1、蒸发残渣测定法,1 仪器与用具 蒸发皿 烘箱 控温精度1。 干燥器 分析天平 感量0.1mg 50mL移液管 水浴锅,溶出物分析方法,蒸发残渣测定法,2 试药与试液干燥器中常用的干燥剂为硅胶，干燥剂应保持在有效状态，硅胶应显蓝色。,蒸发残渣测定法,3 操作方法 3.1 蒸发皿恒重将蒸发皿放置在105烘箱中干燥若干小时，取出置干燥器中冷却半小时，称重。然后将蒸发皿在105烘箱中继续干燥1小时，取出置干燥器中冷却半小时，称重。直至连续两次干燥后称重的差异在0.3mg以下。,蒸发残渣测定法,3.2 供试品的测定取已制备好的检验液50mL加入蒸发皿中，在水浴上蒸干，并在105烘箱中干燥至恒重（恒重步骤
2、同3.1）。同法测定空白对照液。,蒸发残渣测定法,4 注意事项 41 设定烘箱的温度时，应注意加热温度有冲高现象，必要时可先设定至略低于规定的温度，待温度稳定后再调高至规定温度。 42测定蒸发残渣时，蒸发皿放入烘箱内的位置，以及取出放冷，称重的顺序，应先后一致，则较易获得恒重。 43 称定蒸发皿和供试品干燥后的恒重，均应准确至01mg。,蒸发残渣测定法,6. 计算 W=(W12-W11)-(W02-W01)*1000 式中：W蒸发残渣的质量，mgW11未加入检验液的蒸发皿质量，g；W12加入检验液的蒸发皿质量，g；W01未加入空白液的蒸发皿质量，g；W02加入空白液的蒸发皿质量，g；,举例,标
3、准规定：浸提液(50ml)蒸发残渣的总量应不超过5 mg 空蒸发皿(1)恒重：16.3245g 16.3244g 空蒸发皿(2)恒重：16.3245g 16.3244g 蒸发皿检验液恒重：16.3254g 16.3254g 蒸发皿空白液恒重：16.3247g 16.3246g 计算：（16.325416.3244）（16.324616.3244）*1000 =0.8mg 5mg 符合规定,蒸发残渣测定法,5. 记录 记录干燥时的温度、干燥与放冷至室温的时间、量取检验液的体积、恒重的数据、计算和结果等。,重金属总含量,重金属系指在规定实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质。 以铅为代
4、表 由于在药品生产过程中遇到铅的机会较多，且铅易积蓄中毒。,分类,第一法:硫代乙酰胺法第二法：硫化钠法,第一法:硫代乙酰胺法,M2+为样品中的铅、铬、铜、锌,一、原理,2 仪器与用具,纳氏比色管 应选玻璃质量好、无色(尤其管底)、配对、刻度标线高度一致的纳氏比色管,3试药和试液,标准铅溶液 精密称取在110干燥至恒重的硝酸铅0.1598g，置1000ml量瓶中，加硝酸5ml与水50ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液（铅浓度为100ug/ml）。临用前，精确量取铅标准贮备液稀释至所需浓度。贮备液配制 核对人签名 记录 保存一年,硫代乙酰胺试液,取硫代乙酰胺4g，加水使溶解成100ml，
5、置冰箱中保存。 混合液由1mol/L氢氧化钠溶液15ml，水5.0ml及甘油20ml组成 临用前取5.0ml，加上述硫代乙酰胺溶液1.0ml，置水浴上加热20秒钟，冷却，立即使用,醋酸盐缓冲液（pH3.5）,取醋酸铵25g，加水25ml溶解后，加7mol/L盐酸溶液38ml，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5（电位法指示），用水稀释至100ml，即得,硫化钠试液（第二法）,取硫化钠1g，加水使溶解成10ml，即得。本液应临用新制。,4.操作方法,1 取100ml纳氏比色管两支，编号为甲、乙。 2 甲管中加标准铅溶液1ml，加水稀释成50ml，加入乙酸盐缓冲液(pH
