1、毕节学院本科毕业论文（设计）毕 业 论 文题 目： 饥饿处理对江黄颡鱼血液 pH 值的影响姓 名： 李能勋学 号： 08110901008教 学 院： 地理与生命科学学院专业班级： 生物科学 2009 级指导教师： 肖玲远（副教授）完成时间： 2013 年 05 月 20 日 毕节学院教务处制毕节学院本科毕业论文（设计）目 录摘要 .iAbstract .ii1.引言 .11.1 简介 .11.2 黄颡鱼生理学研究进展 .11.3 黄颡鱼研究的目的和意义 .12.研究的材料和方法 .22.1 材料 .22.1.1 实验鱼 .22.1.2 器材和试剂 .22.2 方法 .22.2.1 购鱼 .2
2、2.2.2 驯养 .22.2.3 分组处理 .22.2.4 预实验 .32.2.5 正式实验 .43.结果与分析 .53.1 第一阶段处理 10 天，实验组，饥饿处理，对照组，正常投食，血液 PH值变化 .53.2 第二阶段处理 20 天，实验组,饥饿处理，对照组正常投食，血液 PH 值的变化 .53.3 结果 .64.讨论 .7主要参考文献 .9致谢 .10毕节学院本科毕业论文（设计）i饥饿处理对江黄颡鱼血液 PH 值的影响作者姓名：李能勋 专业班级：2009 级生物科学专业学号：08110901008 指导教师：肖玲远（副教授）摘要：将市场上购买的江黄颡鱼数十条在实验室养殖 1015 天，
3、待其体内各项生理指标稳定后，选取形态大小相似的江黄颡鱼 40 条，随机分成两组（各 20条）：一组为实验组，进行饥饿处理，第一阶段处理 10 天，第二阶段处理 20 天后分别抽取血液，并用 PH 计测定其 PH 值。另一组为对照组，进行正常喂食，同样在 10d、20d 后分别取血测定其 pH 值。最终发现，饥饿对江黄颡鱼血液 PH 有一定的影响，实验组（饥饿处理）血液 PH 值要小于对照组（给予正常投食） ，进一步观察可以发现，第二阶段饥饿 20d 后血液 pH 值比第一阶段饥饿 10d 后的血液 PH 值下降的要多，由此可得出，在一定条件下，饥饿可使江黄颡鱼血液 PH 值降低，并且随着饥饿时
4、间的延长，其 PH 值下降的越明显。关键字：饥饿；江黄颡鱼；血液；PH 值毕节学院本科毕业论文（设计）iiEffects of pH of blood with Hunger Treatment on Pseudographs ChellianCandidate: Nengxun Li Major: 09 session of Biological SciencesStudent No.:08110901008 Advisor:LingyuanXiao(Associate Professor）Abstract: 40 specimen of Pseudographs Chellian boug
5、ht from the market, placed in the laboratory and cultured 10 to 15 d,When their blood index was steady, Divided them into two groups, one was experimental group, the other was control group. Experimental group was hunger treatment, the control group was given food, Treating them with two stage, the
6、first stage treated 10 d, the second stage treated 20 d and then through extracted blood from the P. Chellian The pH meter was used to determine, The results of experiment finally found that hunger has certain influence on P. Chellian blood PH, The experimental group (hunger treatment) blood pH is s
