1、人体解剖与组织胚胎学专业优秀论文 促红细胞生成素对窒息新生大鼠脑促凋亡蛋白 Omi/HtrA2 表达的影响关键词：神经元生理 细胞凋亡 促红细胞素 蛋白激活摘要：目的：探讨新生大鼠窒息后不同时间点脑组织促凋亡蛋白 0mi/HtrA2 表达和神经元凋亡的动态变化及重组人促红细胞生成素（rhEPO）早期干预的影响。方法：动物模型制备：7 日龄新生 SD 大鼠 144 只，随机分为对照组、窒息组和 rhEPO 干预组，每组各 48 只。将新生大鼠分别置于容积为 55mL 的缺氧瓶中（内装 0005kg 钠石灰） ，待动物安静后，窒息组及 rhEPO 干预组塞紧瓶塞，开始缺氧窒息 30min。对照组模
2、拟此过程不塞瓶塞（不做缺氧处理） ，窒息后各组放回笼中，仍由母鼠哺乳喂养。rhEPO 干预组造模后即刻腹腔内注射50%rhEPO（5000IU/kg） ，对照组和窒息组造模后腹腔内注射等体积生理盐水。早期神经行为能力检查：分别于窒息前及造模后 2h 对每只大鼠进行翻身能力、夹尾尖叫测试。组织标本的制备：各组新生大鼠于窒息后不同时间点（2h、6h、12h、24h、48h、72h）处死，取脑组织经 4%多聚甲醛固定后石蜡包埋，经海马冠状面切片（片厚 4m） 。 结果：神经行为学结果：造模前每只大鼠均做翻身能力、夹尾尖叫测定，144 全部正常。缺氧后 2h 对照组测定结果同前。经历缺氧窒息的 96
3、只大鼠，45 只不能翻身，52 只出现夹尾不叫，32只表现不能翻身和夹尾不叫同时存在。病理形态学观察：HE 染色光镜下组织形态学改变：对照组脑组织结构及细胞层次清楚，未见水肿和变性坏死的神经元，神经元之间散在分布神经胶质细胞。神经细胞体积较大，核大而圆，位于细胞中央，染色浅，核仁、核膜清晰，胞质染色均匀，尼氏体呈密集分布的细小颗粒状，部分细胞突起可见，海马区锥体细胞排列规则，神经细胞形态结构正常。窒息组见炎细胞浸润，细胞水肿，毛细血管周围间隙增宽，细胞体积变小，胞体收缩呈多角形或不规则形，胞浆浓缩，染为深蓝色，核固缩深染，结构不清等改变。rhEPO 干预组脑组织炎症病变、细胞凋亡改变均较窒息组
4、减轻。0mi/HtrA2 蛋白表达情况：0mi/HtrA2 阳性细胞呈棕黄色，染色主要位于神经细胞胞质及突起中，对照组 0mi/HtrA2 蛋白少量表达，且各时间点表达差异无显著性（Pgt;005） ，窒息后 2h 表达即增强，12h 达峰，然后逐渐下降，而 rhEPO 干预组 0mi/HtrA2 蛋白表达与同一时点窒息组相比明显降低，差异有显著性（Plt;005） ，但二者 72h 仍高于对照组（Plt;005） 。细胞凋亡结果：TUNEL 染色凋亡神经细胞核呈棕褐色，染色质聚集核周呈新月形或块状小体及核固缩的凋亡小体。对照组脑组织神经细胞排列整齐，偶见阳性细胞，且在各个时间点无明显差异（P
5、gt;005） 。窒息 6h 组脑组织凋亡细胞即较对照组增加，24 h 组显著增高并达高峰，然后逐渐下降，但 72h 仍高于对照组（Plt;005） 。rhEPO 干预组与窒息组相比脑组织凋亡细胞数在各个时间点均明显减少，尤其在 24h 最明显（Plt;005） 。 结论：通过对新生鼠窒息后神经行为能力观察及脑组织病理学检查，证实新生鼠窒息模型制作成功。新生鼠窒息可导致其脑组织神经元凋亡增加，其机制可能与 0mi/HtrA2 蛋白激活有关。3rhEPO 可减少窒息所致新生鼠大脑神经细胞的凋亡数量，其机制可能与 rhEPO 抑制脑组织 0mi/HtrA2 蛋白表达有关。正文内容目的：探讨新生大鼠
6、窒息后不同时间点脑组织促凋亡蛋白 0mi/HtrA2 表达和神经元凋亡的动态变化及重组人促红细胞生成素（rhEPO）早期干预的影响。 方法：动物模型制备：7 日龄新生 SD 大鼠 144 只，随机分为对照组、窒息组和 rhEPO 干预组，每组各 48 只。将新生大鼠分别置于容积为 55mL 的缺氧瓶中（内装 0005kg 钠石灰） ，待动物安静后，窒息组及 rhEPO 干预组塞紧瓶塞，开始缺氧窒息 30min。对照组模拟此过程不塞瓶塞（不做缺氧处理） ，窒息后各组放回笼中，仍由母鼠哺乳喂养。rhEPO 干预组造模后即刻腹腔内注射50%rhEPO（5000IU/kg） ，对照组和窒息组造模后腹腔