6、35)2ml。 3 乙管中加入检验液50ml，加入乙酸盐缓冲液(pH35)2ml。 4 在甲、乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各2.0ml，摇匀，放置2分钟，同置白色衬板上，自上向下透视，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深。,举例,假设供试品浸提液重金属总含量应不得过1g/ml 铅标准溶液的浓度为50g/ml ，检验液的取用量为50ml 5010-65010-6 1ml（标准铅的取样量）,第二法：硫化钠法,以铅为代表制备标准溶液进行比色，测定重金属的总含量 适用于检查能溶于碱而不溶于稀酸(或在稀酸中即生成沉淀)的供试品中的重金属。,操作方法,1 取100ml纳氏比色管两支，编号为甲、乙。 2 甲
7、管中加标准铅溶液1ml，加水稀释成50ml，加入氢氧化钠试液5ml。 3 乙管中加入检验液50ml，加入氢氧化钠试液5ml。 4 在甲、乙两管中分别加硫化钠试液各5滴，摇匀，同置白色衬板上，自上向下透视，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深。,注意事项,1 标准铅溶液应在临用前量取标准铅贮备液新鲜稀释，以防止硝酸铅水解而造成误差；配制与贮存标准铅溶液使用的玻璃容器，均不得含有铅。 2 硫代乙酰胺试液与重金属反应的最佳pH值是3.5，故配制醋酸盐缓冲液(pH3.5)时，要用pH计调节。 3 硫代乙酰胺试液加入量以20ml时呈色最深 4 硫代乙酰胺试液显色剂的最佳显色时间为2分钟，第一法应放置2分
8、钟。,记录,所采用的方法 供试品取样量，标准铅溶液取用量 操作过程中使用的特殊试剂，试液名称和用量 实验过程中出现的现象及实验结果,紫外吸光度法,紫外分光光度法是通过被测物质在紫外光区的特定波长处或一定波长范围内的吸光度，对该物质进行定性和定量分析的方法。紫外区为200400nm，使用的光源为氘灯 大于400nm为可见区，使用的光源为钨灯通常使用的紫外可见分光光度计的工作波长范围为190900nm,原 理,符合朗伯比尔定律A=log1/TECL A为吸光度 T为透光率 E为吸收系数 C为溶液浓度 L为光路长度,试验方法,取已制备的检验液 ，用0.45m的微孔滤膜过滤 并在5小时内测定。 设定检
9、测波长。 取两个已配对的比色皿（1cm），装入空白对照液（约占比色皿体积的4/5），放入紫外分光光度计内，调零。 取出外侧比色皿，倾去空白对照液，用检验液适量润洗后，装入检验液，放入紫外分光光度计内，读数。,注意事项,使用的石英池必须洁净。当吸收池中装入同一溶剂，在规定波长测定各吸收池的透光率，如透光率相差在0.3以下者可配对使用，否则必须加以校正。 取吸收池时，手指拿毛玻璃面的两侧。装样品溶液的体积以池体积的4/5为度，使用挥发性溶液时应加盖 吸收池放入样品室时应注意每次放入方向相同。,注意事项,4. 如用铬酸钾清洁液清洗时，吸收池不宜在清洁液中长时间浸泡，否则清洁液中的铬酸钾结晶会损坏吸收
