1、宜顺论文网 www.13LW.com摘 要奥 氮 平 主 要 适 用 于 各 种 精 神 分 裂 症 及 其 相 关 障 碍 的 急 性 期 治 疗 和 巩 固治 疗 ， 对 阳 性 症 状 （ 妄 想 、 幻 觉 、 思 维 障 碍 、 敌 意 和 猜 疑 等 )和 阴 性 症 状（ 情 感 淡 漠 、 情 感 和 社 会 退 缩 、 言 语 贫 乏 )均 有 肯 定 的 疗 效 5。 奥 氮 平 亦可 缓 解 精 神 分 裂 症 所 继 发 的 情 感 症 状 6。 对 于 治 疗 有 效 的 病 人 ， 奥 氮 平 可 用于 巩 固 治 疗 ， 保 持 其 临 床 缓 解 状 态 7。
2、奥 氮 平 杂 质 方 法 被 USP36 版 所 收载 ， 使 用 HPLC 方 法 检 测 药 物 的 有 关 杂 质 1。 药 品 作 为 一 种 特 殊 的 商 品 ，药 品 质 量 的 优 劣 性 直 接 关 系 到 用 药 者 的 健 康 与 生 命 安 全 2。 因 此 ， 必 须 对药 品 质 量 实 行 全 面 的 控 制 ， 以 确 保 人 们 用 药 的 安 全 、 合 理 和 有 效 4。 药 品确 认 的 项 目 一 般 包 括 专 属 性 ， 系 统 适 用 性 ， 重 复 性 （ 包 括 精 密 度 和 中 间 精 密度 ） ， 定 量 限 ， 检 测 限 ， 溶
3、 液 稳 定 性 ， 耐 用 性 等 。 根 据 日 常 使 用 的 要 求 ，需 要 对 实 验 中 使 用 到 的 一 些 溶 液 的 稳 定 性 进 行 考 察 3。 当 所 有 的 确 认 都 符合 接 受 标 准 的 情 况 下 ， 我 们 认 为 该 药 典 方 法 适 用 于 应 用 实 验 室 的 检 测 ， 并 用于 控 制 产 品 质 量 12。关 键 词 ： 奥 氮 平 方 法 确 认宜顺论文网 www.13LW.com目 录 一 、 所 用 试 剂 及 样 品 4二 、 方 法 描 述 4（ 一 ） 色谱条件 4（ 二 ） 溶液配制 5（ 三 ） 系统适应性及操作步骤
4、5（ 四 ） 计 算 公 式 6三 、 验 证 内 容 6（ 一 ） 专属性 6（ 二 ） 系统适应性 7（ 三 ） 精密度 71、重复性（精密度实验 1） 72、中间精密度（精密度实验 2） 83、中间精密度（精密度实验 3 ） 9（ 四 ） 定量限/检测限（LOQ/LOD） 10（ 五 ） 溶液稳定性研究 13（ 六 ） 耐用性 15四 、 结 论 17五 、 参 考 文 献 18宜顺论文网 www.13LW.com一 、 所 用 试 剂 及 样 品名 称 级 别 批 号 /含 量 （ 若 适 用 ） 来 源磷 酸 分 析 级 20121212/T20100318 国 药 集 团 化 学
5、试 剂 有 限公 司氢 氧 化 钠 分 析 级 20091110/20130111 青 山 化 工 试 剂 有 限 公 司乙 腈 色 谱 级 I669430303/IB0IF60082 MERCK分 析 级 20121030 国 药 集 团 化 学 试 剂 有 限公 司EDTA 二 钠色 谱 级 K36473818646 MERCK十 二 烷 基 硫 酸钠 色 谱 级 026FC26F0512 GFCO Chemical水 纯 化 水 每 日 新 鲜 海 正 药 业 制 备奥 氮 平 氯 甲 基氯 化 物 标 准 品 13-BHW-118-6/98% TRC奥 氮 平 有 关 物质 A 标 准
6、 品 F0H156/GOK232 USP奥 氮 平 有 关 物质 B 标 准 品 F0H160/GOK318 USP标 准 品 1301/99.2% 海 正 药 业 标 定标 准 品 1001/99.8% 海 正 药 业 标 定奥 氮 平样 品100801-B、 100802-B、 100803-B、 090921海 正 药 业 生 产METTLER XP205 已 校 正电 子 分 析 天 平METTLER XP6 已 校 正Agilent 1260/1100 已 校 正Shimadzu LC-20A/LC-2010C 已 校 正高 效 液 相 色 谱仪Waters 2695 已 校 正pH