7、内注射等体积生理盐水。早期神经行为能力检查：分别于窒息前及造模后 2h 对每只大鼠进行翻身能力、夹尾尖叫测试。组织标本的制备：各组新生大鼠于窒息后不同时间点（2h、6h、12h、24h、48h、72h）处死，取脑组织经 4%多聚甲醛固定后石蜡包埋，经海马冠状面切片（片厚 4m） 。 结果：神经行为学结果：造模前每只大鼠均做翻身能力、夹尾尖叫测定，144 全部正常。缺氧后 2h 对照组测定结果同前。经历缺氧窒息的 96 只大鼠，45 只不能翻身，52 只出现夹尾不叫，32只表现不能翻身和夹尾不叫同时存在。病理形态学观察：HE 染色光镜下组织形态学改变：对照组脑组织结构及细胞层次清楚，未见水肿和变
8、性坏死的神经元，神经元之间散在分布神经胶质细胞。神经细胞体积较大，核大而圆，位于细胞中央，染色浅，核仁、核膜清晰，胞质染色均匀，尼氏体呈密集分布的细小颗粒状，部分细胞突起可见，海马区锥体细胞排列规则，神经细胞形态结构正常。窒息组见炎细胞浸润，细胞水肿，毛细血管周围间隙增宽，细胞体积变小，胞体收缩呈多角形或不规则形，胞浆浓缩，染为深蓝色，核固缩深染，结构不清等改变。rhEPO 干预组脑组织炎症病变、细胞凋亡改变均较窒息组减轻。0mi/HtrA2 蛋白表达情况：0mi/HtrA2 阳性细胞呈棕黄色，染色主要位于神经细胞胞质及突起中，对照组 0mi/HtrA2 蛋白少量表达，且各时间点表达差异无显著
9、性（Pgt;005） ，窒息后 2h 表达即增强，12h 达峰，然后逐渐下降，而 rhEPO 干预组 0mi/HtrA2 蛋白表达与同一时点窒息组相比明显降低，差异有显著性（Plt;005） ，但二者 72h 仍高于对照组（Plt;005） 。细胞凋亡结果：TUNEL 染色凋亡神经细胞核呈棕褐色，染色质聚集核周呈新月形或块状小体及核固缩的凋亡小体。对照组脑组织神经细胞排列整齐，偶见阳性细胞，且在各个时间点无明显差异（Pgt;005） 。窒息 6h 组脑组织凋亡细胞即较对照组增加，24 h 组显著增高并达高峰，然后逐渐下降，但 72h 仍高于对照组（Plt;005） 。rhEPO 干预组与窒息组
10、相比脑组织凋亡细胞数在各个时间点均明显减少，尤其在 24h 最明显（Plt;005） 。 结论：通过对新生鼠窒息后神经行为能力观察及脑组织病理学检查，证实新生鼠窒息模型制作成功。新生鼠窒息可导致其脑组织神经元凋亡增加，其机制可能与 0mi/HtrA2 蛋白激活有关。3rhEPO 可减少窒息所致新生鼠大脑神经细胞的凋亡数量，其机制可能与 rhEPO 抑制脑组织 0mi/HtrA2 蛋白表达有关。目的：探讨新生大鼠窒息后不同时间点脑组织促凋亡蛋白 0mi/HtrA2 表达和神经元凋亡的动态变化及重组人促红细胞生成素（rhEPO）早期干预的影响。 方法：动物模型制备：7 日龄新生 SD 大鼠 144
11、 只，随机分为对照组、窒息组和 rhEPO 干预组，每组各 48 只。将新生大鼠分别置于容积为 55mL 的缺氧瓶中（内装 0005kg 钠石灰） ，待动物安静后，窒息组及 rhEPO 干预组塞紧瓶塞，开始缺氧窒息 30min。对照组模拟此过程不塞瓶塞（不做缺氧处理） ，窒息后各组放回笼中，仍由母鼠哺乳喂养。rhEPO 干预组造模后即刻腹腔内注射50%rhEPO（5000IU/kg） ，对照组和窒息组造模后腹腔内注射等体积生理盐水。早期神经行为能力检查：分别于窒息前及造模后 2h 对每只大鼠进行翻身能力、夹尾尖叫测试。组织标本的制备：各组新生大鼠于窒息后不同时间点（2h、6h、12h、24h、
12、48h、72h）处死，取脑组织经 4%多聚甲醛固定后石蜡包埋，经海马冠状面切片（片厚 4m） 。 结果：神经行为学结果：造模前每只大鼠均做翻身能力、夹尾尖叫测定，144 全部正常。缺氧后 2h 对照组测定结果同前。经历缺氧窒息的 96 只大鼠，45 只不能翻身，52 只出现夹尾不叫，32只表现不能翻身和夹尾不叫同时存在。病理形态学观察：HE 染色光镜下组织形态学改变：对照组脑组织结构及细胞层次清楚，未见水肿和变性坏死的神经元，神经元之间散在分布神经胶质细胞。神经细胞体积较大，核大而圆，位于细胞中央，染色浅，核仁、核膜清晰，胞质染色均匀，尼氏体呈密集分布的细小颗粒状，部分细胞突起可见，海马区锥体
