1、生物化学实验 课程 期末 考试试卷（第 1 卷）考试专业班级 考试形式 考试时间 120 分钟考试学期 考试类型 命题教师 李 峰 李 荣题号 一 二 三 四 五 六 七 八 总分分值 24 20 16 40 100一、名词解释题（每题 4 分，共 24 分）1、解链温度2、层析3、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳4、复性5、蛋白质沉淀6、双缩脲反应二、填空题（每空 1 分，共 20 分）1、A、B、C 、 D、E 五种氨基酸，其 pI 由低到高，设溶液 pH 在 C 的等电点，则 A 带 ，B 带 ， C 带 ， D 带 ， E 带 。 2、测定蛋白质浓度的方法主要有（ ）、（ ）、（ ）。 3、
2、双键 DNA 热变性后，或在 pH2 以下，或在 pH12 以上时，其 OD260（ ），同样条件下，单键 DNA 的 OD260（ ）。4、硝酸纤维素膜可结合（ ）链核酸。将 RNA 变性后转移到硝酸纤维素膜上再进行杂交，称（ ）印迹法。5、变性 DNA 的复性与许多因素有关，包括（ ）、（ ）、（ ）、（ ）、（ ）。6、利用蛋白质不能通过半透膜的特性，使它和其他小分子物质分开的方法有（ ）和（ ）等。7、核酸在 260nm 附近有强吸收，这是由于（ ）。8、在分光光度计的使用或检定中， （ ）的准确度是衡量仪器工作性能的一项重要指标，它的准确程度直接关系到所测数据的可信性及科学性。 （
3、）的误差越大，测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性。三、选择（每题 2 分，共 16 分）1、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用属于( )A 不可逆 B 竞争性 C 非竞争性2、羟化酶的辅酶是（ ）A 硫胺素 B 核黄素 C 吡哆素 D 维生素 C3、下列哪组反应是错误的？ （ ）A、葡萄糖Molish 反应 B、胆固醇Libermann-Burchard 反应 C、色氨酸坂口（Sakaguchi）反应 D、氨基酸茚三酮反应4、SDS 凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（ ）A、在一定 pH 值条件下所带的净电荷的不同 B、分子大小不同 C、分子极性不同 D、溶解度不同5、
4、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查？ （ ）A、茚三酮试剂 B、奈氏试剂 C、双缩脲试剂 D、Folin-酚试剂6、酶的活化和去活化循环中，酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上？（ ）A、天冬氨酸 B、脯氨酸 C、赖氨酸 D、丝氨酸7、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收？（ ）A、215nm B、260nm C、280nm D、340nm8、在基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒以便于重组和筛选。已知有些不同的限制酶也可能会切出相同的黏性末端限制酶 I 的识别序列和切点是一 G GATCC一，限制酶的识别序
5、列和切点是一 GATC 一。根据图示判断下列操作正确的是（ ）A、质粒用限制酶 I 切割，目的基因用限制酶切割 B质粒用限制酶切割，目的基因用限制酶 I 切割 C目的基因和质粒均用限制酶 I 切割 D目的基因和质粒均用限制酶切割四、简答题：（每题 8 分，共 40 分） 1、紫外分光光度法测定核酸含量的原理。2、蛋白质变性与沉淀的关系。3、试述凝胶成像系统操作时应注意的事项。4、许多生物材料在提取核酸时，都会遇到多糖的污染问题，具体表现为有机溶剂沉淀时，沉淀很多，但复溶时，大量沉淀不溶，电泳观察时核酸含量很低。试述克服多糖污染可采用的办法。5、常用移液器的规格有哪些？如何正确使用移液器？生物化
6、学实验 课程 期末 考试试卷（第 2 卷）考试专业班级 考试形式 考试时间 120 分钟考试学期 考试类型 命题教师 李 峰 李 荣题号 一 二 三 四 五 六 七 八 总分分值 24 20 16 40 100一、名词解释题（每题 4 分，共 24 分）1、等电点 2、解链温度3、透析4、DNA 变性5、同工酶6、黄色反应二、填空题（每空 1 分，共 20 分）1、酶的专一性可分为：_、_和_ 三类，2、核黄素和硫胺素在体内形成的辅酶分别是_和_ 。缺乏维生素C 引起的疾病是_ 。3、通常可用紫外分光光度法测定蛋白质的含量，这是因为蛋白质分子中的（ ）、（ ）、（ ）三种氨基酸的共轭双键有紫外
7、吸收能力。4、变性 DNA 的复性与许多因素有关，包括（ ）、（ ）、（ ）、（ ）、（ ）。5、常用二苯胺法测定（ ）含量，用苔黑酚法测定（ ）含量。6、使用离心机时，如有噪音或机身振动时，应立即（ ），并且离心管须对称放入套管中，防止机身振动，若只有一支样品管，则另外一支要用（ ）代替。7、在分光光度计的使用或检定中， （ ）的准确度是衡量仪器工作性能的一项重要指标，它的准确程度直接关系到所测数据的可信性及科学性。 （ ）的误差越大，测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性。三、选择（每题 2 分，共 16 分）1、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收？（ ）A、215nm B、260