7、 计 METTLER S20 已 校 正色 谱 柱 信 息 Agilent ZORBAX SB-C8 4.6250mm 5mPN： 880975-906 二 、 方 法 描 述 1（ 一 ） 色谱条件宜顺论文网 www.13LW.com缓冲液：取 13g 十二烷基硫酸钠溶于 1500ml 水中，加入 5ml 磷酸，用氢氧化钠调节 pH 至 2.5。溶剂：取约 55mgEDTA 二钠溶于 1500ml 缓冲液中，该溶液与乙腈为 3：2。流动相 A：缓冲液：乙腈=52：48，过滤脱气。流动相 B：乙腈：缓冲液=70：30，过滤脱气。流动相：梯度洗脱。时间（min） 流动相 A (%，V/V) 流动
8、相 B (%，V/V)0 100 010 100 020 0 10025 0 10027 100 035 100 0色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C8,4.6250mm,5m流速：1.5ml/min检测波长：220nm进样量：20l柱温：35进样室温度：5（ 二 ） 溶液配制 2分离度溶液：取适量的奥氮平标准品，奥氮平 USP 相关物质 A 标准品、奥氮平USP 相关物质 B 标准品溶于稀释液，得到奥氮平的浓度约为 20g/ml，相关物质 A 与相关物质 B 的浓度分别为 2g/ml。标准溶液：准确称取适量的奥氮平标准品，溶于稀释液，配成的浓度约为0.002mg/ml（例如 20
9、mg100ml，移取 1ml100ml） 。样品溶液：准确称取 20mg 的奥氮品样品于 50ml 的容量瓶中，用稀释剂溶解并稀释到刻度，摇匀。（ 三 ） 系统适应性及操作步骤进样溶剂，记录色谱图，应无干扰峰，取分离度溶液进样，记录峰响应，根据其RRT（见下表 1）鉴别各峰，奥氮平有关物质 A 与奥氮平的分离度应不小于 3.0，拖尾因子（以奥氮平峰计）应不大于 1.5，连续进样标准溶液 6 针，奥氮平峰面积的 RSD 应不大于 2.0%。系统符合后进样品溶液。表 1峰鉴别 相对保留时间 (RRT) 相对响应因子 (RRF) 限度(%)奥氮平有关物质 B 0.3 2.3 0.10宜顺论文网 ww
10、w.13LW.com奥氮平有关物质 A 0.8 2.3 0.10奥氮平 1.0 / /奥氮平氯甲基氯化物 1.1 1.0 0.15单个非特定杂质 / / 0.10总杂质 / / 0.4（ 四 ） 按下式计算奥氮平有关物质 B、奥氮平有关物质 A、奥氮平氯甲基氯化物、单个非特定杂质、总杂质的含量：（PC s/Cu） （r i/rs ） （1/F）F 为各杂质的相对响应因子（RRF） ，见上表 1；Cu，C s分别为样品溶液与对照溶液中的配制浓度（mg/ml） ；rs为对照溶液所对应的主峰响应值；ri为样品溶液所对应的各杂质响应值；P 为对照品的含量，%。三 、 验 证 内 容（ 一 ） 专属性
11、专属性是指在其他组分（杂质、降解产物、辅料等）可能存在下，采用的分析方法能准确地测出被测组分的特性。现通过对奥氮平及各个已知杂质进行色谱定位分析来进行专属性研究 10 11。分离度溶液：准确称取奥氮平标准品 20.007mg，有关物质 A 标准品 2.011mg，有关物质 B 标准品 2.025mg，置于同一 10ml 容量瓶中，加溶剂稀释至刻度，准确移取 1.0ml 至 100ml 容量瓶中，用溶剂稀释至刻度。奥氮平氯甲基氯化物储备液：准确称取奥氮平氯甲基氯化物 2.16mg 至 20ml 容量瓶中，用溶剂溶解并稀释至刻度，混匀。奥氮平氯甲基氯化物溶液：准确移取奥氮平氯甲基氯化物储备液 1.
