1、耳鼻咽喉科学专业优秀论文 头颈部鳞状细胞癌中表皮生长因子受体的表达、单核苷酸多态性及基因表达调控的初步研究关键词：头颈肿瘤 鳞状细胞癌 表皮生长因子 单核苷酸多态性 基因表达摘要：头颈部鳞状细胞癌（SCCHN）指发生于口腔、咽、喉、鼻腔、鼻窦、唾液腺、颈段气管及食管的鳞状细胞癌，其组织来源于上呼吸消化道的粘膜上皮细胞。2003 年统计 SCCHN 每年在世界范围内大约有 540，000 例新发病例，其中可造成 271，000 例死亡病例，死亡率超过 50。由于 SCCHN 具有局部浸润生长、易原位复发及远处转移的特点，目前其治疗仍然是一个富有挑战性的临床课题，其发病率及死亡率较高。虽然外科手术
2、、放射治疗及辅助化疗等治疗方法的综合应用在一定程度上提高 SCCHN 患者生存率，但大部分研究表明其晚期患者 5 年生存率仍仅在 30和 40之间。因此研究 SCCHN 发生过程中的分子生物学机制，对于 SCCHN 的早期诊断以及为 SCCHN 的治疗提供新靶点具有重要意义。表皮生长因子受体（EGFR）是一种分子量为 170 kDa 的糖蛋白，其编码基因位于染色体 7p12，包含 28 个外显子，属于 ErbB 受体家族。EGFR 的活化可以抑制细胞凋亡，促进细胞增殖和血管形成。其异常活化可导致细胞异常增殖及其他促进肿瘤增长的反应，并可增加肿瘤细胞恶性转移的潜能。研究表明在多种上皮源性肿瘤包括
3、 SCCHN 中均存在 EGFR 的表达异常，其中大部分表现为EGFR 的过表达，其表达可能与 SCCHN 的预后密切相关，因此 EGFR 基因被视为可能的 SCCHN 治疗的新靶点。因此，研究 SCCHN 中 EGFR 基因表达、关键外显子的突变或单核苷酸多态性与临床病理指标间的关系，并进一步分析其基因表达调控机制，有助于深入理解 SCCHN 发生的分子机制，对于 SCCHN 的分子靶向治疗有指导意义。本研利用 PCR 技术检测了中国 SCCHN 患者新鲜组织标本中EGFR 的表达改变，分析了 EGFR 表达与临床病理指标及预后的关系；通过 PCR及直接测序的方法证实在中国 SCCHN 患者
4、中存在 EGFR 外显子的单核苷酸多态现象，并分析了其与临床病理指标及预后的关系；克隆了人 EGFR 基因上游2875 bp 的启动调控区片段，利用瞬时转染、报道基因分析、缺失突变分析、RT-PCR、Western blot 等方法研究了该区域的启动子活性，并对该区域的顺式作用元件进行了初步分析。 1.研究目的研究头颈部鳞状细胞癌患者肿瘤组织中 EGFR 表达改变及其与临床病理指标及预后的关系。 研究方法 收集 96 例原发 SCCHN 肿瘤组织，并收集距肿瘤切缘 1 cm 以上部位的形态学正常的粘膜组织作为对照。 TRIzol 法分别提取肿瘤组织和正常粘膜组织中的总 RNA，反转录成 cDN
5、A。根据 EGFR 基因组序列合成 EGFR 特异性引物，以 5S RNA 为内参照，通过 PCR 检测肿瘤组织和正常粘膜组织中 EGFR 表达水平的差异。应用 SPSS13.0 统计学软件进行统计学分析。卡方统计分析 EGFR 表达与临床病理指标间的关系，非参数统计应用于不适用卡方统计者；Kaplan-Meier 生存率分析及 Cox 回归模型绘制生存率曲线并分析预后，无病生存期的计算采取自诊断之日起至明确证明发生局部复发、远处转移或死亡的时间。所有的统计分析均为双侧，取 Plt;0.05 为有统计学意义。 结果 在 96 例SCCHN 临床标本中，74 例（77.1）肿瘤组织对比其临近的形
6、态学正常的组织出现 EGFR 表达异常；其中 47 例（49.0）过表达，27 例（28.1）低表达。 EGFR 表达与性别、肿瘤大小（T 分期） 、颈部淋巴结转移（N 分期）及饮酒无关；与年龄、肿瘤的原发部位、组织分化程度、临床分期及吸烟有关。 EGFR 的过表达主要发生于年龄小于 60 岁的吸烟者、原发于口咽或喉咽部的肿瘤、中低分化的肿瘤及临床分期期的 SCCHN 患者。 生存率分析表明 EGFR 表达与 SCCHN 的预后无关，目前数据并不支持其作为 SCCHN 患者独立的预后因素。 结论 在 SCCHN 患者肿瘤组织中存在 EGFR 的表达异常。 过表达 EGFR 的 SCCHN 多原
