流式细胞仪分析技术及应用 流式细胞术 flowcytometry FCM 是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速 精确的对单个细胞理化特性进行多参数定量分析和分选的新技术 流式细胞术最大的特点是能在保持细胞及细胞器或微粒的结构及功能不被破坏的状态下 通过荧光探针的协助 从分子水平上获取多种信号对细胞进
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1、流式细胞仪分析技术及应用 流式细胞术 flowcytometry FCM 是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速 精确的对单个细胞理化特性进行多参数定量分析和分选的新技术 流式细胞术最大的特点是能在保持细胞及细胞器或微粒的结构及功能不被破坏的状态下 通过荧光探针的协助 从分子水平上获取多种信号对细胞进行定量分析或纯化分选 细胞不被破坏 测量快速 大量 准确 灵敏 定量 流式细胞术的特点 流式细胞仪是。
2、流式细胞仪 工作原理EPICS XL/MCLFC500MCL/MPL,流式细胞术的原理,流式细胞术(FCM)是一种能对单个细胞、分子和生物颗粒(微生物)进行多参数快速检测的新型分析和分选技术。近几年随着多种单克隆抗体的成功制备和多种荧光素的应用。FCM逐步运用于对疾病诊断和治疗监测的临床检验常规工作。,基本原理,流路 流动室 鞘液SHEATH 样本流SAMPLE 单细胞悬液5*1051*106个/ml光路 光源 检测信号 光电倍增管PMT HV电路 放大电路HV及GAIN 增益 A/D转换统计:计算机,流 路,单细胞悬液大多数仪器是在50-300 m 大小的孔径中,将细胞悬液注射进入鞘液中 。
3、应用分类,1、膜表面抗原和胞浆内蛋白分析 2、DNA含量及细胞周期分析 3、定量分析 4、细胞功能分析 5、凋亡研究 6、细胞间相互左右 7、细胞分选,1.检测淋巴细胞亚群,监测细胞免疫状态 2.白血病/淋巴瘤免疫分型 3.HLA组织配型及HLA与某些疾病的关系 4.干祖细胞的定量及成分分析. 5.其它:粘附分子;TCR多态性检测;肿瘤癌基因及抑癌基因蛋白产物的检测;细胞内酶;耐药蛋 白的分析等等。,临床应用 疾病诊断:为疾病诊断提供直接的或支持诊断的依据 免疫调节:细胞因子/受体的相互作用共刺激分子受体/配体的相互作用发病机理:肿瘤的发病与机体的。
4、章晓联 教授武汉大学医学院免疫学系,流式细胞仪 FLOW CYTOMETER,原理及应用,流式细胞术,流式细胞仪是近代细胞生物学、分子生物学、分子免疫学和单克隆抗体技术、激光技术、电子计算机技术等学科高度发展、综合的结晶。流式细胞仪的应用标志着细胞学、肿瘤学、免疫学等进入了细胞和分子水平的研究.,一、 流式细胞术的原理流式细胞术(FCM, Flow Cytometry):是对单个细胞或其他生物微粒进行快速定性, 定量分析与分选的一门技术。FCM是利用流式细胞仪(Flow Cytometer)分析在高压高速下通过样品孔径的单个细胞, 在激光束的照射下的发出的散射光。
5、 流式细胞仪技术相关帮助需要相关的实验室仪器设备、生物试剂、医疗器械、制药设备、医药原料、体外诊断试剂及耗材与技术服务信息的,可以访问探生网进行咨询:http:/www.biomean.com需要相关抗体试剂的可以访问 Fantibody 全球抗体搜索引擎:http:/www.fantibody.com流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测。
6、FACS101 Handbook - 1 BD FACSCalibur 流式细胞仪FACS101 Handbook本课程介绍表面抗原流式分析有关之基础工作原理。如希望进一步了解流式细胞技术应用,请至本公司网站订阅 FACSinformation 电子报www.bdtwn.com.tw/bdb/index.html。如需要本课程手册,欢迎至本公司网站下载 www.bdtwn.com.tw/bdb/10-5-3-1.html 。如需要免疫荧光染色方法,请至本公司网站下载 www.bdtwn.com.tw/bdb/10-5-4-1.html 。一、BD FACSCalibur 基本结构1.1 仪器本体:1. 电源开关:在 BD FACSCalibur仪器右侧下方,先启动仪器本体,再打开计算机。2. 光学系统:。