12、0ml 至 100ml容量瓶中，用溶剂稀释至刻度。进样溶剂、分离度溶液、奥氮平氯甲基氯化物溶液，记录峰响应值。实验结果见表 2。表 2.专属性结果各峰分离情况峰名称 RT（min） RRT USP 参考 RRT奥氮平有关物质 B 3.821 0.2 0.3奥氮平有关物质 A 11.035 0.6 0.8奥氮平 18.573 1.0 1.0奥氮平氯甲基氯化物 19.471 1.1 1.1由上表数据可知，各已知杂质的 RRT 与 USP 中参考值基本一致，各杂质均能够分宜顺论文网 www.13LW.com离开，溶剂峰（2013050900.lcd）无干扰，说明此有关物质方法专属性良好。（ 二 ）
13、系统适应性 对仪器分析方法在进行验证时，将分析设备、电子仪器、实验操作、测试样品等一系列作为完整系统进行评估，需要进行系统适应性考察 10 11。分离度溶液配制同 4.1“专属性“项下标准溶液：精密称取奥氮平标准品 20.31mg 分别至 50ml 容量瓶中，用溶剂溶解并稀释至刻度，精密移取上述溶液 1.0ml 至 200ml 容量瓶中，用溶剂稀释至刻度。进样溶剂（流动相） 、系统适应性溶液、5 针标准溶液，记录峰响应值。实验结果见表 3。表 3 系统适应性结果序号 峰面积 图谱编号1st 69.58971 10052603.D2nd 69.58934 10052604.D3rd 69.738
14、78 10052605.D4th 69.60703 10052606.D5th 69.61736 10052607.D6th 69.74336 10052608.D平均值 69.64759667 /RSD(%) 0.11 /分离度（R） 4.2拖尾因子（T） 1.1 10052601.D接受标准 R2.0 T2 RSD2.0%由上表数据可知，各系统适应性参数均满足要求，系统适应性良好。（ 三 ） 精密度精密度是指对均一样品重复取样检测每个检测结果间的接近程度，通过变异系数（相对标准偏差）来考察 10。1、重复性（精密度实验 1）重复性指短时间内同一分析人员使用同一仪器进行重复检测同一个样品。由
15、实验员 I 在 Agilent 上检测六份样品标准溶液，分离度溶液，同 4.2“系统适应性”项下溶液。样品原样溶液：精密称取奥氮平样品（090921）20.71mg、20.33mg、20.62mg、20.25mg、20.37mg、20.09mg 分别至 50ml 容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度。待系统稳定后，由实验员 I 在 Agilent 仪器上按照方法描述中的方法进行检测，计算 6 份奥氮平样品有关物质的含量，并计算各自的 RSD，应符合表 4 的规定。实验结果详见表 5宜顺论文网 www.13LW.com表 4 接受标准 3-4内 容 接受标准如杂质的平均值是 那么接受标准是小于 L
16、OQ N/ALOQ 至 0.10% 测得杂质的相对标准偏差（RSD）不超过50% 0.10 至 0.50% 测得杂质的相对标准偏差（RSD）不超过25% 相关物质0.5% 测得杂质的相对标准偏差（RSD）不超过10%表 5 重复性（精密度实验 1）检测结果实验员 I 潘海红检测日期 2010.05.26仪器型号 Agilent 1200样品批号 有关物质 A 有关物质 B 氯甲基氯化物 单个非特定杂质 总杂质1 0.0000 0.0067 0.0293 0.0475 0.13182 0.0000 0.0067 0.0284 0.0479 0.13023 0.0000 0.0069 0.0289
17、 0.0478 0.13224 0.0000 0.0080 0.0299 0.0497 0.13625 0.0000 0.0081 0.0297 0.0492 0.13666 0.0000 0.0086 0.0286 0.0472 0.1315平均值 ND 0.0075 0.0291 0.0482 0.1331RSD% N/A 11.11 2.11 2.07 2.002、中间精密度（精密度实验 2）中间精密度指在不同时间由不同实验员在不同仪器上对同一个样品进行测。即由实验员 II 在不同天用 Shimadzu LC-2010C 检测六份样品（090921） 。分离度溶液同 4.2“系统适应性”