7、发于喉咽及口咽部。 吸烟可能引起 EGFR 的表达增加。 EGFR 是 SCCHN 发生及发展过程中的重要影响因子，起到了癌蛋白的作用； 2.研究目的研究中国头颈部鳞状细胞癌患者 EGFR 基因第1821 号外显子中是否存在突变或单核苷酸多态现象，并进一步研究及其与临床病理指标及预后的关系。 研究方法 收集 96 例原发 SCCHN 肿瘤组织，并收集距肿瘤切缘 1cm 以上部位的形态学正常的粘膜组织作为对照。 提取肿瘤组织及正常粘膜组织中的基因组 DNA。根据 EGFR 基因第 18、19、20、21号外显子序列分别设计引物，进行 PCR 扩增，凝胶电泳回收上述四条外显子目的带，双向测序，检测
8、其是否存在基因突变或单核苷酸多态现象。 应用SPSS13.0 统计学软件进行统计学分析。两样本率的比较采用 u 检验；卡方统计分析测序结果临床病理指标间的关系，非参数统计应用于不适用卡方统计者；Kaplan-Meier 生存率分析及 Cox 回归模型绘制生存率曲线并分析预后，无病生存期的计算采取自诊断之日起至明确证明发生局部复发、远处转移或死亡的时间。 结果 对 EGFR 基因 1821 号外显子的 DNA 测序表明，在中国SCCHN 患者中 EGFR 基因 1821 号外显子未发现明显突变；22 例（22.9）患者的 20 号外显子存在单核苷酸多态性（SNP） ，其第 78 号位点的鸟嘌呤（
9、G）被腺嘌呤（A）取代。密码由 CAG 变为 CAA，相应的氨基酸（谷氨酰胺）并没有改变。这表明这是一个同义的单核甘酸多态（sSNP） 。 上述 22 例患者 EGFR基因 20 号外显子单核苷酸多态均为 G/A 杂合。 中国 SCCHN 患者中 EGFR 基因 20 号外显子 G/A 杂合 sSNP 出现率与 GeneBank 正常亚洲人的数据之间有统计学差异。 G/A 杂合 sSNP 与组织分化程度、局部淋巴结转移无关，而与原发部位、T 分期及临床分期有关。 G/A 杂合 sSNP 主要存在于 T12、临床分期期及原发于喉咽的 SCCHN 中。 该 sSNP 与 EGFR 的表达无明显相关
10、性。 生存率分析表明 G/A 杂合患者与 G/G 纯合患者的生存期差异无统计学意义，目前的数据不能支持该 sSNP 为 SCCNH 独立的预后因素。 结论 中国 SCCHN 患者中 EGFR 基因 1821 号外显子发生突变的概率较低。 中国 SCCHN 患者中 EGFR 基因 20 号外显子第 78 号位点 G/A 杂合 sSNP 的发生率高于健康人群。 EGFR 基因 20 号外显子第 78 位的 sSNP 可能成为一个有效的预测 SCCHN，尤其是喉咽部鳞状细胞癌临床过程的指标。 EGFR 基因 20 号外显子第 78 位的 sSNP 与 EGFR 的表达无关。 目前的数据并不支持且 E
11、GFR基因 20 号外显子 sSNP 是中国 SCCHN 患者无病生存率的独立的预后因素。 3.研究目的克隆人 EGFR 基因 5上游 2875 bp 的启动调控区片段，对该区域可能存在的功能性顺式作用元件进行初步分析。 研究方法 提取人基因组 DNA，PCR 扩增 EGFR 基因 5上游 2875 bp（-2644+231bp）启动调控区序列，插入 pGL3-Basic，构建 EGFR 基因启动调控区.荧光素酶报道基因表达载体 pGL3-EGFR-2875，酶切鉴定和测序分析证实插入片段是否正确。 pGL3-EGFR-2875 瞬时转染喉癌细胞株 Hep-2，荧光素酶报道基因分析检测启动子活