10、池的光学表面，并应充分用水洗净。 5. 测定前应先检查所用的溶剂在测定供试品所用的波长附近是否符合要求(在220-240nm不得超过0.40，在241-250nm范围内不得超过0.20，在300nm以上不得超过0.05），可用1cm石英吸收池盛溶剂以空气为空白（即参比光路中不放置任何物质）测定其吸光度， 不得在溶剂的截止波长以下测定。,注意事项,6. 供试品溶液的吸光度以在0.30.7之间为宜，吸光度读数在此范围误差较小。 7. 测定时除另有规定者外，应在规定的吸收峰2nm处，再测几点的吸收度，以核对供试品的吸收峰位置是否正确，并以吸光度的最大的波长作为测定波长。,记录,供试品取样量 仪器的型
11、号 检测波长 狭缝宽度 吸光度,材料分析方法,区别： 溶出物分析方法： 检验液由产品在一定条件下，在水中浸泡 一定时间制备而得。 材料分析方法： 把产品本身进行炽灼处理后，溶解制备而 成检验液。,金属总含量分析方法,在弱酸性溶液中，铅、镉、铜、锌等重金属能与硫代乙酰胺作用生成不溶性有色硫化物。 用铅标准溶液做标准进行比色，可测定它们的总含量。在材料分析中，需把供试品先进行灼烧破坏，制备成检验液然后进行进一步分析。,1.仪器与用具,纳氏比色管 应选玻璃质量好、无色(尤其管底)、配对、刻度标线高度一致的纳氏比色管。瓷坩锅，分析天平（感量0.1mg），马福炉,2.试药和试液,标准铅溶液 乙酸盐缓冲液
12、（pH3.5） 硫代乙酰胺试液 配制方法同溶出物分析方法重金属总含量项下,3.操作方法,（1）检验液的制备取样品2g切成5mm5mm碎片，放入瓷坩埚内，缓缓加热使之炭化，冷却后加入2ml硝酸及5滴硫酸，加热至白烟消失为止。再在500550灼烧使之灰化，冷却后加入2ml盐酸置水浴上蒸干，加3滴盐酸润湿残留物，再加入10ml水，加热2min，加酚酞试液一滴，再滴入氨试液至上述溶液变成微红色为止。加乙酸盐缓冲液（pH3.5）2ml（如浑浊，过滤，再用10ml水洗涤沉淀），将溶液转移至50ml容量瓶中，加水使成50ml检验液。,3.操作方法,（2）空白对照液的制备：将加入2ml硝酸、5滴硫酸及2ml盐
13、酸的另一瓷坩埚置于水浴上使之蒸干，再用3滴盐酸湿润残留物。以下操作与检验液的制备方法相同。,3.操作方法,（3）试验步骤取50ml检验液加入100ml纳氏比色管中，另取1ml铅标准溶液加入另一100ml纳氏比色管中，加空白对照液50ml。在两只比色管中各加入2ml硫代乙酰胺试液，摇匀，放置2min。在白色背景下从上方观察，比较颜色深浅。,4.注意事项,同溶出物分析方法项下重金属总含量,5.记录,部分重金属元素含量分析方法,原子吸收分光光度计法 比色分析方法,原子吸收分光光度计法,原理原子吸收分光光度法的测量对象是呈原子状态的金属元素和部分非金属元素，系由待测元素灯发出的特征谱线通过供试品经原子
14、化产生的原子蒸气时，被蒸气中待测元素的基态原子所吸收，通过测定辐射光强度减弱的程度，求出供试品中待测元素的含量。,原子吸收一般遵循分光光度法的吸收定律（浓度与吸光度在一定范围内成正比）通常通过比较标准品和供试品的吸光度，求得供试品中待测元素的含量A对/A样C对/C样,原子吸收分光光度计组成： 光源 原子化器 单色 器 检测系统 校正系统 自动进样系统,光 源,通常用待测元素作为阴极的空心阴极灯,原子化器,原子化器：雾化器、燃烧灯头燃烧火焰由不同种类的气体混合物产生，常用空气乙炔火焰。,单色器,功能：从光源发射的电磁辐射中分离出所需要的电磁辐射 从而使仪器光路保证有良好的光谱分辨率和在相当窄的光
