1、生化实验总结姓名：李梦华 系年级：2012 级生科三班 组别：55 科目：生物化学实验 题目：生化试验总结 学号：201200140051指缝很宽,时间太瘦,悄悄从指缝间溜走。转眼间，一学期就过去了，时间真的只是稍纵即逝。这学期，和往年一样，作为一个生物专业的学生，实验课自然是必不可少的。这学期，主要开设了三门实验课程，让我收获颇丰的当然要数生化实验了，因为它不但丰富了我们的知识，还锻炼了我们实验操作的基本技能。先从第一节课说起吧，记得第一节课刚进实验室的时候，我们并没有做任何实验，只是简单地打扫了一下卫生，随后老师对我们进行了生化实验注意事项的讲解，也就是安全教育，顿时让我肃然起敬。当时就觉
2、得生化实验真是既有趣有危险。有趣的是可以学到很多常用的基本实验方法和原理，见识到很多昂贵的仪器，危险的自然就是一个不留神就会带来很严重的伤害。从第一节课起，我就学到了一件事，那就是认真仔细，谨慎莫急从第二节课起，我们就开始认认真真的做实验了。说实话，我也记不太清我们总共做了几个实验，我只大概记得我们做了哪几类实验，大概可分为测蛋白质含量的，测糖含量的，测 RNA等等的定量实验，和测酶性质，肌糖原酵解等定性试验。让我印象颇深的当属以下几个实验了。关于蛋白质的测定，我们学习了三种方法，但我记得比较详细的应该算是 folin-酚试剂法和经典的凯氏定氮法。前者利用 folin-酚和酪氨酸和色氨酸的结合
3、来测定蛋白质含量，同时我们也是第一次接触到了紫外分光光度计，以及标准曲线的绘制。利用标准曲线来测定样本的蛋白质浓度。后者实验原理比较复杂，但总体来说就是将蛋白质中的有机氮转化成无机氮（硫酸铵） ，然后再与碱液反应，通过测量氨气的释放量来间接测得蛋白质的含氮量，然后再求蛋白质的含量。这次实验我们学会了使用凯氏定氮仪，并且明白了其基本工作原理。本仪器使用方便，效果良好。使用的过程中，由于要长时间做大量的重复测定，由此也锻炼了我们坚忍不拔的实验精神，磨练了意志，同时也经过反复的练习而增强了有关该实验的实验操作技能，如何缓慢加液防止倒吸，如何控制蒸汽发生器防止暴沸，如何按照顺序严格的加入试剂，以及如何
4、进行滴定等，通过该实验，对这些技能都有了进一步的了解。说完蛋白质的测量，那接下来就该讲还原糖的测定了。对于还原糖含量的测定，我们也学习了很多种方法，但我印象中较深刻的当属水杨酸还原法测还原糖的含量了。在这次实验中，我们更加详细的了解了分光光度计的使用：72 型分光光度计是可见光分光光度计，波长范围为 420nm700nm，它由三大部分组 成:磁饱和稳压器、光源、单色光器和测光机构、微电计。它的基本依据是朗伯 比耳定律，它是根据相对测量原理工作的，即先选定某一溶剂作为标准溶液，设定其透光率为 100%，被测试样的透光率是相对于标准溶液而言的，即让单色光分别通过被测试样和标准溶液，二者能量的比值就
5、是在一定波长下对于被测试样的透光率。在测量的时候，需要不断的润洗，这着实锻炼了我们的耐心和技法，润洗的时候所倒的液体不能太多也不能太少，不然会造成浪费或是润洗效果不好的后果。做实验的时候，我和我的搭档同时配合，加快了的做实验的步伐，节省了时间，顿时让我明白了合作的重要性。再然后，就是比较有代表性的点样操作实验了 醋酸纤维素薄膜电泳的实验。在醋酸纤维素薄膜电泳的实验中，我们主要学习到的是在复杂的实验材料处理的过程中如何保持清醒的头脑，以及完整的思路，这样才能把实验做好，并且做的很快。该实验要配制缓冲液、漂洗液、染色液、透明液，从薄膜的制作，到点样，处理、电泳等要经过一系列复杂的实验操作，每一步都
6、很重要，每一步的处理时间，处理程度都要靠自己去把握，最后还要经过漂洗、冷风吹干，最后的处理是要及其小心的，否则会把薄膜弄破，或者出现皱缩，不平整。如果前期点样不好，或者染色、电泳过程中稍有不慎，便的不好较好的电泳条带，出现拖尾，或断续的现象。因此，这个实验尤其考验我们的操作能力和细心水平。以上所说的实验除电泳外，基本都是定量试验，但这学期也做了为数不多的定性试验，那就是酶性质实验和肌糖元的酵解。先说，酶性质实验吧，首先第一个难题就是缓冲液的配制，为了准确配置不同 pH的缓冲液，配置所需的液体的体积需要精确到小数点后两位，用移液管量取小数点后两位的体积真心是对技术的一大挑战啊，除去这一难题外，还
7、需测定如何确定最佳保温时间，这些都不是那么容易操作的。还记得当初做实验的时候，我们所用的酶是小组另一个成员的，测定的酶的保温时间是 7min，挺合适的，于是我们就开始正式做不同 pH下的实验了，这对时间的把握要求很严格，必须严格控制在每步操作相隔一分钟，我们相互合作，终于把各种试剂加完了，最后是通过颜色反应来判断最适宜 ph，准确判断颜色深浅是一个方面，更重要的是颜色指示剂的加入量要绝对控制好，如果加的太多，则会使所有的试管颜色偏深，甚至都变成黑色，如果加的太少，那么染色就太浅，变色不明显，所以，太深太浅都不适于颜色梯度变化的观察。由此可知，在以后的类似试验中尤其要控制指示剂的加入量，力求达到
8、一个最佳的颜色梯度。可是，由于 3号管跳关了，pH 缓冲液的 pH过低，我们的实验并没有过关，但所幸我们当时是第一个做完的，虽然没有过关，但我们又足够的时间再来一次，于是，我们重新配置了那瓶不合适的缓冲液，又做了一遍，这回的实验结果则相当准确，我和我的小伙伴都很开心，最终拿到了好成绩。以上就是我自己对本学期的实验的一个小小的心得概括，通过一学期的实验我真的学到了不少知识，又进一步的锻炼了自己的实验操作技能。不管做任何一种实验，耐心，严谨，认真的科学精神都是必不可少的，我觉得通过这一学期的生化实验的锻炼，我的耐心和严谨都得到了很大的提升。也许，这学期所学到的生化实验相关知识会随着岁月的流逝被逐渐淡忘，但是通过实验所培养出的耐心和严谨会陪伴我一生，为我以后的科研路奠定了良好的基础，感谢生化试验，感谢生化老师。老师，您们也辛苦了！