12、性。将 C/EBP 等蛋白因子表达载体与 pGL3-EGFR-2875 共转染 Hep-2 细胞，报道基因分析观察 C/EBP 等蛋白因子对启动子活性的影响。 应用 RT-PCR 和 Western blot 技术验证 C/EBP 等蛋白因子的作用。 在 pGL3-EGFR-2875 基础上构建了 3 个较大范围的 5缺失突变体，与 C/EBP 表达载体共转染 Hep-2 细胞，报道基因分析观察缺失突变对启动子活性的影响，并分析C/EBP 表达载体可能的作用区域。 结果 构建了较大范围的 EGFR 基因 5上游启动调控区重组质粒 pGL3-EGFR-2875，酶切鉴定及 DNA 测序结果正确。
13、 pGL3-EGFR-2875 在 Hep-2 细胞呈现很强的启动子活性。 共转染实验结果显示 C/EBP 的表达载体明显抑制 EGFR 启动子活性，RT-PCR 和Western blot 进一步证实 C/EBP 对 EGFR 表达的抑制作用。 pGL3-EGFR-2875 的缺失突变分析显示，C/EBP 表达载体的作用区域可能位于-618+231 bp 内。 -1619-871 bp 区域的缺失可导致启动子活性下降 72，说明该区域可能存在功能性正调控元件。 结论 正确克隆了人 EGFR 基因上游2875 bp（-2644+231 bp）的启动调控区片段。 该 2875 bp 片段在喉癌H
14、ep-2 细胞中呈现了很强的启动子活性。 外源性 C/EBP 过表达明显抑制EGFR 启动子活性，并在 mRNA 和蛋白水平抑制 EGFR 表达，其抑制作用呈剂量依赖性。 C/EBP 的作用区域可能位于-618+231 bp 内。 EGFR 基因启动调控区-1619-871 bp 区域可能存在功能性正调控元件。正文内容头颈部鳞状细胞癌（SCCHN）指发生于口腔、咽、喉、鼻腔、鼻窦、唾液腺、颈段气管及食管的鳞状细胞癌，其组织来源于上呼吸消化道的粘膜上皮细胞。2003 年统计 SCCHN 每年在世界范围内大约有 540，000 例新发病例，其中可造成 271，000 例死亡病例，死亡率超过 50。
15、由于 SCCHN 具有局部浸润生长、易原位复发及远处转移的特点，目前其治疗仍然是一个富有挑战性的临床课题，其发病率及死亡率较高。虽然外科手术、放射治疗及辅助化疗等治疗方法的综合应用在一定程度上提高 SCCHN 患者生存率，但大部分研究表明其晚期患者 5年生存率仍仅在 30和 40之间。因此研究 SCCHN 发生过程中的分子生物学机制，对于 SCCHN 的早期诊断以及为 SCCHN 的治疗提供新靶点具有重要意义。表皮生长因子受体（EGFR）是一种分子量为 170 kDa 的糖蛋白，其编码基因位于染色体 7p12，包含 28 个外显子，属于 ErbB 受体家族。EGFR 的活化可以抑制细胞凋亡，促
16、进细胞增殖和血管形成。其异常活化可导致细胞异常增殖及其他促进肿瘤增长的反应，并可增加肿瘤细胞恶性转移的潜能。研究表明在多种上皮源性肿瘤包括 SCCHN 中均存在 EGFR 的表达异常，其中大部分表现为 EGFR 的过表达，其表达可能与 SCCHN 的预后密切相关，因此 EGFR 基因被视为可能的SCCHN 治疗的新靶点。因此，研究 SCCHN 中 EGFR 基因表达、关键外显子的突变或单核苷酸多态性与临床病理指标间的关系，并进一步分析其基因表达调控机制，有助于深入理解 SCCHN 发生的分子机制，对于 SCCHN 的分子靶向治疗有指导意义。本研利用 PCR 技术检测了中国 SCCHN 患者新鲜
17、组织标本中 EGFR 的表达改变，分析了 EGFR 表达与临床病理指标及预后的关系；通过 PCR 及直接测序的方法证实在中国 SCCHN 患者中存在 EGFR 外显子的单核苷酸多态现象，并分析了其与临床病理指标及预后的关系；克隆了人 EGFR 基因上游 2875 bp 的启动调控区片段，利用瞬时转染、报道基因分析、缺失突变分析、RT-PCR、Western blot 等方法研究了该区域的启动子活性，并对该区域的顺式作用元件进行了初步分析。 1.研究目的研究头颈部鳞状细胞癌患者肿瘤组织中 EGFR 表达改变及其与临床病理指标及预后的关系。 研究方法 收集96 例原发 SCCHN 肿瘤组织，并收集