13、细胞排列规则，神经细胞形态结构正常。窒息组见炎细胞浸润，细胞水肿，毛细血管周围间隙增宽，细胞体积变小，胞体收缩呈多角形或不规则形，胞浆浓缩，染为深蓝色，核固缩深染，结构不清等改变。rhEPO 干预组脑组织炎症病变、细胞凋亡改变均较窒息组减轻。0mi/HtrA2 蛋白表达情况：0mi/HtrA2 阳性细胞呈棕黄色，染色主要位于神经细胞胞质及突起中，对照组 0mi/HtrA2 蛋白少量表达，且各时间点表达差异无显著性（Pgt;005） ，窒息后 2h 表达即增强，12h 达峰，然后逐渐下降，而 rhEPO 干预组 0mi/HtrA2 蛋白表达与同一时点窒息组相比明显降低，差异有显著性（Plt;00
14、5） ，但二者 72h 仍高于对照组（Plt;005） 。细胞凋亡结果：TUNEL 染色凋亡神经细胞核呈棕褐色，染色质聚集核周呈新月形或块状小体及核固缩的凋亡小体。对照组脑组织神经细胞排列整齐，偶见阳性细胞，且在各个时间点无明显差异（Pgt;005） 。窒息 6h 组脑组织凋亡细胞即较对照组增加，24 h 组显著增高并达高峰，然后逐渐下降，但 72h 仍高于对照组（Plt;005） 。rhEPO 干预组与窒息组相比脑组织凋亡细胞数在各个时间点均明显减少，尤其在 24h 最明显（Plt;005） 。 结论：通过对新生鼠窒息后神经行为能力观察及脑组织病理学检查，证实新生鼠窒息模型制作成功。新生鼠窒
15、息可导致其脑组织神经元凋亡增加，其机制可能与 0mi/HtrA2 蛋白激活有关。3rhEPO 可减少窒息所致新生鼠大脑神经细胞的凋亡数量，其机制可能与 rhEPO 抑制脑组织 0mi/HtrA2 蛋白表达有关。目的：探讨新生大鼠窒息后不同时间点脑组织促凋亡蛋白 0mi/HtrA2 表达和神经元凋亡的动态变化及重组人促红细胞生成素（rhEPO）早期干预的影响。 方法：动物模型制备：7 日龄新生 SD 大鼠 144 只，随机分为对照组、窒息组和 rhEPO 干预组，每组各 48 只。将新生大鼠分别置于容积为 55mL 的缺氧瓶中（内装 0005kg 钠石灰） ，待动物安静后，窒息组及 rhEPO
16、干预组塞紧瓶塞，开始缺氧窒息 30min。对照组模拟此过程不塞瓶塞（不做缺氧处理） ，窒息后各组放回笼中，仍由母鼠哺乳喂养。rhEPO 干预组造模后即刻腹腔内注射50%rhEPO（5000IU/kg） ，对照组和窒息组造模后腹腔内注射等体积生理盐水。早期神经行为能力检查：分别于窒息前及造模后 2h 对每只大鼠进行翻身能力、夹尾尖叫测试。组织标本的制备：各组新生大鼠于窒息后不同时间点（2h、6h、12h、24h、48h、72h）处死，取脑组织经 4%多聚甲醛固定后石蜡包埋，经海马冠状面切片（片厚 4m） 。 结果：神经行为学结果：造模前每只大鼠均做翻身能力、夹尾尖叫测定，144 全部正常。缺氧后
17、 2h 对照组测定结果同前。经历缺氧窒息的 96 只大鼠，45 只不能翻身，52 只出现夹尾不叫，32只表现不能翻身和夹尾不叫同时存在。病理形态学观察：HE 染色光镜下组织形态学改变：对照组脑组织结构及细胞层次清楚，未见水肿和变性坏死的神经元，神经元之间散在分布神经胶质细胞。神经细胞体积较大，核大而圆，位于细胞中央，染色浅，核仁、核膜清晰，胞质染色均匀，尼氏体呈密集分布的细小颗粒状，部分细胞突起可见，海马区锥体细胞排列规则，神经细胞形态结构正常。窒息组见炎细胞浸润，细胞水肿，毛细血管周围间隙增宽，细胞体积变小，胞体收缩呈多角形或不规则形，胞浆浓缩，染为深蓝色，核固缩深染，结构不清等改变。rhE
18、PO 干预组脑组织炎症病变、细胞凋亡改变均较窒息组减轻。0mi/HtrA2 蛋白表达情况：0mi/HtrA2 阳性细胞呈棕黄色，染色主要位于神经细胞胞质及突起中，对照组 0mi/HtrA2 蛋白少量表达，且各时间点表达差异无显著性（Pgt;005） ，窒息后 2h 表达即增强，12h 达峰，然后逐渐下降，而 rhEPO 干预组 0mi/HtrA2 蛋白表达与同一时点窒息组相比明显降低，差异有显著性（Plt;005） ，但二者 72h 仍高于对照组（Plt;005） 。细胞凋亡结果：TUNEL 染色凋亡神经细胞核呈棕褐色，染色质聚集核周呈新月形或块状小体及核固缩的凋亡小体。对照组脑组织神经细胞排