7、guavaeasyCyte微毛细管细胞分析平台Guava 细胞分析平台作为生命科学和治疗领域的提供者和合作者,默克密理博公司致力于细胞生物学与免疫学研究领域解决方案的研究与开发。Guava系列细胞分析仪是为细胞生物学与免疫学实验研究专门设计的。Guava仪器紧凑集约型的设计,易于掌握的操作功能,强大分析能力,实现了集仪器、软件和试剂于一体的完整细胞分析研究平台。2Guava easyCyte 系列微毛细管细胞分析平台采用目前先进的荧光检测系统和优质的光学组件以期最大可能的提高检测灵敏度。程序化软件模块避免操作错误,将给出精确的和可重复的数。
8、,第六章 流式细胞技术的原理与应用,Flow Cytometry,山东师范大学生命科学学院 杨桂文,一、流式细胞仪概述,流式细胞仪(Flow Cytometry, FCM)是一种集激光技 术、电子物理技术、光电测量技术及细胞荧光化学技术、单克 隆抗体技术为一体的新型高科技仪器。所谓流式细胞术,就是 利用流式细胞仪对细胞或生物颗粒进行多参数、快速的定量 分析和分选的技术。研究对象为生物颗粒,如各种细胞、微生物及人工合成微球;研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征,并加以定量。,流式细胞仪分为三大类:台式机,临床型,特点:仪器的光路调节系统固。
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10、流式细胞术,一、流式细胞术(Flow Cytometer, FCM),流式细胞术就是对于处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒进行多参数的、快速的定量分析和分选的技术。,流式细胞仪(Flow Cytometer):是集光电子物理,光电测量,计算机,细胞荧光化学,单抗技术为一体的高科技细胞分析仪。,二、流式细胞仪结构,(1) 流动室及液流驱动系统; (2) 激光光源及光束成形系统; (3) 光学系统; (4) 信号检测与存贮、显示、分析系统, (5) 细胞分选系统。,三、检测原理,悬浮状态的细胞单个流动通过检测区,在那里产生散射光和荧光被采集,过滤 然后转换成数字信。
11、FACS101 Handbook - 1 BD FACSCalibur 流式细胞仪FACS101 Handbook一、BD FACSCalibur 基本结构1.1 仪器本体:1. 电源开关:在 BD FACSCalibur仪器右侧下方,先启动仪器本体,再打开计算机。2. 光学系统:BD FACSCalibur 基本配有一支波长488 nm 的氩离子雷射以BD FACSCalibur 基本型为例 FSC Diode 只收488 nm 波长散射光 SSC PMT 只收488 nm波长散射光 FL1 PMT 荧光光谱峰值落在绿色范围(波长515-545 nm) FL2 PMT 荧光光谱峰值落在橙红色范围(波长564-606 nm) FL3 PMT 荧光光谱峰值落在深红色范围(波长 650 nm)FACS101 Handbook -。
12、FACS101 Handbook - 1 BD FACSCalibur 流式细胞仪FACS101 Handbook本课程介绍表面抗原流式分析有关之基础工作原理。如希望进一步了解流式细胞技术应用,请至本公司网站订阅 FACSinformation 电子报www.bdtwn.com.tw/bdb/index.html。如需要本课程手册,欢迎至本公司网站下载 www.bdtwn.com.tw/bdb/10-5-3-1.html 。如需要免疫荧光染色方法,请至本公司网站下载 www.bdtwn.com.tw/bdb/10-5-4-1.html 。一、BD FACSCalibur 基本结构1.1 仪器本体:1. 电源开关:在 BD FACSCalibur仪器右侧下方,先启动仪器本体,再打开计算机。2. 光学系统:。