7、maller than that of the control group (given normal feeding), and further observation can be found, the second stage blood pH of experimental group declined much more than the first stage. Based on these situation can draw such a conclusion, on some condition, hunger had a decreasing tendency on blo
8、od pH of P. Chellian, and the pH value declined much more with the contention of hunger. Key words: Pseudographs Chellian；hunger ；pH of blood毕节学院本科毕业论文（设计）第 1 页共 10 页1.引 言1.1 简 介黄 颡 鱼 ， 又 名 黄 腊 丁 ， 属 鲇 形 目 ， 鲿 科 ， 黄 颡 鱼 属 ， 有 四 种 ： 岔 尾 黄 颡鱼 ， 江 黄 颡 鱼 ， 光 泽 黄 颡 鱼 ， 瓦 氏 黄 颡 鱼 。 黄 颡 鱼 体 呈 黄 色 ， 背 面 稍 黑
9、 ， 腹 面呈 白 色 ， 头 较 大 且 扁 ， 须 四 对 ， 大 多 数 种 上 颌 须 比 较 长 。 口 下 位 ， 属 无 鳞 鱼 ，背 鳍 和 胸 鳍 的 硬 刺 很 发 达 ， 很 尖 ， 并 且 刺 尖 部 带 有 毒 性 ， 为 淡 水 刺 毒 鱼 类 中 毒性 较 强 的 鱼 类 之 一 。 另 外 黄 颡 鱼 在 搬 运 时 容 易 相 互 之 间 划 伤 ， 划 伤 后 ， 伤 口容 易 感 染 ， 最 终 导 致 死 亡 。黄 颡 鱼 多 在 静 水 中 或 缓 慢 流 动 的 河 水 中 活 动 ， 并 沿 底 栖 水 底 生 活 ， 白 天 底栖 在 湖 泊 水
10、 底 ， 夜 晚 并 游 到 水 上 面 觅 食 。 对 环 境 的 适 应 能 力 较 强 。 但 其 耐 氧 能力 不 是 很 强 ， 在 缺 氧 的 状 况 下 ， 其 会 出 现 浮 头 ， 如 果 在 极 低 氧 浓 度 环 境 中 的 话 ，就 会 窒 息 而 死 亡 。 因 此 在 实 验 室 放 养 时 ， 应 时 刻 用 充 氧 泵 充 氧 。 或 者 将 其 放 入循 环 水 中 。黄 颡 鱼 为 杂 食 性 动 物 ， 并 且 主 要 以 肉 食 性 为 主 ， 其 取 食 多 数 在 夜 间 进 行 ，主 要 取 食 对 象 为 ： 小 鱼 ， 虾 ， 各 种 陆 生
11、或 者 是 水 生 的 昆 虫 ， 小 型 的 软 体 动 物 和其 他 的 水 生 无 脊 椎 动 物 。 而 我 们 在 实 验 时 主 要 给 予 投 喂 黄 粉 虫 ， 约 两 天 给 予 投喂 一 次 ， 每 次 投 喂 2 条 （ 3 4g/条 ） 。 黄 颡 鱼 的 食 性 随 着 季 节 的 变 化 而 变 化 ，并 且 不 同 种 的 黄 颡 鱼 其 食 性 也 有 很 大 的 差 异 。1.2 黄 颡 鱼 生 理 学 研 究 进 展有 关 黄 颡 鱼 生 理 生 化 方 面 的 研 究 目 前 已 有 报 道 ， 如 对 瓦 氏 黄 颡 鱼 血 清 的 鳞组 分 的 测 定
12、 1； 黄 颡 鱼 消 化 器 官 蛋 白 酶 和 淀 粉 酶 活 性 测 定 分 析 2； 淡 水 白 鲳 、团 头 鲂 、 黄 颡 鱼 的 主 要 消 化 酶 活 性 对 比 研 究 3； 中 华 倒 刺 鲃 、 黄 颡 鱼 和 华 鲮的 消 化 酶 活 性 的 比 较 分 析 4； 黄 颡 鱼 不 同 组 织 中 同 工 酶 的 表 达 模 式 的 研 究 等5； 黄 颡 鱼 血 清 免 疫 球 蛋 白 的 纯 化 及 分 子 量 的 初 步 测 定 ； 红 细 胞 脆 性 和 Hb与 水 体 pH 值 的 关 系 6等 。 但 对 饥 饿 处 理 对 江 黄 颡 鱼 血 液 pH 值