15、谱带（0.2nm）下正常工作的能力，波长范围一般为190.0900.0nm。,检测系统,检测器 信号处理 指示记录器,背景校正系统,校正供试品原子化时蒸气相对吸收测定的干扰,2.溶液的制备,检验液及空白对照溶液的制备同重金属总含量项下,3. 分析方法,（1）在仪器推荐的浓度范围内，制备含待测元素的标准溶液至 少3份，浓度依次递增。同时以相应试剂制备空白对照溶液。 （2）启动仪器，先将去离子水喷入火焰,调读数为零,再将最浓的标准溶液喷入火焰，调节仪器至近满量程的读数；然后依次喷入每一标准溶液， 读数。每喷完1份溶液后,均用去离子水喷入火焰充分冲洗灯头并调零。,3.分析方法,（3）取每一浓度3次读
16、 数的平均值作为纵坐标，相应浓度作为横坐标，作标准曲线。 （4）按各品种项下的规定制备供试品溶液，使待测元素的估计浓度在标准曲线浓度范围 内，将供试品溶液喷入火焰，取3次读数的平均值，从标准曲线上查得相应的浓度，计算元素的含量。,4.注意事项,（1）样品取样要有代表性，取样量应根据被测元素的性质、含量、分析方法及要求的分析精度决定。标准样品的组成应尽可能与被测样品接近。 （2）标准溶液一般浓度大于1000ug/ml的可以作为储备液贮存在耐腐蚀的塑料容器中浓度低于10ug/ml的工作溶液应注意稀释溶剂及试剂对其污染的影响，浓度低于1ug/ml的标准溶液应在使用当天配制使用。,（3）原子吸收分光光
17、度法灵敏度很高，极易受实验室各种用品的污染，常见的污染如下： 水：应使用去离子水或用石英蒸馏器蒸馏的超纯水。储存水的容器一般用聚乙烯塑料等材料制成。玻璃瓶久贮会将瓶中微量污染元素溶解在水中。 试剂：制备样品用的酸类、溶剂及有机萃取剂等亦为主要污染来源之一，应采用高纯试剂。 容量器皿：实验室容量器皿烧杯、容量瓶、移液管等尽可能使用耐腐蚀塑料器皿，而不用玻璃器皿。因为玻璃器皿易吸附或吸收其它金属离子，在使用过程中缓缓释出。样品处理过程及处理完后分析时尽可能防止外界尘埃落入，产生干扰。,5. 定量分析结果判定,标准曲线法制备含待测元素的标准溶液至少有3种不同的浓度。每一浓度测定3次，求取3次读数平均
18、值。以各浓度读数平均值制备标准曲线。供试品要求制备2份样品溶液，各测定3次，取平均值从标准曲线上求得相应的浓度。测定的RSD应不大于3。样品测定离散性大时应多测定几次，以增加读数的可靠性。,比色分析方法,锌铅,锌,1 原理锌与锌试剂显色，可用紫外-可见分光光度法在620nm处测定其吸光度。,2.溶液的配制,0.1mol/L氯化钾溶液：称取7.455g氯化钾，加水稀释至1000mlb. 0.1mol/L氢氧化钠溶液：称取4.000g氢氧化钠，加水稀释至1000ml,c. 硼酸氯化钾缓冲液（pH9.0）,称取硼酸3.090g加0.1mol/L氯化钾溶液500ml使溶解，再加0.1mol/L氢氧化钠
19、溶液210ml，即得。,d. 氢氧化钠试液：称取4.00g氢氧化钠，用水溶解，稀释至100ml 稀盐酸：取25ml盐酸，用水稀释至100ml 锌试剂溶液：取0.130g锌试剂，加2ml氢氧化钠试液溶解，用水稀释至100ml,g锌标准贮备液,称取在120干燥至恒重的氧化锌0.1246g加稀盐酸使之溶解，用氢氧化钠试液调pH值至7。用水稀释至1000ml，摇匀，即得锌的标准贮备液。锌的浓度为100ug/ml。临用前精密量取锌标准贮备液稀释至所需浓度，制得锌标准溶液。,3.试验步骤,（1）检验液及空白对照溶液的制备 同重金属总含量项下,（2）试验方法,a. 取检验液5ml置10ml量瓶中，加2ml硼
