蛋白质一级结构的测定

1、Biochemistry,For Specialty of Biotechnology or Bioengineering at CSUMr. XIA Jinlan,Chapter 5 Proteins: Their Biological Functions and Primary Structure 蛋白质的生物学功能和一级结构,Basic constituents and structures of Proteins 蛋白质的基本组成和结构 Architecture of protein molecules蛋白质分子的构架 Classification of Proteins 蛋白质的分类 The many Biological functions of proteins 蛋白质的许多生物学功能 Some proteins have chemical groups other than amino acids 有些蛋白质含有非氨基酸基团 Protein pu。

2、氨基酸与蛋白质一级结构,核 糖 体,核糖体是合成蛋白质的细胞器,它的主要成分是蛋白与 RNA,其唯一的功能是按照mRNA的指令用氨基酸合成多肽链。,The endomembrane system（内膜系统） Manufacture and distribution of cellular products（细胞产物的生产和组装）,Endoplasmic recticulum（内质网） The Golgi apparatus （高尔基体） Lysosomes （溶酶体） Vacuoles （液泡）,生物膜,细胞膜细胞器膜,Endoplasmic recticulum 内质网,蛋白质的合成,脂类的合成,蛋白质的修饰,新生多肽的折叠与组装,内质网功能,形态结构,功能,高 尔 基 体,电镜。

3、1兰州大学 2005 2006 学年第 二 学期期末考试试卷（A 卷）课程名称： 动物生理 任课教师： 陈强、董守良 学院： 专业： 年级： 姓名： 校园卡号： 一、名词解释（每题 3分，共 24分）1、paracrine； 2、glomerular filtration rate； 3、mucus bicarbonate barrier； 4、non-protein respiration quotient； 5、食物的氧热价； 6、胃肠激素； 7、应激反应；8、牵涉痛二、单项选择（每题 1分，共 20分）1. Which of the following statements is FALSE? a. Increased renal sympathetic nerve activity will increase afferent arteriolar 。

4、蛋白质的结构 （structure of protein）,为研究的方便，可将蛋白质的结构分为两类： 初级结构（primary structure）:即一级结构，蛋白质的最基本结构； 高级结构（ advanced structure ）又称为三维结构、立体结构、空间结构、构象 二级结构（secondary structure） 三级结构(tertiary structure) 四级结构(quaternary structure) 初级结构与高级结构的关系:一级结构决定高级结构,第3节 蛋白质的一级结构 （primary structure of proteins）,1 蛋白质一级结构的概念（concept of proteins primary structure ） 2 蛋白质一级结构的例子胰。

5、1氨基酸和蛋白质的一级结构1.1 蛋白质是由二十种不同的氨基酸构成的1.1.1 二十种氨基酸可以按其侧链分类1.1.2氨基酸的离子状态取决于环境的pH1.1.3 使用离子交换层析可将各种氨基酸分开1.1.4 氨基酸可进行特征的化学反应 1.2蛋白质中的氨基酸是通过肽键连接的 1.3肽可以化学合成 1.4蛋白质可以通过各种生物化学技术纯化1.4.1柱层析常用于蛋白质的分离纯化1.4.2电泳分离蛋白质是根据蛋白质在电场中的迁移率 1.5蛋白质的一级结构就是蛋白质的氨基酸序列1.5.1蛋白质的氨基酸组成可以定量确定1.5.2 Edman降解方法常用于氨基酸序列的测定1.5.3。

6、蛋白质的一级结构与功能的关系 蛋白质的空间结构与功能的关系,1.蛋白质的一级结构与其构象及功能的关系2. 蛋白质空间橡象与功能活性的关系,一、蛋白质的一级结构,白质的一级结构（primary structure）就是蛋白质多肽链中氨基酸残基的排列顺序（sequence），也是蛋白质最基本的结构。它是由基因上遗传密码的排列顺序所决定的。各种氨基酸按遗传密码的顺序，通过肽键连接起来，成为多肽链，故肽键是蛋白质结构中的主键。迄今已有约一千种左右蛋白质的一级结构被研究确定，如胰岛素，胰核糖核酸酶、胰蛋白酶等。蛋白质的一级结构决定了蛋白质。