8、nm C、280nm D、340nm2、Sanger 试剂是（ ）A、苯异硫氰酸 B、2，4-二硝基氟苯 C、丹磺酰氯 D、-巯基乙醇3 、下列哪组反应是错误的？ （ ）A、葡萄糖Molish 反应 B、胆固醇Libermann-Burchard 反应 C、色氨酸坂口（Sakaguchi）反应 D、氨基酸茚三酮反应4、下列蛋白质组分中，哪一种在 280nm 具有最大的光吸收？（ ）A、色氨酸的吲哚基 B、酪氨酸的酚环 C、苯丙氨酸的苯环 D、半胱氨酸的硫原子5、SDS 凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（ ）A、在一定 pH 值条件下所带的净电荷的不同 B、分子大小不同 C、分子极
9、性不同 D、溶解度不同6、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查？ （ ）A、茚三酮试剂 B、奈氏试剂 C、双缩脲试剂 D、Folin-酚试剂7、 磺胺类药物是下列哪种酶的抑制剂（ ）A 二氢叶酸合成酶 B 四氢叶酸合成酶 C 一碳基团转移酶8、在基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒以便于重组和筛选。已知有些不同的限制酶也可能会切出相同的黏性末端限制酶 I 的识别序列和切点是一 G GATCC一，限制酶的识别序列和切点是一 GATC 一。根据图示判断下列操作正确的是（ ）A、质粒用限制酶 I 切割，目的基因用限制酶切割 B质
10、粒用限制酶 切割，目的基 因用限制酶 I 切割 C目的基因和质粒均用限制酶 I 切割 D目的基因和质粒均用限制酶切割四、简答题：（每题 8 分，共 40 分）1、若样品中含有蛋白质和核苷酸等杂质，如何排除干扰？2、体液血糖测定有哪些方法？3、DNA 在电场中的迁移率取决于哪些因素？4、琼脂糖凝胶有哪些注意事项？5、你了解的离心机有哪些种类？如何正确使用离心机？生物化学实验 课程 期末 考试试卷（第 3 卷）考试专业班级 考试形式 考试时间 120 分钟考试学期 考试类型 命题教师 李 峰 李 荣题号 一 二 三 四 五 六 七 八 总分分值 24 20 16 40 100一、名词解释题（每题
11、4 分，共 24 分）1、解链温度2、蛋白质变性3、退火4、竞争性抑制5、增色效应6、不可逆沉淀二、填空题（每空 1 分，共 20 分）1、A、B、C 、 D、E 五种氨基酸，其 pI 由低到高，设溶液 pH 在 C 的等电点，则 A 带 ，B 带 ， C 带 ， D 带 ， E 带 。 2、测定蛋白质浓度的方法主要有（ ）、（ ）、（ ）。 4、非竞争性抑制剂的动力学特点是：Km 值_，Vmax_ 。5、双键 DNA 热变性后，或在 pH2 以下，或在 pH12 以上时，其 OD260（ ），同样条件下，单键 DNA 的 OD260（ ）。7、缺乏 VA 引起的病是_；缺乏 VD 引起的病是
12、_；缺乏Vc 引起的病是_；缺乏 VB11 引起的病是_ 。8、测定酶活力时，底物浓度应_、反应温度应选在_、反应 pH 应选在 _、反应时间应在反应的_期进行。三、选择（每题 2 分，共 16 分）1、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用属于( )A 不可逆 B 竞争性 C 非竞争性2、羟化酶的辅酶是（ ）A 硫胺素 B 核黄素 C 吡哆素 D 维生素 C3、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查？ （ ）A、茚三酮试剂 B、奈氏试剂 C、双缩脲试剂 D、Folin-酚试剂4、SDS 凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（ ）A、
13、在一定 pH 值条件下所带的净电荷的不同 B、分子大小不同 C、分子极性不同 D、溶解度不同5、人体内不能合成的脂肪酸是（ ） A.油酸 B.亚油酸 C.硬脂酸 D.软脂酸 6、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键？（ ）A、双缩脲反应 B、凯氏定氮 C、紫外吸收 D、羧肽酶法7、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键？（ ）A、双缩脲反应 B、凯氏定氮 C、紫外吸收 D、羧肽酶法 8、在基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒以便于重组和筛选。已知有些不同的限制酶也可能会切出相同的黏性末端限制酶 I 的识别序列和切点是一 G GATCC一，限制酶的识别序列和切点是一 GATC 一。根据图示判断下列操作正确的是（ ）A、质粒用限制酶 I 切割，目的基因用限制酶切割 B质粒用限制酶切割，目的基因用限制酶 I 切割 C目的基因和质粒均用限制酶 I 切割 D目的基因和质粒均用限制酶切割四、简答题：（每题 8 分，共 40 分） 1、考马斯亮蓝 G-250 法测定蛋白质含量的原理是什么？2、何谓 Rf 值？影响 Rf 值的主要因素是什么？3、蛋白质分离和纯化的一般方法？ 4、如何正确选择核酸电泳指示剂？5、试述琼脂糖凝胶电泳分离、鉴定核酸分子的原理及简要操作步骤。