20、酸氯化钾缓冲液与0.6ml锌试剂溶液，用水稀释至刻度，作为供试品溶液。 b. 取锌标准溶液5ml置10ml量瓶中，加2ml硼酸氯化钾缓冲液与0.6ml锌试剂溶液，用水稀释至刻度，作为标准对照溶液。 c. 将上述两种溶液摇匀，放置1h。以空白液调零点，分别取供试品溶液和标准对照溶液，置1cm吸收池中，在620nm波长处测定其吸光度。,4.结果计算,根据测得吸光度值，按下式计算检验液相应重金属含量：CsAs/ArCr式中：Cs检验液相应重金属的浓度， ug/mlCr标准对照液相应重金属的浓度，ug/mlAs检验液吸光度Ar标准对照液吸光度,举例,Cr（标准锌溶液的浓度）：2ug/ml As（检验液
21、吸光度）：0.2013 Ar（标准对照液吸光度）：0.5344 As/Ar=Cs/Cr Cs（检验液相应锌的浓度）As/ArCr0.2013/0.5344*2=0.75ug/ml,5.记录,采用的方法 供试品取样量 标准锌溶液取用量 操作过程中使用的特殊试剂，试液名称 实验过程中出现的现象及实验结果,铅,原理铅离子在弱碱性（pH6.811）条件下与双硫腙三氯甲烷溶液生成红色络合物，可用紫外-可见分光光度法在620nm处测定其吸光度。,1.溶液的配制,0.1双硫腙三氯甲烷贮备液 称取0.10g双硫腙溶解于三氯甲烷中，稀释至100ml，贮存于棕色瓶中，置冰箱内保存。,b.吸光度0.15（透光率70
22、）的双硫腙三氯甲烷溶液,临用前取适量双硫腙三氯甲烷贮备液，用三氯甲烷稀释至吸光度为0.15（波长510nm，1cm比色皿）。 吸光度A与透光率T的换算关系为：A=log1/T当A0.15，T1/100.1570,c50柠檬酸铵溶液：取50g柠檬酸铵溶于100ml水中，以酚红为指示剂，用氨水碱化（pH8.59），用双硫腙贮备液提取，每次20ml，至双硫腙绿色不变为止。弃去三氯甲烷层，水层再用三氯甲烷分次洗涤，每次25ml，至三氯甲烷层无色为止，弃去三氯甲烷层，取水层。,d酚红指示液：称取0.1g酚红，溶于100ml乙醇中即得。,e10氰化钾溶液：称取10g氰化钾溶于水中，并稀释至100ml。若试
23、剂不纯，应先将10g氰化钾溶于20ml水中，按50柠檬酸铵溶液纯化的方法进行纯化后稀释至100ml。,f. 10盐酸羟胺溶液：取10g盐酸羟胺溶于水中，稀释至100ml，如试剂不纯，按50柠檬酸铵溶液纯化的方法进行纯化。g. 铅标准贮备液：称取0.1598g经110干燥至恒重的硝酸铅，溶于5ml硝酸和50ml水中，溶解后用水稀释至1000ml，摇匀，作为铅标准贮备液，铅的浓度为100ug/ml。铅标准溶液：临用前精确量取铅标准贮备液，稀释至所需浓度。,2.检验液及空白对照溶液的制备,同重金属总含量项下,3.试验方法,a. 取检验液50ml，加入250ml分液漏斗中。 另取1ml铅标准溶液加入另
24、一支250ml分液漏斗中，加入空白对照液至50ml。 向两支分液漏斗中各加0.2ml盐酸、3滴酚红指示液、2滴盐酸羟胺溶液、2ml柠檬酸铵溶液，混匀。用氨水调节pH至8.59（溶液由黄色变成红色），加入1ml氰化钾溶液、10ml双硫腙三氯甲烷溶液，振摇2min，静置分层。 放出双硫腙三氯甲烷液于比色管中，在20min60min内用分光光度计在510nm处测定吸光度。空白液调零点。,4.结果计算,根据测得吸光度值，按下式计算检验液相应重金属含量：CsAs/ArCr式中：Cs检验液相应重金属的浓度，ug/mlCr标准对照液相应重金属的浓度，ug/mlAs检验液吸光度Ar标准对照液吸光度,5.记录,