18、项下溶液。标准溶液：精密称取奥氮平标准品 20.57mg 分别至 50ml 容量瓶中，用溶剂溶解并稀释至刻度，精密移取上述溶液 1.0ml 至 200ml 容量瓶中，用溶剂稀释至刻度。样品原样溶液：精密称取奥氮平样品（090921）20.57mg、20.24mg、20.51mg、20.36mg、20.43mg、20.19mg 分别至 50ml 容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度。待系统稳定后，按照方法描述中的方法进行检测，计算奥氮平有关物质含量，并计算各自的 RSD，应符合表 4 的规定。实验结果详见下表。宜顺论文网 www.13LW.com表 6 中间精密度（精密度实验 2）检测结果实验员
19、I 潘海红检测日期 2010.05.29仪器型号 Shimadzu LC-2010C样品批号 有关物质 A 有关物质 B 氯甲基氯化物 单个非特定杂质 总杂质1 0.0000 0.0029 0.0309 0.0447 0.12712 0.0000 0.0032 0.0315 0.0425 0.11783 0.0000 0.0033 0.0307 0.0419 0.11634 0.0000 0.0036 0.0310 0.0444 0.11975 0.0000 0.0038 0.0310 0.0416 0.11716 0.0000 0.0042 0.0311 0.0417 0.1203平均值 N
20、D 0.0035 0.0310 0.0428 0.1197RSD% N/A 12.91 0.86 3.24 3.263、中间精密度（精密度实验 3）由实验员 I 在 Waters 上检测六份样品（090921） 。分离度溶液同 4.2“系统适应性”项下溶液。标准溶液：精密称取奥氮平标准品 20.31mg 分别至 50ml 容量瓶中，用溶剂溶解并稀释至刻度，精密移取上述溶液 1.0ml 至 200ml 容量瓶中，用溶剂稀释至刻度。样品原样溶液：精密称取奥氮平样品（090921）20.71mg、20.33mg、20.62mg、20.25mg、20.37mg、20.09mg 分别至 50ml 容量瓶
21、中，用流动相溶解并稀释至刻度。待系统稳定后，按照方法描述中的方法进行检测，计算奥氮平有关物质含量，并计算各自的 RSD，应符合表 4 的规定。实验结果详见下表。表 7 中间精密度（精密度实验 3）检测结果实验员 I 王华检测日期 2010.05.26仪器型号 Waters 2695样品批号 有关物质 A 有关物质 B 氯甲基氯化物 单个非特定杂质 总杂质1 0.0000 0.0060 0.0299 0.0441 0.12852 0.0000 0.0063 0.0300 0.0436 0.12763 0.0000 0.0069 0.0309 0.0444 0.13134 0.0000 0.007
22、7 0.0321 0.0451 0.1356宜顺论文网 www.13LW.com5 0.0000 0.0078 0.0318 0.0456 0.13626 0.0000 0.0075 0.0323 0.0439 0.1288平均值 ND 0.0070 0.0312 0.0445 0.1313RSD% N/A 10.55 3.38 1.69 2.86汇总三种仪器上精密度的结果至下表。表 8 三种仪器精密度汇总结果项目 实验 1 实验 2 实验 3 平均 值 RSD有关物质 A (%) ND ND ND ND N/A有关物质 B (%) 0.0070 0.0035 0.0075 0.01 N/A氯