13、收 稿 日 期 : 1999 - 12 - 23流 式 细 胞 技 术 与 流 式 细 胞 仪何 克 健(安 徽 医 科 大 学 附 属 医 院 医 学 工 程 部 , 安 徽 合 肥 230022) 文 章 编 号 1002 - 2376 (2000) 05 - 0006 - 03 中 国 分 类 号 TH773 文 献 标 识 码 B 摘 要 流 式 细 胞 技 术 在 细 胞 定 量 检 测 方 面 是 最 先 进 检 测 技 术 , 流 式 细 胞 仪 在 临 床 和 科 研 领 域 得 到 广 泛 运 用 。 关 键 词 流 式 细 胞 技 术 细 胞 检 测概 述 :分 析 细 胞 学 是 细 胞 定 量 分 析 的 学 科 , 流 式 细 胞技 术 ( Flow Cytometer , FCM) 是 分 。
14、第十一章 流式细胞技术与流式细胞仪,本章内容提要,概述,流式细胞仪的定义,流式细胞术的定义,生物学颗粒的内容,流式细胞仪的发展史,概述,流式细胞仪的定义:流式细胞仪是以激光为光源,集流体力学技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器。,概述,流式细胞术的定义:应用流式细胞仪对于处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒进行快速的、多参数的定量分析和分选的技术称为流式细胞术。,概述,生物学颗粒包括大的免疫复合物、DNA、RNA、蛋白质、病毒颗粒、脂质体、细胞器、。
15、流式细胞仪背景知识,总览,流式细胞术基本知识流式细胞仪的组成数据采集与分析,流式细胞技术是什么?,流式细胞术 在流动的状态中检测细胞或颗粒的各项特性 特异性强,灵敏度高,速度快,并能实现多参数分析 可检测的样本种类多样:外周血,骨髓,细胞穿刺液,洗脱液,实体组织,培养细胞,微生物,Flow Cytometry Flow:Fluid Cyto:Cell Metry:Measurement,流式细胞术检测样本,0.4um,40um,流式细胞术检测指标,流式细胞术提供的信息:- 相对细胞大小- 相对细胞颗粒密度和内部复杂度- 染色过细胞的相对荧光强度,细胞结构 细胞大小 细胞粒度 DNA。
16、FACS101 Handbook - 1 BD FACSCalibur 流式细胞仪FACS101 Handbook本课程介绍表面抗原流式分析有关之基础工作原理。如希望进一步了解流式细胞技术应用,请至本公司网站订阅 FACSinformation 电子报www.bdtwn.com.tw/bdb/index.html。如需要本课程手册,欢迎至本公司网站下载 www.bdtwn.com.tw/bdb/10-5-3-1.html 。如需要免疫荧光染色方法,请至本公司网站下载 www.bdtwn.com.tw/bdb/10-5-4-1.html 。一、BD FACSCalibur 基本结构1.1 仪器本体:1. 电源开关:在 BD FACSCalibur仪器右侧下方,先启动仪器本体,再打开计算机。2. 光学系统:。
17、FACS101 Handbook - 1 BD FACSCalibur流式细胞仪 FACS101 Handbook 本课程介绍表面抗原流式分析有关之基础工作原理。如希望进一步了解流式细胞技术应用,请至本公司网站订阅 FACSinformation电子报 www.bdtwn.com.tw/bdb/index.html。 如需要本课程手册,欢迎至本公司网站下载 www.bdtwn.com.tw/bdb/10-5-3-1.html 。 如需要 免疫 荧光染色 方法, 请至本公司网站下载 www.bdtwn.com.tw/bdb/10-5-4-1.html 。 一、 BD FACSCalibur基本结构 1.1仪器本体: 1. 电源开关:在 BD FACSCalibur仪器右侧下方,先启动仪器本体,再打开 计算机。 2.。
18、目录 简介流式细胞仪 3 流式细胞仪的临床检验项目 淋巴细胞亚群分析 4 肿瘤细胞DNA检测分析 5 白血病及淋巴瘤免疫分型 6 残余白血病检测 6 网织红细胞计数 7 造血干细胞计数 7 血小板疾病及活化血小板检测 8 HLA B27检测 8 器官移植的配型及免疫状态监控 9 AIDS诊断及治疗监控 9 流式细胞仪的临床 医学研究 10 流式细胞技术的发展及国内现况 10 建议流式细胞仪之机型 。