性的玻璃和疏水性的聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)两种不同性质的表面上的吸附量的变化。其变化与蛋白质的结构、蛋白电荷分布及表面电性有密切关系,因而表现一定的规律性。 3.初步研究了分别包裹量子点 QD525、585、655 的脂质体对 YOYO-1-DNA 和 EthD-2-DNA 在玻璃表面上吸附行为的影响。当 pHgt;5.5 时,-DNA 是处于自由扩散的运动状态,加入包裹量子点的脂质体能使其吸附固定于玻璃表面。而且脂质体与 DNA 相互作用存在一定的比例关系,并研究了作用时间、加入表面活性剂和有机物乙醇对它们相互作用

23、的影响。本文主要使用普通型荧光显微镜研究了固液两相界面的单分子吸附行为,包括建立了单分子水平上定量吸附分析的数据统计方法;比较了不同条件对蛋白分子吸附/解吸行为的影响;用量子点作为染料标记分子,观察脂质体与 -DNA相互作用。具体工作如下: 1.由于噪音的存在使得信号在一定范围内波动,引起数据统计过程中的误差,这种误差对于定量分析而言是有较大干扰的。荧光信号强度和背景强度都会随着入射光强度的变化而变化,但是它们的变化趋势的不同将会引起信号噪音比、信号背景比的变化,在入射光强度一定的条件下,选择最合适的曝光时间以获取最大的信号噪音比及信号背景比;保证数据采集过程中参数设置的最优化,最大限度的减小

24、误差干扰;实验是在单分子水平上进行的,所以需要通过浓度与点数关系、单步漂白和荧光的特异性来进行单分子的确定;为了保证数据的稳定性和重现性,采用多次测量取均值和统计分布频率的数据处理方式减小误差。 2.用 Alexa Fluor.594 染料对牛血清白蛋白(BSA)、溶菌酶(Lysozyme)进行了标记,通过观察、统计荧光点数,分别分析了“软蛋白”BSA 在 pH=3.91、4.89、6.78 时以及“硬蛋白”溶菌酶在pH=4.03、6.82、11.05 时,在亲水性的玻璃和疏水性的聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)两种不同性质的表面上的吸附量的变化。其变化与蛋

25、白质的结构、蛋白电荷分布及表面电性有密切关系,因而表现一定的规律性。 3.初步研究了分别包裹量子点 QD525、585、655 的脂质体对 YOYO-1-DNA 和 EthD-2-DNA 在玻璃表面上吸附行为的影响。当 pHgt;5.5 时,-DNA 是处于自由扩散的运动状态,加入包裹量子点的脂质体能使其吸附固定于玻璃表面。而且脂质体与 DNA 相互作用存在一定的比例关系,并研究了作用时间、加入表面活性剂和有机物乙醇对它们相互作用的影响。本文主要使用普通型荧光显微镜研究了固液两相界面的单分子吸附行为,包括建立了单分子水平上定量吸附分析的数据统计方法;比较了不同条件对蛋白分子吸附/解吸行为的影响

26、;用量子点作为染料标记分子,观察脂质体与 -DNA相互作用。具体工作如下: 1.由于噪音的存在使得信号在一定范围内波动,引起数据统计过程中的误差,这种误差对于定量分析而言是有较大干扰的。荧光信号强度和背景强度都会随着入射光强度的变化而变化,但是它们的变化趋势的不同将会引起信号噪音比、信号背景比的变化,在入射光强度一定的条件下,选择最合适的曝光时间以获取最大的信号噪音比及信号背景比;保证数据采集过程中参数设置的最优化,最大限度的减小误差干扰;实验是在单分子水平上进行的,所以需要通过浓度与点数关系、单步漂白和荧光的特异性来进行单分子的确定;为了保证数据的稳定性和重现性,采用多次测量取均值和统计分布