23、甲基氯化物 (%) 0.0312 0.0310 0.0291 0.03 3.81单个非特定杂质(%) 0.0445 0.0428 0.0482 0.05 6.11总杂质(%) 0.1313 0.1197 0.1331 0.13 5.68从以上数据可以得知，三种仪器结果均符合规定，说明此检测方法在这三种仪器上检测中间精密度良好，适合在本实验室运行。（ 四 ） 定量限/检测限（LOQ/LOD）定量限/检测限（LOQ/LOD）是评价仪器和方法灵敏度的重要指标，现通过信噪比来确定定量限/检测限（LOQ/LOD） 8 10 。奥氮平及未知杂质的定量限/检测限（LOQ/LOD）是由奥氮平稀释得到的，已知杂
24、质的定量限/检测限（LOQ/LOD）是由相应杂质稀释得到的。其中定量限的信噪比应不小于 10，检测限的信噪比应在 25 之间。奥氮平的定量限溶液配制：称取 20.31mg 奥氮平标准品于 50ml 容量瓶中，加溶剂溶解并定容到刻度；移取 1.0ml 于 200ml 容量瓶中，用溶剂定容到刻度；再移取 1.0ml 置于 50ml 容量瓶中，用溶剂定容到刻度。奥氮平的检测限溶液配制：移取 3.0ml 奥氮平定量限溶液置于 10ml 容量瓶中，用溶剂定容到刻度。杂质 A 储备液：称取 2.07mg 杂质 A 标准品置于 20ml 容量瓶中，加溶剂溶解并定容到刻度；杂质 B 储备液：称取 2.01mg
25、 杂质 B 标准品置于 20ml 容量瓶中，加溶剂溶解并定容到刻度；杂质 A 的定量限溶液配制：移取 1.0ml 杂质 A 储备液置于 50ml 容量瓶中，用溶剂定容到刻度；再移取 1.0ml 置于 50ml 容量瓶中，用溶剂定容到刻度。杂质 A 的检测限溶液配制：移取 3.0ml 杂质 A 定量限溶液置于 10ml 容量瓶中，用溶剂定容到刻度。杂质 B 的定量限溶液配制：移取 1.0ml 杂质 B 储备液置于 100ml 容量瓶中，用溶剂定容到刻度；再移取 1.0ml 置于 50ml 容量瓶中，用溶剂定容到刻度。宜顺论文网 www.13LW.com杂质 B 的检测限溶液配制：移取 3.0ml
26、 杂质 B 定量限溶液置于 10ml 容量瓶中，用溶剂定容到刻度。奥氮平氯甲基氯化物储备液：准确称取奥氮平氯甲基氯化物 2.16mg 至 20ml 容量瓶中，用溶剂溶解并稀释至刻度，混匀。准确移取上述溶液 1.0ml 至 100ml 容量瓶中，用溶剂稀释至刻度。准确移取上述溶液 1.0ml 至 100ml 容量瓶中，用溶剂稀释至刻度。奥氮平氯甲基氯化物定量限溶液：准确移取奥氮平氯甲基氯化物储备液 0.7ml至 50ml 容量瓶中，用溶剂稀释至刻度。奥氮平氯甲基氯化物检测限溶液：准确移取奥氮平氯甲基氯化物储备液 5.0 ml至 10ml 容量瓶中，用溶剂稀释至刻度。定量限溶液进 6 针，检测限溶
27、液进 2 针，记录色谱图并计算信噪比及其平均值。表 9 奥氮平定量限LOQ 浓度 序号 峰面积 S/N 图谱编号1 1.66484 11.0 10052620.D2 1.77925 11.7 10052621.D3 1.71608 11.9 10052622.D4 1.64961 10.3 10052623.D5 1.68069 10.0 10052624.D6 1.60108 10.1 10052625.D平均值1.691925 10.8 /奥氮平Conc:0.041g/ml,相当于奥氮平的 0.01%RSD% 3.62 7.65 /接受标准 S/N: 1015表 10 奥氮平检测限LOD
28、浓度 序号 峰面积 S/N 图谱编号1 0.52704 2.4 10052618.D奥氮平Conc: 0.012g/ml,相当于奥氮平的 0.003% 2 0.48709 2.1 10052619.D接受标准 S/N: 25表 11 奥氮平有关物质 A 定量限LOQ 浓度 序号 峰面积 S/N 图谱编号1 2.70780 12.0 10052721.D2 2.76746 13.7 10052722.D3 2.85494 14.1 10052723.D奥氮平有关物质 AConc:0.041g/ml,相当于奥氮平的 0.01% 4 2.92222 12.4 10052724.D宜顺论文网 www.