18、距肿瘤切缘 1 cm 以上部位的形态学正常的粘膜组织作为对照。 TRIzol 法分别提取肿瘤组织和正常粘膜组织中的总RNA，反转录成 cDNA。根据 EGFR 基因组序列合成 EGFR 特异性引物，以 5S RNA为内参照，通过 PCR 检测肿瘤组织和正常粘膜组织中 EGFR 表达水平的差异。 应用 SPSS13.0 统计学软件进行统计学分析。卡方统计分析 EGFR 表达与临床病理指标间的关系，非参数统计应用于不适用卡方统计者；Kaplan-Meier 生存率分析及 Cox 回归模型绘制生存率曲线并分析预后，无病生存期的计算采取自诊断之日起至明确证明发生局部复发、远处转移或死亡的时间。所有的统
19、计分析均为双侧，取 Plt;0.05 为有统计学意义。 结果 在 96 例SCCHN 临床标本中，74 例（77.1）肿瘤组织对比其临近的形态学正常的组织出现 EGFR 表达异常；其中 47 例（49.0）过表达，27 例（28.1）低表达。 EGFR 表达与性别、肿瘤大小（T 分期） 、颈部淋巴结转移（N 分期）及饮酒无关；与年龄、肿瘤的原发部位、组织分化程度、临床分期及吸烟有关。 EGFR 的过表达主要发生于年龄小于 60 岁的吸烟者、原发于口咽或喉咽部的肿瘤、中低分化的肿瘤及临床分期期的 SCCHN 患者。 生存率分析表明 EGFR 表达与 SCCHN 的预后无关，目前数据并不支持其作为
20、 SCCHN 患者独立的预后因素。 结论 在 SCCHN 患者肿瘤组织中存在 EGFR 的表达异常。 过表达 EGFR 的 SCCHN 多原发于喉咽及口咽部。 吸烟可能引起 EGFR 的表达增加。 EGFR 是 SCCHN 发生及发展过程中的重要影响因子，起到了癌蛋白的作用； 2.研究目的研究中国头颈部鳞状细胞癌患者 EGFR 基因第1821 号外显子中是否存在突变或单核苷酸多态现象，并进一步研究及其与临床病理指标及预后的关系。 研究方法 收集 96 例原发 SCCHN 肿瘤组织，并收集距肿瘤切缘 1cm 以上部位的形态学正常的粘膜组织作为对照。 提取肿瘤组织及正常粘膜组织中的基因组 DNA。
21、根据 EGFR 基因第 18、19、20、21号外显子序列分别设计引物，进行 PCR 扩增，凝胶电泳回收上述四条外显子目的带，双向测序，检测其是否存在基因突变或单核苷酸多态现象。 应用SPSS13.0 统计学软件进行统计学分析。两样本率的比较采用 u 检验；卡方统计分析测序结果临床病理指标间的关系，非参数统计应用于不适用卡方统计者；Kaplan-Meier 生存率分析及 Cox 回归模型绘制生存率曲线并分析预后，无病生存期的计算采取自诊断之日起至明确证明发生局部复发、远处转移或死亡的时间。 结果 对 EGFR 基因 1821 号外显子的 DNA 测序表明，在中国SCCHN 患者中 EGFR 基
22、因 1821 号外显子未发现明显突变；22 例（22.9）患者的 20 号外显子存在单核苷酸多态性（SNP） ，其第 78 号位点的鸟嘌呤（G）被腺嘌呤（A）取代。密码由 CAG 变为 CAA，相应的氨基酸（谷氨酰胺）并没有改变。这表明这是一个同义的单核甘酸多态（sSNP） 。 上述 22 例患者 EGFR基因 20 号外显子单核苷酸多态均为 G/A 杂合。 中国 SCCHN 患者中 EGFR 基因 20 号外显子 G/A 杂合 sSNP 出现率与 GeneBank 正常亚洲人的数据之间有统计学差异。 G/A 杂合 sSNP 与组织分化程度、局部淋巴结转移无关，而与原发部位、T 分期及临床分期
23、有关。 G/A 杂合 sSNP 主要存在于 T12、临床分期期及原发于喉咽的 SCCHN 中。 该 sSNP 与 EGFR 的表达无明显相关性。 生存率分析表明 G/A 杂合患者与 G/G 纯合患者的生存期差异无统计学意义，目前的数据不能支持该 sSNP 为 SCCNH 独立的预后因素。 结论 中国 SCCHN 患者中 EGFR 基因 1821 号外显子发生突变的概率较低。 中国 SCCHN 患者中 EGFR 基因 20 号外显子第 78 号位点 G/A 杂合 sSNP 的发生率高于健康人群。 EGFR 基因 20 号外显子第 78 位的 sSNP 可能成为一个有效的预测 SCCHN，尤其是喉