27、频率的数据处理方式减小误差。 2.用 Alexa Fluor.594 染料对牛血清白蛋白(BSA)、溶菌酶(Lysozyme)进行了标记,通过观察、统计荧光点数,分别分析了“软蛋白”BSA 在 pH=3.91、4.89、6.78 时以及“硬蛋白”溶菌酶在pH=4.03、6.82、11.05 时,在亲水性的玻璃和疏水性的聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)两种不同性质的表面上的吸附量的变化。其变化与蛋白质的结构、蛋白电荷分布及表面电性有密切关系,因而表现一定的规律性。 3.初步研究了分别包裹量子点 QD525、585、655 的脂质体对 YOYO-1-DNA 和

28、EthD-2-DNA 在玻璃表面上吸附行为的影响。当 pHgt;5.5 时,-DNA 是处于自由扩散的运动状态,加入包裹量子点的脂质体能使其吸附固定于玻璃表面。而且脂质体与 DNA 相互作用存在一定的比例关系,并研究了作用时间、加入表面活性剂和有机物乙醇对它们相互作用的影响。本文主要使用普通型荧光显微镜研究了固液两相界面的单分子吸附行为,包括建立了单分子水平上定量吸附分析的数据统计方法;比较了不同条件对蛋白分子吸附/解吸行为的影响;用量子点作为染料标记分子,观察脂质体与 -DNA相互作用。具体工作如下: 1.由于噪音的存在使得信号在一定范围内波动,引起数据统计过程中的误差,这种误差对于定量分析

29、而言是有较大干扰的。荧光信号强度和背景强度都会随着入射光强度的变化而变化,但是它们的变化趋势的不同将会引起信号噪音比、信号背景比的变化,在入射光强度一定的条件下,选择最合适的曝光时间以获取最大的信号噪音比及信号背景比;保证数据采集过程中参数设置的最优化,最大限度的减小误差干扰;实验是在单分子水平上进行的,所以需要通过浓度与点数关系、单步漂白和荧光的特异性来进行单分子的确定;为了保证数据的稳定性和重现性,采用多次测量取均值和统计分布频率的数据处理方式减小误差。 2.用 Alexa Fluor.594 染料对牛血清白蛋白(BSA)、溶菌酶(Lysozyme)进行了标记,通过观察、统计荧光点数,分别

30、分析了“软蛋白”BSA 在 pH=3.91、4.89、6.78 时以及“硬蛋白”溶菌酶在pH=4.03、6.82、11.05 时,在亲水性的玻璃和疏水性的聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)两种不同性质的表面上的吸附量的变化。其变化与蛋白质的结构、蛋白电荷分布及表面电性有密切关系,因而表现一定的规律性。 3.初步研究了分别包裹量子点 QD525、585、655 的脂质体对 YOYO-1-DNA 和 EthD-2-DNA 在玻璃表面上吸附行为的影响。当 pHgt;5.5 时,-DNA 是处于自由扩散的运动状态,加入包裹量子点的脂质体能使其吸附固定于玻璃表面。而且脂

31、质体与 DNA 相互作用存在一定的比例关系,并研究了作用时间、加入表面活性剂和有机物乙醇对它们相互作用的影响。特别提醒 :正文内容由 PDF 文件转码生成,如您电脑未有相应转换码,则无法显示正文内容,请您下载相应软件,下载地址为 http:/ 。如还不能显示,可以联系我 q q 1627550258 ,提供原格式文档。“垐垯櫃 换烫梯葺铑?endstreamendobj2x 滌?U 閩 AZ箾 FTP 鈦X 飼?狛P? 燚?琯嫼 b?袍*甒?颙嫯?4)=r 宵?i?j 彺帖 B3 锝檡骹笪 yLrQ#?0 鯖 l 壛枒l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛渓?擗#?“?# 綫 G 刿#K 芿$?7. 耟?Wa 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 皗 E|?pDb 癳$Fb 癳$Fb癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$F?責鯻 0 橔 C,f 薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵秾腵薍秾腵%?秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍

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