1、课时跟踪检测（十二） DNA 的粗提取与鉴定一、选择题1下列关于 DNA 的粗提取与鉴定实验的相关叙述，错误的是( )A可以选择 DNA 含量较高的生物组织为材料，如鸡的血细胞BDNA 不溶于酒精，且在 0.14 mol/L 的氯化钠溶液中析出C可以利用嫩肉粉把杂质多糖和 RNA 去除D洗涤剂可以瓦解细胞膜，从而获得含有 DNA 的滤液解析：选 C 鸡血细胞中含有 DNA，可作 为提取 DNA 的生物材料，不可选用哺乳动物成熟的红细胞；DNA 不溶于酒精，且 NaCl 溶液浓度为 0.14mol/L 时 DNA 溶解度最小，两者均可将 DNA 大量析出；嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶，可将蛋白质水解，
2、从而除去蛋白质；洗涤剂可以瓦解细胞膜，从而获得含有 DNA 的滤液。2“DNA 的粗提取与鉴定”实验中，提取鸡血细胞的核物质和析出含 DNA 的黏稠物这两步中都用到了蒸馏水，其作 用分别是( )A防止鸡血细胞失水皱缩和稀释 NaCl 溶液至 0.14 mol/L 使 DNA 析出B防止鸡血细胞失水皱缩和溶解 DNAC使鸡血细胞吸水涨破和稀释 NaCl 溶液至 0.14 mol/L 使 DNA 析出D使鸡血细胞吸水涨破和溶解 DNA解析：选 C 第一次加蒸馏水的目的是使鸡血细胞涨破， 释 放出核 DNA，第二次加蒸馏水的目的是将 NaCl 溶液浓 度降低到 0.14 mol/L，使 DNA 析出
3、。3某同学用洋葱进行 DNA 粗提取和鉴定实验，操作错误的是( )A加入洗涤剂后用力进行快速、充分地研磨B用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的 DNAC加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌D加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热解析：选 A 加入洗涤剂后，搅 拌动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤的操作；用蛋白酶分解过滤后的研磨液中的蛋白质，可纯化过滤后研磨液中的DNA；加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌的目的是保证 DNA 分子不断裂，保持其完整性；加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热才能出现颜色反应。4若从植物细胞中提取 DNA，发现实验效果不好，如看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时颜色反应不明显等。其 可能的原
4、因是( )植物细胞中不含 DNA 研磨不充分 过滤不充分 冷酒精的量过大A BC D解析：选 D 研磨不充分会使细胞核内的 DNA 释放不完全，提取的 DNA 量变少；过滤不充分也会导致提取的 DNA 量过少；若用于沉淀 DNA 的酒精量过少，也会导致 DNA 的沉淀量少，从而影响实验效果。5在“DNA 的粗提取与鉴定”实验中，如果实验材料是植物细胞，需要进行研磨并搅拌。下列相关说法正确的是( )A在切碎的植物材料中加入一定量的洗涤剂和蒸馏水，充分研磨后过滤获取滤液B加入洗涤剂是为了瓦解细胞膜和核膜C要快速搅拌产生泡沫以加速细胞膜的溶解D先加入洗涤剂，搅拌和研磨后再加入食盐解析：选 B 提取植
5、物材料中的 DNA 时，需在切碎的 组织中加入一定量的洗涤剂和食盐。加入洗涤剂的目的是瓦解细胞膜和核膜，以利于 DNA 的释 放，同时要进行充分地搅拌和研磨，使 DNA 完全释放。搅拌时应轻缓、柔和，避免产生大量泡沫，以利于后续操作。6下表是关于 DNA 的粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用的表述，正确的是( )选项 试剂 操作 作用A 柠檬酸钠溶液 与鸡血混合 有利于血液凝固B 蒸馏水 与鸡血细胞混合 保持细胞形状C 蒸馏水加入溶解有 DNA 的 NaCl 溶液中析出 DNA 丝状物D 冷却的酒精 加入过滤后的 NaCl 溶液中 产生特定的颜色反应解析：选 C 在 DNA 的粗提取
6、与鉴定实验中， 柠檬酸钠可以防止血液凝固；鸡血中加入蒸馏水可以使细胞膜和核膜破裂；DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同，在物质的量浓度为 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最低，有利于 DNA 析出；DNA 不溶于酒精，而蛋白质溶于冷却的酒精可以获得较纯的 DNA，DNA 遇二苯胺( 沸水浴加热)呈蓝色。7DNA 粗提取与鉴定实验中有以下过滤：过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液；过滤含黏稠物的 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液；过滤溶解有 DNA 的 2 mol/L 的 NaCl 溶液，以上过滤分别为了获得( )A含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含 DNA 的滤液