7、研究蛋白质的一级结构 从确定组成蛋白质的单元结构氨基酸算起，已有 150 年的悠久历史，直到 1955 年，Sanger 首次阐明胰岛素的氨基酸排列顺序，为研究蛋白质的一级结构开辟了道路。这在分子生物学的发展进程中是一个重要突破。目前关于核酸的一级结构研究，由于 Sanger 等发明了加减法，可以得到了突飞猛进的发展。对此之下，关于蛋白质的一级结构研究进展不如核酸迅速。但随着 Edman 液相自动顺序分析仪和固相顺序分析仪以及气相色谱 质谱(GC MS)等方法的相继出现。使结构分析的速度也显著加快。至今已完成近千种蛋白质的一级结构分析。。

8、生物化学,蛋白质的结构,蛋白质化学之二,1.3 蛋白质的结构,蛋白质的一级结构,蛋白质的二级结构,蛋白质的四级结构,蛋白质的三级结构,1.3 蛋白质的结构,蛋白质的结构具有多种结构层次，包括一级结构和空间结构，空间结构又称为构象。空间结构包括二级结构、三级结构和四级结构。在二级与三级之间还存在超二级结构和结构域这两个结构层次。,蛋白质的一级结构,1.3 蛋白质的结构,一、蛋白质的一级结构,蛋白质的一级结构（Primary structure）又称为共价结构或化学结构。它是指蛋白质中的氨基酸按照特定的排列顺序通过肽键连接起来的多肽链结构。。

9、第三章 蛋白质,第一节 概述,一、蛋白质的概念,二、蛋白质的研究简史,三、蛋白质的化学组成,四、蛋白质的分类,五、蛋白质的分布,六、蛋白质的生物学功能,蛋白质的概念:蛋白质是一切生物体中普遍存在的，由天然氨基酸通过肽键连接而成的生物大分子；其种类繁多，各具有定的相对分子质量、复杂的分子结构和特定的生物功能，是表达生物遗传性状的一类主要物质。,1838年 Muller研究了血清、蛋清、蚕丝等物质的元素组成后, 发现它们均可以用C40H62N10O12 来表示, 命名为“Protein”,并发展成 “基团” 学说 。 19世纪末 从蛋白质水解产物分离得。

10、蛋白质一级结构的测定1.测定蛋白质分子中多肽链的数目：N-末端和 C-末端残基的摩尔数和蛋白质的相对分子质量2.拆分蛋白质分子的多肽链非共价相互作用缔合的寡聚蛋白：用变性剂尿素盐酸胍共价二硫桥：氧化剂或还原剂3.断开多肽链内的二硫桥过甲酸氧化法 常用试剂过甲酸巯基化合物还原法：过量的巯基乙醇处理，ph8-9 室温，系统中放尿素和盐酸胍，烷基化试剂保护 常用试剂 巯基乙醇，巯基乙酸 4.分析每一多肽链的氨基酸组成：完全水解酸水解：常用 hcl,水解后除去碱水解：用于测定色氨酸含量。很多氨基酸遭到破坏，色氨酸定量回收。5.鉴定多。

11、蛋白质化学,蛋白质一级结构的测定,序列测定的基本方法学,将肽段用不同方法专一性地切断,将得到的肽段分离纯化之后,分别测出各自的序列。再将不同方法得到的序列进行比对，就可以得到肽链的一级结构。,序列测定一般步骤,纯度要求:纯度在97%以上。 双向电泳；凝胶电泳；N-末端测定；纯化至恒定酶活； 肽谱分析。分子量测定多肽链的组成，二硫键的断裂。蛋白质的氨基酸的组成。蛋白质的配基蛋白质的端基分析进行正常的序列测定*,蛋白质和肽的氨基酸组成,蛋白质的水解,酸水解6 mol/L的盐酸或4 mol/L的硫酸,105-110水解20小时。优点:不容易引起。

12、蛋白质一级结构的测定,魏涛,蛋白质的一级结构指：蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序，包括二硫键的位置。组成一个蛋白质分子的多肽链的数目和多肽链中氨基酸的精确序列是蛋白质一级结构的两个重要方面。其中最重要的是多肽链的氨基酸顺序，它是蛋白质生物功能的基础。,一级结构 ( Primary Structure ),包括以下几方面内容：多肽链的数目；每条多肽链中氨基酸的种类、残 基数目和排列次序；链内或链间二硫键的位置和数目。,蛋白质一级结构测定的策略,从蛋白质开始的蛋白质序列分析 从DNA开始推蛋白质氨基酸序列 质谱法测定蛋白质的一级结构,。