13、影 响 的 研 究 还未 见 报 道 。1.3 黄 颡 鱼 研 究 的 目 的 和 意 义黄 颡 鱼 ， 又 名 黄 腊 丁 ， 其 肉毕节学院本科毕业论文（设计）第 2 页共 10 页质 鲜 美 ， 营 养 丰 富 ， 深 受 广 大 消 费 者 所 喜 爱 。 但 因 为 其 生 长 缓 慢 ， 且 又 容 易患 其 它 疾 病 ， 容 易 划 伤 ， 分 布 较 为 狭 窄 ， 死 亡 率 高 等 等 ， 因 此 得 不 到 大 规 模的 养 殖 和 推 广 ， 致 使 其 价 格 较 为 昂 贵 ， 使 广 大 群 众 难 于 购 买 。 为 此 本 实 验 研究 饥 饿 对 黄 颡
14、鱼 血 液 PH 影 响 ， 其 目 的 就 是 为 了 丰 富 黄 颡 鱼 在 饲 养、疾病防治等方面基础知识，从而为黄颡鱼大面积养殖及提高经济效益和食用推广提供理论依据。2.研究的材料和方法2.1 材料2.1.1 实验鱼实验鱼为江黄颡鱼，雌雄兼有，形状大小基本相似（体长约 1012 厘米） ，身体健壮，并且在实验室饲养了一段时间，其体内各项生理指标已稳定。2.1.2 器材和试剂器材：PH 计(上海今迈仪器仪表有限公司生产)，烧杯，温度计，滤纸，吸水纸，试管，注射器（带针头） ，解剖器，玻璃棒，容量瓶，酒精灯，石棉网，滴管。试剂：PH 计缓冲液，蒸馏水，肝素钠溶液,复合电极的外参比补充液。2
15、.2 方法2.2.1 购鱼购买体型大小、健康状况一致的江黄颡鱼数十条，在搬运回实验室的过程中要在容器里多放点水，尽量减少震动，以防止体表划伤而引起感染。2.2.2 驯养由于刚够买回来的鱼进入了一个新的环境，其体内的很多生理指标还不稳定，需要一定的适应过程，因此必须先进行侍养性喂养。在刚买过来的头几天，首先必须对鱼进行消毒处理，消毒剂可选用高锰酸钾、孔雀石绿，高锰酸钾浓度为10ppm，孔雀石绿浓度为 2ppm，消毒时间大约一周，每天一次。消毒处理结束后，将其放入循环水中，循环设备可以不断更新水质，清理杂质，并且还可以清理水里面的一些细菌等，使鱼能够更好，更平安的生存。当养殖到其能够吃东西时（投喂
16、黄粉虫、蚯蚓） ，即已表明其体内各项生理指标基本稳定，可以进行分组处理了。毕节学院本科毕业论文（设计）第 3 页共 10 页2.2.3 分组处理将鱼在实验室饲养了一段时间(约半个月左右)，待其能够吃食物时，表明其体内的各项血液生理指标已基本稳定，即可进行分组，分组时一定要注意随机性，这样才能保证每一组中的鱼体型大小基本一样。分成两组，一组为实验组，进行饥饿处理；另一组为对照组，给予正常投食，让其正常生活，约每两天投喂一黄粉虫。处理两个阶段：第一阶段处理 10 天，第二阶段处理 20 天。在处理过程中，应随时注意观察其吃食等生活状态。2.2.4 预实验为了确保实验能够成功，为了能够得到比较精确的
17、数据，在实验之前，必须多次进行预实验，以尽可能的熟悉实验操作，并尽可能的减少误差。在预实验过程中，着重掌握 PH 计的使用，还有抽血、取血等基本操作过程。PH 计的使用：本次实验所选用的 PH 计为 PHS3C 型实验室 PH 计（上海今迈仪器仪表有限公司生产） ，该仪器测量精度高（为 0.01 级） ，且反应非常灵敏，测量非常方便。PH 计在测量之前应进行标定（以减少测量结果精准性） 。标定用缓冲液为混合物磷酸盐、邻笨二甲酸氢钾、四硼酸纳。标定之前事先配好这三种标准的缓冲溶液。标定的缓冲溶液一般第一次用 PH6.86 的溶液，即 0.025molkg 混合物磷酸盐溶液，第二次选用接近待测溶液
18、 pH 值的缓冲液。如果待测溶液为酸性，就应选 pH4.00 邻笨二甲酸氢钾缓冲液，如果待测溶液为碱性，就应选 pH9.18 四硼酸纳缓冲液。一般情况下，仪器在 24h 内不需要标定。标定完成后，用清水清洗电极后即可对待测溶液进行 pH 值测量。PH 值测量：标定后的仪器，即可测量待测溶液的 pH 值。但这里要注意如果待测溶液温度与标定溶液温度相同时或者是不同时，它们所进行的测量步骤也不尽相同。其具体操作步骤如下：待测溶液温度与标定溶液温度相同时，测量方法如下：用蒸馏水清洗电极的头部，再用待测溶液清洗一次。用玻璃棒搅动待测溶液，并摇动，使溶液混合均匀，再将电极插入待测溶液中，这时就能在显示屏上
19、读出待测溶液的 pH 值。待测溶液温度与标定溶液温度不相同时，其操作方法如下：用蒸馏水清洗电极的头部，再用待测溶液清洗一次。用温度计测出待测溶液的温度值。按 pH 计毕节学院本科毕业论文（设计）第 4 页共 10 页上的“温度”键，使仪器显示为待测溶液的 pH 值，然后再按确认键。用玻璃棒搅动待测溶液，并摇动，使溶液混合均匀，再将电极浸入待测溶液中，这时在显示屏上就可以读出待测溶液的 pH 值。数据测量结束后，应将电极保护套套上，并且电极保护套内应加少量的外参比补充液。以保持电极的玻璃球湿润，切记浸泡到蒸馏水中，复合电极的外参比补充液为浓度 3molL 的氯化钾溶液。抽血和取血：取血部位一般为