25、采用的方法 供试品取样量 标准锌溶液取用量 操作过程中使用的特殊试剂，试液名称 实验过程中出现的现象及实验结果,炽灼残渣检查法,原理 操作方法 注意事项 记录与计算 结果与判断 附注,原理,本法中的“炽灼残渣”系指将样品经加热灼烧至完全灰化，再加硫酸0510ml并炽灼(500600)至恒重后遗留的金属氧化物或其硫酸盐。,1.仪器用具,马福炉 坩埚 坩埚钳 通风柜 分析天平 感量01mg,操作方法,空坩埚恒重 取洁净坩埚置高温炉内，将坩埚盖斜盖于坩埚上，经加热至500600 炽灼约3060 分钟，停止加热，取出坩埚，置适宜的干燥器内，盖好坩埚盖，放冷至室温（一般约需60 分钟），精密称定坩埚重量
26、（准确至0.1mg）。再以同样条件重复操作，直至恒重，备用。,操作方法,称取供试品 取供试品（1.02.0g) 或各品种项下规定的重量，置已炽灼至恒重的坩埚内，精密称定。 炭化 将盛有供试品的坩埚置电炉上缓缓灼烧（应避免供试品受热骤然膨胀或燃烧而逸出），炽灼至供试品全部炭化呈黑色，并不再冒烟，放冷至室温（以上操作应在通风柜内进行）。,灰化,除另有规定外，滴加硫酸0.51ml，使炭化物全部湿润，继续在电炉上加热至硫酸蒸汽除尽，白烟完全消失（以上操作应在通风柜内进行）。将坩埚置高温炉内，坩埚盖斜盖于坩埚上，在500600 炽灼约60 分钟，使供试品完全灰化。,恒重,按操作方法自“停止加热，待高温炉
27、”起，依法操作，直至恒重。,注意事项,炭化与灰化的前一段操作应在通风柜内进行。供试品放入高温炉前，务必完全炭化并除尽硫酸蒸气。必要时，高温炉应加装排气管道。,注意事项,供试品的取用量，除另有规定外，一般为1.02.0g.（炽灼残渣限度为0.10.2）。如有限度较高的品种，可调整供试品的取用量，使炽灼残渣的量为12mg,注意事项,坩埚应编码标记，盖子与坩埚应编码一致。从高温炉中取出时的温度、先后次序、在干燥器内的放冷时间以及称量顺序，均应前后一致；同一干燥器内同时放置的坩埚最好不超过4个，否则不易达到恒重。,注意事项,坩埚放冷后干燥器内易形成负压，应小心开启干燥器，以免吹散坩埚内的轻质残渣。 开
28、关炉门时，应注意勿损坏高质耐火绝缘层。 加硫酸处理是使杂质转化为稳定的硫酸盐，并帮助有机物炭化,记录供试品的取用量、炽灼的温度、时间，坩埚及残渣的恒重数据、计算与结果等,记录与计算,举例,炽灼残渣：应不得过5mg/g 空坩埚恒重：20.1244g 20.1241g 残渣及坩埚恒重：20.1309g 20.1308g 供试品重：2.0121g 炽灼残渣：（20.130820.1241）/2.012110003mg/g 5mg/g 结论：符合规定,炽灼残渣（残渣及坩埚重空坩埚重）1000/供试品重,附注,炽灼至恒重，除另有规定外，系指在规定温度下连续两次炽灼后的重量差异在 0.3mg 以下，第二次炽灼时间不少于30 分钟。,炽灼残渣 标准规定：应不得过5mg/g 仪器型号及编号： 温度： 坩埚恒重： 炽灼 小时 再炽灼 小时 供试品量：炽灼至恒重： 炽灼 小时 再炽灼 小时计算：结论：,谢谢大家！,第一法利用酸性溶液中，铅、铬、铜、锌能与硫代乙酰胺作用生成不溶性有色硫化物，测定重金属的总含量；第二法利用碱性溶液中，铅、铬、铜、锌能与硫化钠作用生成不溶性有色硫化物，测定重金属的总含量，适用于检查能溶于碱而不溶于稀酸(或在稀酸中即生成沉淀)的供试品中的重金属。,