19、列整齐，偶见阳性细胞，且在各个时间点无明显差异（Pgt;005） 。窒息 6h 组脑组织凋亡细胞即较对照组增加，24 h 组显著增高并达高峰，然后逐渐下降，但 72h 仍高于对照组（Plt;005） 。rhEPO 干预组与窒息组相比脑组织凋亡细胞数在各个时间点均明显减少，尤其在 24h 最明显（Plt;005） 。 结论：通过对新生鼠窒息后神经行为能力观察及脑组织病理学检查，证实新生鼠窒息模型制作成功。新生鼠窒息可导致其脑组织神经元凋亡增加，其机制可能与 0mi/HtrA2 蛋白激活有关。3rhEPO 可减少窒息所致新生鼠大脑神经细胞的凋亡数量，其机制可能与 rhEPO 抑制脑组织 0mi/H
20、trA2 蛋白表达有关。目的：探讨新生大鼠窒息后不同时间点脑组织促凋亡蛋白 0mi/HtrA2 表达和神经元凋亡的动态变化及重组人促红细胞生成素（rhEPO）早期干预的影响。 方法：动物模型制备：7 日龄新生 SD 大鼠 144 只，随机分为对照组、窒息组和 rhEPO 干预组，每组各 48 只。将新生大鼠分别置于容积为 55mL 的缺氧瓶中（内装 0005kg 钠石灰） ，待动物安静后，窒息组及 rhEPO 干预组塞紧瓶塞，开始缺氧窒息 30min。对照组模拟此过程不塞瓶塞（不做缺氧处理） ，窒息后各组放回笼中，仍由母鼠哺乳喂养。rhEPO 干预组造模后即刻腹腔内注射50%rhEPO（500
21、0IU/kg） ，对照组和窒息组造模后腹腔内注射等体积生理盐水。早期神经行为能力检查：分别于窒息前及造模后 2h 对每只大鼠进行翻身能力、夹尾尖叫测试。组织标本的制备：各组新生大鼠于窒息后不同时间点（2h、6h、12h、24h、48h、72h）处死，取脑组织经 4%多聚甲醛固定后石蜡包埋，经海马冠状面切片（片厚 4m） 。 结果：神经行为学结果：造模前每只大鼠均做翻身能力、夹尾尖叫测定，144 全部正常。缺氧后 2h 对照组测定结果同前。经历缺氧窒息的 96 只大鼠，45 只不能翻身，52 只出现夹尾不叫，32只表现不能翻身和夹尾不叫同时存在。病理形态学观察：HE 染色光镜下组织形态学改变：对
22、照组脑组织结构及细胞层次清楚，未见水肿和变性坏死的神经元，神经元之间散在分布神经胶质细胞。神经细胞体积较大，核大而圆，位于细胞中央，染色浅，核仁、核膜清晰，胞质染色均匀，尼氏体呈密集分布的细小颗粒状，部分细胞突起可见，海马区锥体细胞排列规则，神经细胞形态结构正常。窒息组见炎细胞浸润，细胞水肿，毛细血管周围间隙增宽，细胞体积变小，胞体收缩呈多角形或不规则形，胞浆浓缩，染为深蓝色，核固缩深染，结构不清等改变。rhEPO 干预组脑组织炎症病变、细胞凋亡改变均较窒息组减轻。0mi/HtrA2 蛋白表达情况：0mi/HtrA2 阳性细胞呈棕黄色，染色主要位于神经细胞胞质及突起中，对照组 0mi/HtrA
23、2 蛋白少量表达，且各时间点表达差异无显著性（Pgt;005） ，窒息后 2h 表达即增强，12h 达峰，然后逐渐下降，而 rhEPO 干预组 0mi/HtrA2 蛋白表达与同一时点窒息组相比明显降低，差异有显著性（Plt;005） ，但二者 72h 仍高于对照组（Plt;005） 。细胞凋亡结果：TUNEL 染色凋亡神经细胞核呈棕褐色，染色质聚集核周呈新月形或块状小体及核固缩的凋亡小体。对照组脑组织神经细胞排列整齐，偶见阳性细胞，且在各个时间点无明显差异（Pgt;005） 。窒息 6h 组脑组织凋亡细胞即较对照组增加，24 h 组显著增高并达高峰，然后逐渐下降，但 72h 仍高于对照组（Pl
24、t;005） 。rhEPO 干预组与窒息组相比脑组织凋亡细胞数在各个时间点均明显减少，尤其在 24h 最明显（Plt;005） 。 结论：通过对新生鼠窒息后神经行为能力观察及脑组织病理学检查，证实新生鼠窒息模型制作成功。新生鼠窒息可导致其脑组织神经元凋亡增加，其机制可能与 0mi/HtrA2 蛋白激活有关。3rhEPO 可减少窒息所致新生鼠大脑神经细胞的凋亡数量，其机制可能与 rhEPO 抑制脑组织 0mi/HtrA2 蛋白表达有关。目的：探讨新生大鼠窒息后不同时间点脑组织促凋亡蛋白 0mi/HtrA2 表达和神经元凋亡的动态变化及重组人促红细胞生成素（rhEPO）早期干预的影响。 方法：动物
25、模型制备：7 日龄新生 SD 大鼠 144 只，随机分为对照组、窒息组和 rhEPO 干预组，每组各 48 只。将新生大鼠分别置于容积为 55mL 的缺氧瓶中（内装 0005kg 钠石灰） ，待动物安静后，窒息组及 rhEPO 干预组塞紧瓶塞，开始缺氧窒息 30min。对照组模拟此过程不塞瓶塞（不做缺氧处理） ，窒息后各组放回笼中，仍由母鼠哺乳喂养。rhEPO 干预组造模后即刻腹腔内注射50%rhEPO（5000IU/kg） ，对照组和窒息组造模后腹腔内注射等体积生理盐水。早期神经行为能力检查：分别于窒息前及造模后 2h 对每只大鼠进行翻身能力、夹尾尖叫测试。组织标本的制备：各组新生大鼠于窒息