24、咽部鳞状细胞癌临床过程的指标。 EGFR 基因 20 号外显子第 78 位的 sSNP 与 EGFR 的表达无关。 目前的数据并不支持且 EGFR基因 20 号外显子 sSNP 是中国 SCCHN 患者无病生存率的独立的预后因素。 3.研究目的克隆人 EGFR 基因 5上游 2875 bp 的启动调控区片段，对该区域可能存在的功能性顺式作用元件进行初步分析。 研究方法 提取人基因组 DNA，PCR 扩增 EGFR 基因 5上游 2875 bp（-2644+231bp）启动调控区序列，插入 pGL3-Basic，构建 EGFR 基因启动调控区.荧光素酶报道基因表达载体 pGL3-EGFR-287
25、5，酶切鉴定和测序分析证实插入片段是否正确。 pGL3-EGFR-2875 瞬时转染喉癌细胞株 Hep-2，荧光素酶报道基因分析检测启动子活性。将 C/EBP 等蛋白因子表达载体与 pGL3-EGFR-2875 共转染 Hep-2 细胞，报道基因分析观察 C/EBP 等蛋白因子对启动子活性的影响。 应用 RT-PCR 和 Western blot 技术验证 C/EBP 等蛋白因子的作用。 在 pGL3-EGFR-2875 基础上构建了 3 个较大范围的 5缺失突变体，与 C/EBP 表达载体共转染 Hep-2 细胞，报道基因分析观察缺失突变对启动子活性的影响，并分析C/EBP 表达载体可能的作
26、用区域。 结果 构建了较大范围的 EGFR 基因 5上游启动调控区重组质粒 pGL3-EGFR-2875，酶切鉴定及 DNA 测序结果正确。 pGL3-EGFR-2875 在 Hep-2 细胞呈现很强的启动子活性。 共转染实验结果显示 C/EBP 的表达载体明显抑制 EGFR 启动子活性，RT-PCR 和Western blot 进一步证实 C/EBP 对 EGFR 表达的抑制作用。 pGL3-EGFR-2875 的缺失突变分析显示，C/EBP 表达载体的作用区域可能位于-618+231 bp 内。 -1619-871 bp 区域的缺失可导致启动子活性下降 72，说明该区域可能存在功能性正调控
27、元件。 结论 正确克隆了人 EGFR 基因上游2875 bp（-2644+231 bp）的启动调控区片段。 该 2875 bp 片段在喉癌Hep-2 细胞中呈现了很强的启动子活性。 外源性 C/EBP 过表达明显抑制EGFR 启动子活性，并在 mRNA 和蛋白水平抑制 EGFR 表达，其抑制作用呈剂量依赖性。 C/EBP 的作用区域可能位于-618+231 bp 内。 EGFR 基因启动调控区-1619-871 bp 区域可能存在功能性正调控元件。头颈部鳞状细胞癌（SCCHN）指发生于口腔、咽、喉、鼻腔、鼻窦、唾液腺、颈段气管及食管的鳞状细胞癌，其组织来源于上呼吸消化道的粘膜上皮细胞。2003
28、 年统计 SCCHN 每年在世界范围内大约有 540，000 例新发病例，其中可造成 271，000 例死亡病例，死亡率超过 50。由于 SCCHN 具有局部浸润生长、易原位复发及远处转移的特点，目前其治疗仍然是一个富有挑战性的临床课题，其发病率及死亡率较高。虽然外科手术、放射治疗及辅助化疗等治疗方法的综合应用在一定程度上提高 SCCHN 患者生存率，但大部分研究表明其晚期患者 5年生存率仍仅在 30和 40之间。因此研究 SCCHN 发生过程中的分子生物学机制，对于 SCCHN 的早期诊断以及为 SCCHN 的治疗提供新靶点具有重要意义。表皮生长因子受体（EGFR）是一种分子量为 170 k
29、Da 的糖蛋白，其编码基因位于染色体 7p12，包含 28 个外显子，属于 ErbB 受体家族。EGFR 的活化可以抑制细胞凋亡，促进细胞增殖和血管形成。其异常活化可导致细胞异常增殖及其他促进肿瘤增长的反应，并可增加肿瘤细胞恶性转移的潜能。研究表明在多种上皮源性肿瘤包括 SCCHN 中均存在 EGFR 的表达异常，其中大部分表现为 EGFR 的过表达，其表达可能与 SCCHN 的预后密切相关，因此 EGFR 基因被视为可能的SCCHN 治疗的新靶点。因此，研究 SCCHN 中 EGFR 基因表达、关键外显子的突变或单核苷酸多态性与临床病理指标间的关系，并进一步分析其基因表达调控机制，有助于深入