20、尾静脉和靠近心脏的主大动脉。首先将鱼固定住，然后解剖，解剖时应十分小心，不要剪破心脏主大动脉，用玻璃分针找到心脏的主大动脉，找到后将已用肝素浸润过的注射器插入靠近心脏的大动脉中，缓慢的抽取血液，抽完后又继续找到尾静脉，又再抽取。抽血时应格外的小心，不要将血液往外流，以保证血量。另外抽血时务必不要抽取流到外面的血液，因为外面的血液已经和组织液相混，血液已被稀释，这样测出来的 pH 值已经不在是血液本身的 pH 值。另外在抽取血液的整个过程中，动作要快，以保证血液的新鲜，防止血液的凝固。因此在预实验中应多次反复的练习。2.2.5 正式实验预实验之后，并已对抽血、取血，以及实验仪器等各项操作非常熟悉
21、的情况下，开始正式实验。分组处理 10 天以后，即第一阶段实验正式开始。第一天做实验组，第二天做对照组。实验时，用干净一次性注射器从黄颡鱼心脏大动脉和尾静脉处抽血，抽血时，动作要迅速，以防凝固，抽出的血量应足以浸没 PH 计复合电极玻璃泡，这样才能真实地测出其血液的 PH 值。将抽取出的血液依次放在 PHS3C 型 PH 计下测量其血液 PH 值。在测完一个数据以后，在进行下一个数据测量之前。PH 计电极需洗干净，并且应用蒸馏水清洗，清洗后，应待其晾干，或用吸水纸吸干外面的水珠，方可进行测定。否则血液将会被稀释了。导致测得的数据不精准，将会增大误差。在将血液放入 PH 计电极下测量时，读数时，
22、应待其示数稳定后，即（PH 计显示屏上的数字停止跳动时） ，即为该条鱼血液的 PH 值，至少应停留 2 到 3 分钟。毕节学院本科毕业论文（设计）第 5 页共 10 页最后将以上测得的实验组、对照组数据进行统计分析。3.结果与分析3.1 第一阶段处理 10 天，实验组，饥饿处理，对照组，正常投食，血液 PH 值变化表一：饥饿处理对黄颡鱼血液 PH 值影响第一阶段（处理 10 天后血液 PH 值） 第二阶段（处理 20 天后血液 PH 值）实验组 对照组 实验组 对照组1 7.02 7.35 6.89 7.122 6.91 7.05 6.84 6.853 7.49 7.52 7.56 6.784
23、 6.88 6.93 6.73 7.445 6.83 7.19 6.26 7.566 7.02 7.75 7.07 7.407 6.84 7.42 6.22 7.218 7.09 6.89 6.47 6.949 6.93 6.77 6.51 7.0910 6.97 7.24 6.73 7.33均数 6.998 7.211 6.728* 7.172注：* 表示差异显著* 表示差异极显著实验数据经 excel 统计软件处理并用双样本异方差 t 检验可知，第一阶段处理 10 天（实验组饥饿 10 天，对照组给予正常投食）后，P(T=t) 双尾 =0.083101451,大于 0.05，由此可知两组鱼
24、血液 pH 指标有一定的差异，但不是很显著，实验组血液 pH 指标要略小于对照组。结果表明饥饿处理后的江黄颡鱼血液 pH 值有降低趋势。 3.2 第二阶段处理 20 天，实验组,饥饿处理，对照组正常投食，血液 PH 值的变化分 组序 号 PH值毕节学院本科毕业论文（设计）第 6 页共 10 页第二阶段，处理 20 天后，将实验数据经 excel 统计软件处理并用双样本异方差 t 检验可知，P(T=t) 双尾 = 0.009721382，小于 0.01，由此可知两组鱼血液 pH 指标值存在明显的差异，实验表明随饥饿时间延长江黄颡鱼血液 pH 值降低越为显著。3.3 结果实验结果经 excel 统计软件处理并用双样本异方差 t 检验可知，第一阶段处理 10 天，实验组和对照之间不存在显著差异；而在第二阶段处理 20 天当中，实验组和对照之间存在极显著差异。由图 1、2 观测值还可看出，第二阶段所得的数据波动比第一阶段所得的数据要大一些，出现波动的原因可能是鱼与鱼之间个体的差异导致。0 第 n 条鱼1 2 4 5 6 7 8 9 1036.206.406.606.807.407.007.207.607.70血液pH值实验组对照组图 1 第一阶段处理，实验组和对照组血液 pH 数值变化波动情况