26、后不同时间点（2h、6h、12h、24h、48h、72h）处死，取脑组织经 4%多聚甲醛固定后石蜡包埋，经海马冠状面切片（片厚 4m） 。 结果：神经行为学结果：造模前每只大鼠均做翻身能力、夹尾尖叫测定，144 全部正常。缺氧后 2h 对照组测定结果同前。经历缺氧窒息的 96 只大鼠，45 只不能翻身，52 只出现夹尾不叫，32只表现不能翻身和夹尾不叫同时存在。病理形态学观察：HE 染色光镜下组织形态学改变：对照组脑组织结构及细胞层次清楚，未见水肿和变性坏死的神经元，神经元之间散在分布神经胶质细胞。神经细胞体积较大，核大而圆，位于细胞中央，染色浅，核仁、核膜清晰，胞质染色均匀，尼氏体呈密集分布
27、的细小颗粒状，部分细胞突起可见，海马区锥体细胞排列规则，神经细胞形态结构正常。窒息组见炎细胞浸润，细胞水肿，毛细血管周围间隙增宽，细胞体积变小，胞体收缩呈多角形或不规则形，胞浆浓缩，染为深蓝色，核固缩深染，结构不清等改变。rhEPO 干预组脑组织炎症病变、细胞凋亡改变均较窒息组减轻。0mi/HtrA2 蛋白表达情况：0mi/HtrA2 阳性细胞呈棕黄色，染色主要位于神经细胞胞质及突起中，对照组 0mi/HtrA2 蛋白少量表达，且各时间点表达差异无显著性（Pgt;005） ，窒息后 2h 表达即增强，12h 达峰，然后逐渐下降，而 rhEPO 干预组 0mi/HtrA2 蛋白表达与同一时点窒息
28、组相比明显降低，差异有显著性（Plt;005） ，但二者 72h 仍高于对照组（Plt;005） 。细胞凋亡结果：TUNEL 染色凋亡神经细胞核呈棕褐色，染色质聚集核周呈新月形或块状小体及核固缩的凋亡小体。对照组脑组织神经细胞排列整齐，偶见阳性细胞，且在各个时间点无明显差异（Pgt;005） 。窒息 6h 组脑组织凋亡细胞即较对照组增加，24 h 组显著增高并达高峰，然后逐渐下降，但 72h 仍高于对照组（Plt;005） 。rhEPO 干预组与窒息组相比脑组织凋亡细胞数在各个时间点均明显减少，尤其在 24h 最明显（Plt;005） 。 结论：通过对新生鼠窒息后神经行为能力观察及脑组织病理学
29、检查，证实新生鼠窒息模型制作成功。新生鼠窒息可导致其脑组织神经元凋亡增加，其机制可能与 0mi/HtrA2 蛋白激活有关。3rhEPO 可减少窒息所致新生鼠大脑神经细胞的凋亡数量，其机制可能与 rhEPO 抑制脑组织 0mi/HtrA2 蛋白表达有关。目的：探讨新生大鼠窒息后不同时间点脑组织促凋亡蛋白 0mi/HtrA2 表达和神经元凋亡的动态变化及重组人促红细胞生成素（rhEPO）早期干预的影响。 方法：动物模型制备：7 日龄新生 SD 大鼠 144 只，随机分为对照组、窒息组和 rhEPO 干预组，每组各 48 只。将新生大鼠分别置于容积为 55mL 的缺氧瓶中（内装 0005kg 钠石灰
30、） ，待动物安静后，窒息组及 rhEPO 干预组塞紧瓶塞，开始缺氧窒息 30min。对照组模拟此过程不塞瓶塞（不做缺氧处理） ，窒息后各组放回笼中，仍由母鼠哺乳喂养。rhEPO 干预组造模后即刻腹腔内注射50%rhEPO（5000IU/kg） ，对照组和窒息组造模后腹腔内注射等体积生理盐水。早期神经行为能力检查：分别于窒息前及造模后 2h 对每只大鼠进行翻身能力、夹尾尖叫测试。组织标本的制备：各组新生大鼠于窒息后不同时间点（2h、6h、12h、24h、48h、72h）处死，取脑组织经 4%多聚甲醛固定后石蜡包埋，经海马冠状面切片（片厚 4m） 。 结果：神经行为学结果：造模前每只大鼠均做翻身能
31、力、夹尾尖叫测定，144 全部正常。缺氧后 2h 对照组测定结果同前。经历缺氧窒息的 96 只大鼠，45 只不能翻身，52 只出现夹尾不叫，32只表现不能翻身和夹尾不叫同时存在。病理形态学观察：HE 染色光镜下组织形态学改变：对照组脑组织结构及细胞层次清楚，未见水肿和变性坏死的神经元，神经元之间散在分布神经胶质细胞。神经细胞体积较大，核大而圆，位于细胞中央，染色浅，核仁、核膜清晰，胞质染色均匀，尼氏体呈密集分布的细小颗粒状，部分细胞突起可见，海马区锥体细胞排列规则，神经细胞形态结构正常。窒息组见炎细胞浸润，细胞水肿，毛细血管周围间隙增宽，细胞体积变小，胞体收缩呈多角形或不规则形，胞浆浓缩，染为