29、13LW.com5 2.87452 13.1 10052725.D6 2.74469 11.2 10052726.D平均值2.811938 12.8 /RSD% 2.99 8.55 /接受标准 S/N: 1015表 12 奥氮平有关物质 A 检测限LOD 浓度 序号 峰面积 S/N 图谱编号1 0.820283 3.0 10052719.D奥氮平有关物质 AConc: 0.012g/ml,相当于奥氮平的 0.003% 2 0.755800 3.4 10052720.D接受标准 S/N: 25表 13 奥氮平有关物质 B 定量限LOQ 浓度 序号 峰面积 S/N 图谱编号1 1.51944 11
30、.0 10052813.D2 1.40586 10.4 10052814.D3 1.47558 11.4 10052815.D4 1.46283 12.0 10052816.D5 1.42558 12.7 10052817.D6 1.51033 13.1 10052818.D平均值1.46663 11.8 /奥氮平有关物质 BConc:0.020g/ml,相当于奥氮平的 0.005%RSD% 3.08 8.74 /接受标准 S/N: 1015表 14 奥氮平有关物质 B 检测限LOD 浓度 序号 峰面积 S/N 图谱编号1 0.450588 3.2 10052811.D奥氮平有关物质 BCon
31、c: 0.006g/ml,相当于奥氮平的 0.002% 2 0.49776 3.2 10052812.D接受标准 S/N: 25表 15 奥氮平氯甲基氯化物定量限LOQ 浓度 序号 峰面积 S/N 图谱编号1 403 12.7 2013050904.lcd2 426 12.8 2013050905.lcd奥氮平氯甲基氯化物Conc:0.015g/ml,相当于奥氮平的 0.004% 3 407 12.8 2013050906.lcd宜顺论文网 www.13LW.com4 415 12.6 2013050907.lcd5 415 13.0 2013050908.lcd6 411 12.1 2013
32、050909.lcd平均值412 12.7 /RSD% 1.93 2.43 /接受标准 S/N: 1015表 16 奥氮平氯甲基氯化物检测限LOD 浓度 序号 峰面积 S/N 图谱编号1 297 4.7 2013050910.lcd奥氮平氯甲基氯化物Conc: 0.007g/ml,相当于奥氮平的 0.002% 2 295 4.0 2013050911.lcd接受标准 S/N: 25从以上数据可以得知，奥氮平、有关物质 A、有关物质 B 和奥氮平氯甲基氯化物的定量限、检测限结果均符合规定，说明此方法灵敏度良好。（ 五 ） 溶液稳定性研究为保证样品检测的结果真实可信，确实代表样品准确的结果，需对样
33、品的溶液稳定性进行考察。即将样品在冷藏和室温状态下分别进行检测，通过考察回收率来确认溶液的稳定性（回收率=放置一段时间后结果/0 小时结果） 13杂质标准溶液：准确量取相关物质 A 和相关物质 B 储备溶液各 1.0ml 于 25 ml 容量瓶中，用溶剂溶解并稀释至刻度。样品溶液配制：准确称取样品 20.68mg 至 50ml 容量瓶中，准确加入 5.0ml 杂质标准溶液，用溶剂溶解并稀释至刻度。对加入一定量杂质后的奥氮平样品溶液的稳定性进行研究，在室温和冷藏条件下存放样品溶液，每隔 1 小时进样一次，计算每个点测得的杂质量，除以 0 小时的检测值即为回收率，回收率记入下表 17。表 17 样
34、品溶液的稳定性（冷藏条件）检测值（%）储存条件 有关物质 A 有关物质 B 氯甲基氯化 物 单个非特定 杂质 总杂质0h 冷藏 0.0760 0.1000 0.0313 0.0484 0.2948 1h 冷藏 0.0763 0.1002 0.0322 0.0482 0.2934 2h 冷藏 0.0753 0.1000 0.0351 0.0473 0.2944 3h 冷藏 0.0754 0.1009 0.0344 0.0471 0.2930 4h 冷藏 0.0751 0.1008 0.0341 0.0466 0.2949 宜顺论文网 www.13LW.com5h 冷藏 0.0750 0.1011
35、 0.0341 0.0464 0.2939 6h 冷藏 0.0754 0.1019 0.0338 0.0460 0.2951 7h 冷藏 0.0757 0.1023 0.0332 0.0456 0.2943 8h 冷藏 0.0748 0.1021 0.0324 0.0456 0.2936 9h 冷藏 0.0747 0.1032 0.0331 0.0447 0.3054 10h 冷藏 0.0754 0.1045 0.0331 0.0449 0.3105 11h 冷藏 0.0752 0.1048 0.0334 0.0440 0.3096 12h 冷藏 0.0753 0.1062 0.0329 0.