30、理解 SCCHN 发生的分子机制，对于 SCCHN 的分子靶向治疗有指导意义。本研利用 PCR 技术检测了中国 SCCHN 患者新鲜组织标本中 EGFR 的表达改变，分析了 EGFR 表达与临床病理指标及预后的关系；通过 PCR 及直接测序的方法证实在中国 SCCHN 患者中存在 EGFR 外显子的单核苷酸多态现象，并分析了其与临床病理指标及预后的关系；克隆了人 EGFR 基因上游 2875 bp 的启动调控区片段，利用瞬时转染、报道基因分析、缺失突变分析、RT-PCR、Western blot 等方法研究了该区域的启动子活性，并对该区域的顺式作用元件进行了初步分析。 1.研究目的研究头颈部鳞
31、状细胞癌患者肿瘤组织中 EGFR 表达改变及其与临床病理指标及预后的关系。 研究方法 收集96 例原发 SCCHN 肿瘤组织，并收集距肿瘤切缘 1 cm 以上部位的形态学正常的粘膜组织作为对照。 TRIzol 法分别提取肿瘤组织和正常粘膜组织中的总RNA，反转录成 cDNA。根据 EGFR 基因组序列合成 EGFR 特异性引物，以 5S RNA为内参照，通过 PCR 检测肿瘤组织和正常粘膜组织中 EGFR 表达水平的差异。 应用 SPSS13.0 统计学软件进行统计学分析。卡方统计分析 EGFR 表达与临床病理指标间的关系，非参数统计应用于不适用卡方统计者；Kaplan-Meier 生存率分析
32、及 Cox 回归模型绘制生存率曲线并分析预后，无病生存期的计算采取自诊断之日起至明确证明发生局部复发、远处转移或死亡的时间。所有的统计分析均为双侧，取 Plt;0.05 为有统计学意义。 结果 在 96 例SCCHN 临床标本中，74 例（77.1）肿瘤组织对比其临近的形态学正常的组织出现 EGFR 表达异常；其中 47 例（49.0）过表达，27 例（28.1）低表达。 EGFR 表达与性别、肿瘤大小（T 分期） 、颈部淋巴结转移（N 分期）及饮酒无关；与年龄、肿瘤的原发部位、组织分化程度、临床分期及吸烟有关。 EGFR 的过表达主要发生于年龄小于 60 岁的吸烟者、原发于口咽或喉咽部的肿瘤
33、、中低分化的肿瘤及临床分期期的 SCCHN 患者。 生存率分析表明 EGFR 表达与 SCCHN 的预后无关，目前数据并不支持其作为 SCCHN 患者独立的预后因素。 结论 在 SCCHN 患者肿瘤组织中存在 EGFR 的表达异常。 过表达 EGFR 的 SCCHN 多原发于喉咽及口咽部。 吸烟可能引起 EGFR 的表达增加。 EGFR 是 SCCHN 发生及发展过程中的重要影响因子，起到了癌蛋白的作用； 2.研究目的研究中国头颈部鳞状细胞癌患者 EGFR 基因第1821 号外显子中是否存在突变或单核苷酸多态现象，并进一步研究及其与临床病理指标及预后的关系。 研究方法 收集 96 例原发 SC
34、CHN 肿瘤组织，并收集距肿瘤切缘 1cm 以上部位的形态学正常的粘膜组织作为对照。 提取肿瘤组织及正常粘膜组织中的基因组 DNA。根据特别提醒 ：正文内容由 PDF 文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 http:/ 。如还不能显示，可以联系我 q q 1627550258 ，提供原格式文档。我们还可提供代笔服务，价格优惠，服务周到，包您通过。“垐垯櫃 换烫梯葺铑?endstreamendobj2x 滌甸?*U 躆 跦?l, 墀 VGi?o 嫅#4K 錶 c#x 刔 彟 2Z 皙笜?D 剧珞 H 鏋 Kx 時 k,褝仆? 稀?i 攸闥-) 荮
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