32、深蓝色，核固缩深染，结构不清等改变。rhEPO 干预组脑组织炎症病变、细胞凋亡改变均较窒息组减轻。0mi/HtrA2 蛋白表达情况：0mi/HtrA2 阳性细胞呈棕黄色，染色主要位于神经细胞胞质及突起中，对照组 0mi/HtrA2 蛋白少量表达，且各时间点表达差异无显著性（Pgt;005） ，窒息后 2h 表达即增强，12h 达峰，然后逐渐下降，而 rhEPO 干预组 0mi/HtrA2 蛋白表达与同一时点窒息组相比明显降低，差异有显著性（Plt;005） ，但二者 72h 仍高于对照组（Plt;005） 。细胞凋亡结果：TUNEL 染色凋亡神经细胞核呈棕褐色，染色质聚集核周呈新月形或块状小体
33、及核固缩的凋亡小体。对照组脑组织神经细胞排列整齐，偶见阳性细胞，且在各个时间点无明显差异（Pgt;005） 。窒息 6h 组脑组织凋亡细胞即较对照组增加，24 h 组显著增高并达高峰，然后逐渐下降，但 72h 仍高于对照组（Plt;005） 。rhEPO 干预组与窒息组相比脑组织凋亡细胞数在各个时间点均明显减少，尤其在 24h 最明显（Plt;005） 。 结论：通过对新生鼠窒息后神经行为能力观察及脑组织病理学检查，证实新生鼠窒息模型制作成功。新生鼠窒息可导致其脑组织神经元凋亡增加，其机制可能与 0mi/HtrA2 蛋白激活有关。3rhEPO 可减少窒息所致新生鼠大脑神经细胞的凋亡数量，其机制
34、可能与 rhEPO 抑制脑组织 0mi/HtrA2 蛋白表达有关。目的：探讨新生大鼠窒息后不同时间点脑组织促凋亡蛋白 0mi/HtrA2 表达和神经元凋亡的动态变化及重组人促红细胞生成素（rhEPO）早期干预的影响。 方法：动物模型制备：7 日龄新生 SD 大鼠 144 只，随机分为对照组、窒息组和 rhEPO 干预组，每组各 48 只。将新生大鼠分别置于容积为 55mL 的缺氧瓶中（内装 0005kg 钠石灰） ，待动物安静后，窒息组及 rhEPO 干预组塞紧瓶塞，开始缺氧窒息 30min。对照组模拟此过程不塞瓶塞（不做缺氧处理） ，窒息后各组放回笼中，仍由母鼠哺乳喂养。rhEPO 干预组造
35、模后即刻腹腔内注射50%rhEPO（5000IU/kg） ，对照组和窒息组造模后腹腔内注射等体积生理盐水。早期神经行为能力检查：分别于窒息前及造模后 2h 对每只大鼠进行翻身能力、夹尾尖叫测试。组织标本的制备：各组新生大鼠于窒息后不同时间点（2h、6h、12h、24h、48h、72h）处死，取脑组织经 4%多聚甲醛固定后石蜡包埋，经海马冠状面切片（片厚 4m） 。 结果：神经行为学结果：造模前每只大鼠均做翻身能力、夹尾尖叫测定，144 全部正常。缺氧后 2h 对照组测定结果同前。经历缺氧窒息的 96 只大鼠，45 只不能翻身，52 只出现夹尾不叫，32只表现不能翻身和夹尾不叫同时存在。病理形态
36、学观察：HE 染色光镜下组织形态学改变：对照组脑组织结构及细胞层次清楚，未见水肿和变性坏死的神经元，神经元之间散在分布神经胶质细胞。神经细胞体积较大，核大而圆，位于细胞中央，染色浅，核仁、核膜清晰，胞质染色均匀，尼氏体呈密集分布的细小颗粒状，部分细胞突起可见，海马区锥体细胞排列规则，神经细胞形态结构正常。窒息组见炎细胞浸润，细胞水肿，毛细血管周围间隙增宽，细胞体积变小，胞体收缩呈多角形或不规则形，胞浆浓缩，染为深蓝色，核固缩深染，结构不清等改变。rhEPO 干预组脑组织炎症病变、细胞凋亡改变均较窒息组减轻。0mi/HtrA2 蛋白表达情况：0mi/HtrA2 阳性细胞呈棕黄色，染色主要位于神经
37、细胞胞质及突起中，对照组 0mi/HtrA2 蛋白少量表达，且各时间点表达差异无显著性（Pgt;005） ，窒息后 2h 表达即增强，12h 达峰，然后逐渐下降，而 rhEPO 干预组 0mi/HtrA2 蛋白表达与同一时点窒息组相比明显降低，差异有显著性（Plt;005） ，但二者 72h 仍高于对照组（Plt;005） 。细胞凋亡结果：TUNEL 染色凋亡神经细胞核呈棕褐色，染色质聚集核周呈新月形或块状小体及核固缩的凋亡小体。对照组脑组织神经细胞排列整齐，偶见阳性细胞，且在各个时间点无明显差异（Pgt;005） 。窒息 6h 组脑组织凋亡细胞即较对照组增加，24 h 组显著增高并达高峰，然