36、0436 0.3132 13h 冷藏 0.0753 0.1068 0.0328 0.0439 0.3153 14h 冷藏 0.0753 0.1047 0.0336 0.0436 0.3095 15h 冷藏 0.0751 0.1051 0.0335 0.0432 0.3100 16h 冷藏 0.0753 0.1053 0.0337 0.0433 0.3122 17h 冷藏 0.0753 0.1057 0.0335 0.0432 0.3145 18h 冷藏 0.0754 0.1063 0.0324 0.0428 0.3136 19h 冷藏 0.0752 0.1065 0.0324 0.0428 0
37、.3149 20h 冷藏 0.0748 0.1061 0.0325 0.0420 0.3112 21h 冷藏 0.0748 0.1066 0.0337 0.0420 0.3155 22h 冷藏 0.0754 0.1076 0.0329 0.0416 0.3181 23h 冷藏 0.0754 0.1080 0.0332 0.0413 0.3184 24h 冷藏 0.0753 0.1085 0.0331 0.0415 0.3198 回收率（%）0h 冷藏 100.4 100.2 102.7 99.6 99.5 1h 冷藏 99.0 100.0 111.9 97.8 99.9 2h 冷藏 99.2
38、100.9 109.7 97.4 99.4 3h 冷藏 98.8 100.8 108.9 96.3 100.1 4h 冷藏 98.7 101.1 108.7 95.8 99.7 5h 冷藏 99.2 102.0 107.8 95.0 100.1 6h 冷藏 99.6 102.3 106.0 94.2 99.8 7h 冷藏 98.4 102.2 103.4 94.3 99.6 8h 冷藏 98.3 103.3 105.7 92.3 103.6 9h 冷藏 99.2 104.5 105.6 92.9 105.3 10h 冷藏 98.9 104.8 106.5 90.8 105.0 11h 冷藏 9
39、9.0 106.2 105.0 90.1 106.3 12h 冷藏 99.0 106.8 104.8 90.8 107.0 13h 冷藏 99.1 104.8 107.4 90.0 105.0 14h 冷藏 98.8 105.2 106.9 89.2 105.2 15h 冷藏 99.1 105.4 107.6 89.4 105.9 宜顺论文网 www.13LW.com16h 冷藏 99.1 105.7 106.8 89.3 106.7 17h 冷藏 99.2 106.3 103.5 88.4 106.4 18h 冷藏 99.0 106.6 103.4 88.4 106.8 19h 冷藏 98.
40、4 106.1 103.7 86.9 105.6 20h 冷藏 98.4 106.6 107.7 86.8 107.0 21h 冷藏 99.2 107.7 105.0 85.9 107.9 22h 冷藏 99.2 108.0 105.8 85.4 108.0 23h 冷藏 99.1 108.6 105.6 85.8 108.5 24h 冷藏 100.4 100.2 102.7 99.6 99.5 表 18 样品溶液的稳定性（室温条件）检测值（%）储存条件 有关物质 A 有关物质 B 氯甲基氯化 物 单个非特定 杂质 总杂质0h 室温 0.0762 0.1004 0.0315 0.0450 0.
41、2988 1h 室温 0.0765 0.1053 0.0307 0.0442 0.3156 2h 室温 0.0756 0.1126 0.0313 0.0429 0.3439 3h 室温 0.0763 0.1204 0.0310 0.0420 0.3640 4h 室温 0.0742 0.1295 0.0303 0.0391 0.3964 5h 室温 0.0763 0.1392 0.0319 0.0582 0.4081 6h 室温 0.0747 0.1490 0.0303 0.0702 0.4368 7h 室温 0.0777 0.1563 0.0305 0.0835 0.4517 8h 室温 0.