7、B含核物质的滤液、滤液中 DNA 黏稠物、含 DNA 的滤液C含核物质的滤液、滤液中 DNA 黏稠物、纱布上的 DNAD含较纯的 DNA 滤液、纱布上的黏稠物、含 DNA 的滤液解析：选 A 用蒸馏水稀释鸡血细胞液，使血 细胞的细胞膜、核膜破裂，释放出核物质，此时过滤只能得到含 DNA 和其他物质如蛋白质的滤液， 这 种滤液必须经过实验中其他步骤的相继处理，方能得到较纯的 DNA。DNA 在 0.14 mol/L NaCl 溶液中溶解度最低，呈 丝状黏稠物，经过滤留在纱布上。8下列关于“DNA 粗提取与鉴定实验 ”的叙述，正确的是( )A洗涤剂能瓦解细胞膜并增大 DNA 在 NaCl 溶液中的
8、溶解度B将 DNA 丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝C常温下菜花匀浆中有些酶类会影响 DNA 的提取D用玻璃棒缓慢搅拌滤液会导致 DNA 获得量减少解析：选 C 洗涤剂能瓦解细胞膜，但 对 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度无影响； DNA 丝状物需先溶解在适宜浓度的 NaCl 溶液中，然后加入二苯胺试剂，混合均匀后沸水浴加热，待冷却后观察到溶液变蓝；常温下菜花匀浆中有些水解酶可能会使 DNA 水解而影响 DNA的提取；用玻璃棒朝一个方向缓慢搅拌可减轻对 DNA 分子的破坏，有利于 DNA 分子的提取。9下列与析出 DNA 黏稠物有关的叙述，不正确的是( )A操作时缓缓滴加蒸馏水，降低
9、 DNA 的溶解度B在操作时，用玻璃棒轻缓搅拌，以保证 DNA 分子完整C加蒸馏水可同时降低 DNA 和蛋白质的溶解度，两者均可析出D当丝状黏稠物不再增加时， NaCl 溶液的物质的量浓度约等于 0.14 mol/L解 析 ：选 C 向 含 有 DNA 的 溶 液 中 加 入 蒸 馏 水 后 ，NaCl 溶 液 的 浓 度 会 变 小 ，当 NaCl 溶液 的 物 质 的 量 浓 度 为 0.14 mol/L 时 ，DNA 溶 解 度 最 小 ，而 此 时 蛋 白 质 溶 解 在 NaCl 溶 液 中 。10在利用鸡血进行“DNA 的粗提取与鉴定 ”的实验中，相关叙述正确的是( )A用蒸馏水将
10、 NaCl 溶液浓度调至 0.14 mol/L，滤去析出物B调节 NaCl 溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，可去除部分杂质C将丝状物溶解在 2 mol/L NaCl 溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色D用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同解析：选 B 用蒸馏水将 NaCl 溶液浓度调至 0.14 mol/L 后，过滤并收集析出物；利用二苯胺试剂鉴定 DNA 时，需沸水浴加 热几分钟，才呈蓝色；用菜花替代鸡血作为实验材料，需加入洗涤剂和食盐，并对材料 进行研磨。 调节 NaCl 溶液浓 度改变不同物质在其中的溶解度，加入木瓜蛋白酶分解蛋白质都可以去除部分杂质。二、非选择题11如图是“DNA 粗提
11、取与鉴定”相关实验步骤。请据图分析回答：(1)鸡血细胞是进行该实验较好的实验材料，这是因为_ 。从鸡血细胞中释放出核物质的处理方法是_。(2)图 A 表示释放核物质后进行过滤的过程，过滤后取_(填“滤液”或“析出物”) 进行下一步实验；图 B 表示的相关操作过程中，加入 2 mol/L NaCl 溶液的作用是_；图 C 表示在滤液中加入冷却的 95%的酒精，其目的是_。(3)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是 DNA，可滴加_溶液，结果丝状物被染成绿色。(4)图 D 中 a 试管为对照组，b 试管为实验组。a 试管现象_；b 试管现象_。在沸水中加热的目的是_，同时说明 DNA 对高温有较强的_
12、。a 试管在实验中的作用是_。b 试管中溶液颜色的变化程度主要与_有关。解析：图 A 表示释放核物质后 进行过滤的过程，纱布上的过滤物主要是细胞膜、核膜的碎片等杂质，而 DNA 主要存在于下面的 滤液中，所以过滤后应取滤液进行下一步实验。DNA 不溶于冷酒精，而其他一些物 质可以溶于冷酒精，从而可进一步提纯 DNA。甲基 绿为比较常用的细胞核染色剂，染色后 细胞核中染色体呈绿色，可以用来鉴定 DNA。答案：(1)鸡血细胞核中 DNA 含量丰富，材料易得 向鸡血细胞溶液中加入蒸馏水，并搅拌 (2)滤液 溶解 DNA 分子 提取杂质更少的 DNA(或去除脂溶性杂质) (3)甲基绿 (4)溶液不变蓝