38、后逐渐下降，但 72h 仍高于对照组（Plt;005） 。rhEPO 干预组与窒息组相比脑组织凋亡细胞数在各个时间点均明显减少，尤其在 24h 最明显（Plt;005） 。 结论：通过对新生鼠窒息后神经行为能力观察及脑组织病理学检查，证实新生鼠窒息模型制作成功。新生鼠窒息可导致其脑组织神经元凋亡增加，其机制可能与 0mi/HtrA2 蛋白激活有关。3rhEPO 可减少窒息所致新生鼠大脑神经细胞的凋亡数量，其机制可能与 rhEPO 抑制脑组织 0mi/HtrA2 蛋白表达有关。目的：探讨新生大鼠窒息后不同时间点脑组织促凋亡蛋白 0mi/HtrA2 表达和神经元凋亡的动态变化及重组人促红细胞生成素
39、（rhEPO）早期干预的影响。 方法：动物模型制备：7 日龄新生 SD 大鼠 144 只，随机分为对照组、窒息组和 rhEPO 干预组，每组各 48 只。将新生大鼠分别置于容积为 55mL 的缺氧瓶中（内装 0005kg 钠石灰） ，待动物安静后，窒息组及 rhEPO 干预组塞紧瓶塞，开始缺氧窒息 30min。对照组模拟此过程不塞瓶塞（不做缺氧处理） ，窒息后各组放回笼中，仍由母鼠哺乳喂养。rhEPO 干预组造模后即刻腹腔内注射50%rhEPO（5000IU/kg） ，对照组和窒息组造模后腹腔内注射等体积生理盐水。早期神经行为能力检查：分别于窒息前及造模后 2h 对每只大鼠进行翻身能力、夹尾尖
40、叫测试。组织标本的制备：各组新生大鼠于窒息后不同时间点（2h、6h、12h、24h、48h、72h）处死，取脑组织经 4%多聚甲醛固定后石蜡包埋，经海马冠状面切片（片厚 4m） 。 结果：神经行为学结果：造模前每只大鼠均做翻身能力、夹尾尖叫测定，144 全部正常。缺氧后 2h 对照组测定结果同前。经历缺氧窒息的 96 只大鼠，45 只不能翻身，52 只出现夹尾不叫，32只表现不能翻身和夹尾不叫同时存在。病理形态学观察：HE 染色光镜下组织形态学改变：对照组脑组织结构及细胞层次清楚，未见水肿和变性坏死的神经元，神经元之间散在分布神经胶质细胞。神经细胞体积较大，核大而圆，位于细胞中央，染色浅，核仁
41、、核膜清晰，胞质染色均匀，尼氏体呈密集分布的细小颗粒状，部分细胞突起可见，海马区锥体细胞排列规则，神经细胞形态结构正常。窒息组见炎细胞浸润，细胞水肿，毛细血管周围间隙增宽，细胞体积变小，胞体收缩呈多角形或不规则形，胞浆浓缩，染为深蓝色，核固缩深染，结构不清等改变。rhEPO 干预组脑组织炎症病变、细胞凋亡改变均较窒息组减轻。0mi/HtrA2 蛋白表达情况：0mi/HtrA2 阳性细胞呈棕黄色，染色主要位于神经细胞胞质及突起中，对照组 0mi/HtrA2 蛋白少量表达，且各时间点表达差异无显著性（Pgt;005） ，窒息后 2h 表达即增强，12h 达峰，然后逐渐下降，而 rhEPO 干预组
42、0mi/HtrA2 蛋白表达与同一时点窒息组相比明显降低，差异有显著性（Plt;005） ，但二者 72h 仍高于对照组（Plt;005） 。细胞凋亡结果：TUNEL 染色凋亡神经细胞核呈棕褐色，染色质聚集核周呈新月形或块状小体及核固缩的凋亡小体。对照组脑组织神经细胞排列整齐，偶见阳性细胞，且在各个时间点无明显差异（Pgt;005） 。窒息 6h 组脑组织凋亡细胞即较对照组增加，24 h 组显著增高并达高峰，然后逐渐下降，但 72h 仍高于对照组（Plt;005） 。rhEPO 干预组与窒息组相比脑组织凋亡细胞数在各个时间点均明显减少，尤其在 24h 最明显（Plt;005） 。 结论：通过对
43、新生鼠窒息后神经行为能力观察及脑组织病理学检查，证实新生鼠窒息模型制作成功。新生鼠窒息可导致其脑组织神经元凋亡增加，其机制可能与 0mi/HtrA2 蛋白激活有关。3rhEPO 可减少窒息所致新生鼠大脑神经细胞的凋亡数量，其机制可能与 rhEPO 抑制脑组织 0mi/HtrA2 蛋白表达有关。目的：探讨新生大鼠窒息后不同时间点脑组织促凋亡蛋白 0mi/HtrA2 表达和神经元凋亡的动态变化及重组人促红细胞生成素（rhEPO）早期干预的影响。 方法：动物模型制备：7 日龄新生 SD 大鼠 144 只，随机分为对照组、窒息组和 rhEPO 干预组，每组各 48 只。将新生大鼠分别置于容积为 55m