42、0755 0.1656 0.0317 0.0982 0.4730 9h 室温 0.0747 0.1757 0.0303 0.1138 0.4968 10h 室温 0.0749 0.1848 0.0316 0.1283 0.5207 11h 室温 0.0753 0.1953 0.0303 0.1420 0.5418 12h 室温 0.0771 0.2033 0.0303 0.1563 0.5671 13h 室温 0.0763 0.2143 0.0303 0.1742 0.5926 14h 室温 0.0752 0.2229 0.0298 0.1889 0.6036 15h 室温 0.0770 0.
43、2285 0.0313 0.1950 0.6320 16h 室温 0.0765 0.2372 0.0322 0.2087 0.6545 17h 室温 0.0745 0.2449 0.0312 0.2225 0.6693 18h 室温 0.0752 0.2533 0.0304 0.2361 0.6900 19h 室温 0.0757 0.2614 0.0310 0.2487 0.7119 回收率（%）0h 室温 100.4 104.9 97.2 98.3 105.6 宜顺论文网 www.13LW.com1h 室温 99.3 112.1 99.2 95.3 115.1 2h 室温 100.1 119
44、.9 98.2 93.2 121.8 3h 室温 97.4 128.9 95.9 86.9 132.7 4h 室温 100.1 138.6 101.0 129.4 136.6 5h 室温 98.0 148.4 96.1 155.8 146.2 6h 室温 102.0 155.7 96.5 185.5 151.2 7h 室温 99.1 164.9 100.4 218.2 158.3 8h 室温 98.1 175.0 96.2 252.7 166.3 9h 室温 98.3 184.0 100.0 285.1 174.3 10h 室温 98.9 194.5 95.9 315.5 181.3 11h
45、室温 101.2 202.4 96.1 347.3 189.8 12h 室温 100.2 213.4 96.1 387.1 198.3 13h 室温 98.7 222.0 94.5 419.6 202.0 14h 室温 101.1 227.6 99.2 433.3 211.5 15h 室温 100.5 236.2 102.2 463.6 219.0 16h 室温 97.8 243.9 98.9 494.4 224.0 17h 室温 98.6 252.2 96.3 524.6 230.9 18h 室温 99.3 260.3 98.2 552.5 238.3 19h 室温 100.4 104.9
46、97.2 98.3 105.6 由以上数据可知，奥氮平样品溶液冷藏储存条件下 24 小时内稳定，室温下需要进样前溶解。（ 六 ） 耐用性耐用性是为了证明方法的普适性 11。耐用性系指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度，为把方法用于常规检验提供依据。开始研究分析方法时就应考虑其耐用性。如果测试条件要求苛刻，则应在方法中写明 6。在该试验中，通过改变色谱柱品牌、调节流动相比例、调节柱温、调节流速，调节缓冲液浓度等，来寻找影响此方法的关键参数，评估此方法的耐用性。每个系统中，系统稳定后进溶剂、系统适应性溶液、标准溶液、样品溶液。通过对系统适应性参数的考察研究参数变化对系统的影响。表
47、19 改变色谱柱品牌对系统参数结果的影响色谱柱品牌参数 接受标准 Inertsil Agilent Welch分离度 3.0 10.56 5.30 23.91拖尾因子 1.5 1.172 1.134 1.079宜顺论文网 www.13LW.com理论塔板数 / 24539 19335 97976相对保留时间杂质 B 0.3 0.26 0.30 0.23杂质 A 0.8 0.74 0.86 0.63表 20 改变缓冲液 pH 值对系统参数结果的影响缓冲液 PH 值参数 接受标准 2.4 2.5 2.6分离度 3.0 7.36 11.78 5.49拖尾因子 1.5 1.172 1.186 1.23
48、4理论塔板数 / 20698 66450 18983相对保留时间杂质 B 0.3 0.28 0.26 0.29杂质 A 0.8 0.81 0.77 0.85表 21 改变流动相比例对系统参数结果的影响缓冲液/乙腈参数 接受标准A:490/510B:270/730A:520/480B:300/700A:550/450B:330/670分离度 3.0 7.04 5.30 14.40拖尾因子 1.5 1.135 1.134 1.111理论塔板数 / 21090 19335 217132相对保留时间杂质 B 0.3 0.50 0.30 0.25杂质 A 0.8 1.24 0.86 0.82表 22 改变流动相比例对系统参数结果的影响缓冲液