13、 溶液变蓝 加快颜色反应速度 耐受性 对照 加入 DNA(丝状物)的多少12以下是有关 DNA 粗提取实验的阅读材料：A核酸极不稳定，在较为剧烈的化学、物理因素和酶的作用下很容易降解。但柠檬酸钠溶液对 DNA 具有 保护作用。BDNA 核蛋白在 1 mol/L NaCl 溶液中溶解度很高，但在 0.14 mol/L NaCl 溶液中的溶解度很低；而 RNA 核蛋白溶于 0.14 mol/L NaCl 溶液。C用苯酚处理，可使蛋白质变 性，且留在苯酚 层内；在 DNA 溶液中加入 2.5 倍体积、体积分数为 95%的酒精，可将 DNA 分离出来。DDNA 在强酸环境下，水解 产生脱氧核糖等小分子
14、物质 ，它与二苯胺酸性溶液反应，能生成蓝色化合物。E实验 材料与器械：柠檬酸钠溶液、石英砂、 0.14 mol/L NaCl 溶液、 1 mol/L NaCl 溶液、蒸馏水、苯酚、95%酒精、二苯胺试剂、浓硫酸、花椰菜、研钵、烧杯、漏斗、玻璃棒、量筒、石棉网、酒精灯、吸管、试管等。F实验步骤：研磨得匀浆过滤得滤液滤液稀释 6 倍离心处理得沉淀物沉淀物再溶解加苯酚静置后去上清液提取出 DNADNA 鉴定。请根据以上材料回答下列问题：(1)研磨时，取 10g 花椰菜，加适量的石英砂、_和_。(2)将滤液稀释 6 倍，其目的是_ 。(3)取沉淀物，置于 2 mL 1 mol/L NaCl 溶液中，使
15、 DNA 核蛋白再次溶解，再加 2 mL苯酚充分振荡后静置，待其分层后弃其上层的苯酚。该步骤的目的是除去_。(4)将剩余溶液中的 DNA 提取出来的方法是_。(5)证明提取物确实是 DNA 分子的方法是_。解析：(1)在研磨时加入少许石英砂是为了增大摩擦力，加快研磨的速度。加入 1 mol/L NaCl 溶液是为了溶解 DNA 核蛋白，而加入柠檬酸钠溶液是 为了保护 DNA 不被破坏。(2)在0.14 mol/L NaCl 溶液中，DNA 核蛋白的溶解度最低，所以要将 1 mol/L NaCl 溶液稀释，使DNA 核蛋白析出。(3) 前一步提取的是 DNA 核蛋白，而需要的是 DNA，因此需要
16、把 DNA 核蛋白进一步提纯。用苯酚处理，可使蛋白质变性，且留在苯酚层内，用这样的方法可以去除蛋白质。(4)根据 题中所给信息，在 DNA 溶液中加入 2.5 倍体 积、体积分数为 95%的酒精，可将 DNA 分离出来，可用玻璃棒 搅成团取出。(5)DNA 在强酸环境下，水解产生脱氧核糖等小分子物质。它与二苯胺酸性溶液反 应，能生成 蓝色化合物。用此种方法可以鉴定所提取的物质是否为 DNA。答案：(1)1 mol/L NaCl 溶液 柠檬酸钠溶液 (2)使 DNA 核蛋白的溶解度逐渐降低 (3)蛋白质 (4)向下层 DNA 溶液中加 2.5 倍体积、体积分数为 95%的酒精，并用玻璃棒沿一个方
17、向搅拌，在玻璃棒上的成团物即是 DNA (5)用适量的浓硫酸处理提取物，再滴加二苯胺酸性溶液试剂数滴，反应后有蓝色出现即可证明提取物是 DNA13如图表示以鸡血为实验材料进行 DNA 的粗提取与鉴定的操作程序，请分析回答下列问题： 破 碎 细 胞释 放 DNA 过滤 溶 解 细 胞 核内 的 DNA DNA的析 出一 二 三 四 再 溶 解 过 滤DNA的 初步 纯 化 DNA的 鉴 定五 六 七 八(1)步骤一中，向鸡血细胞液中加入_并搅拌，可使鸡血细胞破裂。(2)步骤二中，过滤后收集含有 DNA 的_。(3)步骤三、四的操作原理是_，步骤四通过向溶液中加入_调节 NaCl 溶液的物质的量浓
18、度至_mol/L 时，DNA 将会析出，过滤去除溶液中的杂质。(4)步骤七：向步骤六过滤后的_中，加入等体积的冷却的 _，静置 23 min，溶液中会出现_色丝状物，这就是粗提取的 DNA。(5)步骤八：DNA 遇_试剂，沸水浴 5 min，冷却后，溶液呈 _色。解析：破碎红细胞应用蒸馏水，使之吸水 涨破。 DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同，在 2 mol/L 的 NaCl 溶液中 DNA 溶解，在 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中 DNA 析出。可通过加入蒸馏水将 2 mol/L NaCl 溶液稀释为 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液使 DNA 析出。DNA不溶于冷酒精，遇二苯胺沸水浴加热呈蓝色。答案：(1)蒸馏水 (2) 滤液 (3)DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同，通过控制 NaCl 溶液的浓度去除杂质 蒸馏水 0.14 (4) 滤液 酒精 白 (5)二苯胺 蓝