44、L 的缺氧瓶中（内装 0005kg 钠石灰） ，待动物安静后，窒息组及 rhEPO 干预组塞紧瓶塞，开始缺氧窒息 30min。对照组模拟此过程不塞瓶塞（不做缺氧处理） ，窒息后各组放回笼中，仍由母鼠哺乳喂养。rhEPO 干预组造模后即刻腹腔内注射50%rhEPO（5000IU/kg） ，对照组和窒息组造模后腹腔内注射等体积生理盐水。早期神经行为能力检查：分别于窒息前及造模后 2h 对每只大鼠进行翻身能力、夹尾尖叫测试。组织标本的制备：各组新生大鼠于窒息后不同时间点（2h、6h、12h、24h、48h、72h）处死，取脑组织经 4%多聚甲醛固定后石蜡包埋，经海马冠状面切片（片厚 4m） 。 结果
45、：神经行为学结果：造模前每只大鼠均做翻身能力、夹尾尖叫测定，144 全部正常。缺氧后 2h 对照组测定结果同前。经历缺氧窒息的 96 只大鼠，45 只不能翻身，52 只出现夹尾不叫，32只表现不能翻身和夹尾不叫同时存在。病理形态学观察：HE 染色光镜下组织形态学改变：对照组脑组织结构及细胞层次清楚，未见水肿和变性坏死的神经元，神经元之间散在分布神经胶质细胞。神经细胞体积较大，核大而圆，位于细胞中央，染色浅，核仁、核膜清晰，胞质染色均匀，尼氏体呈密集分布的细小颗粒状，部分细胞突起可见，海马区锥体细胞排列规则，神经细胞形态结构正常。窒息组见炎细胞浸润，细胞水肿，毛细血管周围间隙增宽，细胞体积变小，
46、胞体收缩呈多角形或不规则形，胞浆浓缩，染为深蓝色，核固缩深染，结构不清等改变。rhEPO 干预组脑组织炎症病变、细胞凋亡改变均较窒息组减轻。0mi/HtrA2 蛋白表达情况：0mi/HtrA2 阳性细胞呈棕黄色，染色主要位于神经细胞胞质及突起中，对照组 0mi/HtrA2 蛋白少量表达，且各时间点表达差异无显著性（Pgt;005） ，窒息后 2h 表达即增强，12h 达峰，然后逐渐下降，而 rhEPO 干预组 0mi/HtrA2 蛋白表达与同一时点窒息组相比明显降低，差异有显著性（Plt;005） ，但二者 72h 仍高于对照组（Plt;005） 。细胞凋亡结果：TUNEL 染色凋亡神经细胞核
47、呈棕褐色，染色质聚集核周呈新月形或块状小体及核固缩的凋亡小体。对照组脑组织神经细胞排列整齐，偶见阳性细胞，且在各个时间点无明显差异（Pgt;005） 。窒息 6h 组脑组织凋亡细胞即较对照组增加，24 h 组显著增高并达高峰，然后逐渐下降，但 72h 仍高于对照组（Plt;005） 。rhEPO 干预组与窒息组相比脑组织凋亡细胞数在各个时间点均明显减少，尤其在 24h 最明显（Plt;005） 。 结论：通过对新生鼠窒息后神经行为能力观察及脑组织病理学检查，证实新生鼠窒息模型制作成功。新生鼠窒息可导致其脑组织神经元凋亡增加，其机制可能与 0mi/HtrA2 蛋白激活有关。3rhEPO 可减少窒
48、息所致新生鼠大脑神经细胞的凋亡数量，其机制可能与 rhEPO 抑制脑组织 0mi/HtrA2 蛋白表达有关。目的：探讨新生大鼠窒息后不同时间点脑组织促凋亡蛋白 0mi/HtrA2 表达和神经元凋亡的动态变化及重组人促红细胞生成素（rhEPO）早期干预的影响。 方法：动物模型制备：7 日龄新生 SD 大鼠 144 只，随机分为对照组、窒息组和 rhEPO 干预组，每组各 48 只。将新生大鼠分别置于容积为 55mL 的缺氧瓶中（内装 0005kg 钠石灰） ，待动物安静后，窒息组及 rhEPO 干预组塞紧瓶塞，开始缺氧窒息 30min。对照组模拟此过程不塞瓶塞（不做缺氧处理） ，窒息后各组放回笼
49、中，仍由母鼠哺乳喂养。rhEPO 干预组造模后即刻腹腔内注射50%rhEPO（5000IU/kg） ，对照组和窒息组造模后腹腔内注射等体积生理盐水。早期神经行为能力检查：分别于窒息前及造模后 2h 对每只大鼠进行翻身能力、夹尾尖叫测试。组织标本的制备：各组新生大鼠于窒息后不同时间点（2h、6h、12h、24h、48h、72h）处死，取脑组织经 4%多聚甲醛固定后石蜡包埋，经海马冠状面切片（片厚 4m） 。 结果：神经行为学结果：造模前每只大鼠均做翻身能力、夹尾尖叫测定，144 全部正常。缺氧后 2h 对照组测定结果同前。经历缺氧窒息的 96 只大鼠，45 只不能翻身，52 只出现夹尾不叫，32只表现不能翻身和夹尾不叫同时存在。病理形态学观察：HE 染色光镜下组织形态学改变：对照组脑组织结构及细胞层次清楚，未见水肿和变性坏死的神经元，神经元之间散在分布神经
