1、湖南恒生制药股份有限公司 Hunan Hengsheng Pharmaceutical Co.,Ltd. SOP-QC-01-008/02第 1页共 3页文件名称 表面微生物测试标准操作规程 文件编号 SOP-QC-01-008/02编 制 人 审 核 人 批 准 人编制日期 审核日期 批准日期颁发部门 分 发 号 生效日期发送单位 档案室、质量部、化验室变更历史2009年 9月因厂址搬迁进行第一次修订；2012年 6月因新版 GMP、公司名称和组织机构变动进行第二次修订一、目 的： 建立表面微生物检验标准操作规程，确保表面微生物检验结果的准确。二、适用范围：适用于表面微生物检验操作。三、责
2、任 人：QC 检验人员负责本规程的实施，QA 负责人、QC 负责人监督检查。四、内 容： 1、测试方法1.1 方法提要：表面微生物测试可采用棉签擦拭法取样或市售预制 TSA培养皿直接接触采样法，即通过对一定面积的（约 25m2）的表面进行取样后，接种至培养基后，经若干时间，在适宜的生长条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，从而判定洁净环境内表面和操作人员单位面积表面的活微生物数，以此来评定洁净室（区）的洁净度。1.2 所用的仪器、设备和培养基a）一次性采样管；b）培养皿；c）培养基；d）恒温培养箱。1.3 注意事项：1）采样用采样棒及培养皿或培养基均应在有效期内且包装密封完好。2）所有取样操作应
3、在生产关键操作结束后取样。2、测试步骤：湖南恒生制药股份有限公司 Hunan Hengsheng Pharmaceutical Co.,Ltd. SOP-QC-01-008/02第 2页共 3页2.1棉签擦拭法取样2.1.1按标准要求进入相应洁净区指定位置，用灭菌镊子夹取浸有无菌生理盐水（放在灭菌锅中于 121灭菌 20分钟）的无菌棉签，管口处轻轻挤压多余的溶液，擦拭取样点表面 55cm2的范围，来回涂擦 5次，翻转取样棉签，再与前次擦拭移动方向垂直来回涂擦 5次，见：药签擦拭取样图示意图:2.1.2取样要求：取样过程严格控制操作过程微生物的带入，尽可能采用固定力度、擦拭速度和擦拭线路。2.1
4、.3取样后将取样棉签放入装有 10ml采样液的试管中，随即盖上无菌塞，外用牛皮纸包裹，用绳扎紧。在运送和存放过程中保持试管竖直，直至做完菌检。2.1.4将取样后的采样管用力振摇 3分钟以上，将管内溶液照微生物限度检查法（薄膜过滤法）进行检查，置于 3035 oC恒温培养箱中，培养 72小时，计数。2.2表面接触皿取样2.2.1 选择取样点后，打开市售预制 TSA培养皿，对取样范围表面进行接触取样，接触时间不少于 5秒钟，取样完成后立即加盖,并用消毒剂对取样点进行表面擦拭。2.2.2 将取样后的培养皿用其所附包装袋包装好后，置于 3035 oC恒温培养箱中，培养 72小时，计数。3、取样对象及取
5、样点3.1 洁净区操作间及设备表面3.1.1 A级区：每班 3个样品，在关键操作点任意取样（灌装机轨道、台面，胶塞振荡斗、胶塞下料轨道、理瓶盘、触摸屏、冻干箱搁板、周转盘、人手须接触的容器具表面、不锈钢桶盖提手处） 。3.1.2 B级洁净区：每班任意在工作面取 2-3个样品（回风口上方墙面、地面、人物流门把手） 。湖南恒生制药股份有限公司 Hunan Hengsheng Pharmaceutical Co.,Ltd. SOP-QC-01-008/02第 3页共 3页3.1.3 C、D 级洁净区：在关键操作点设备、容器具表面或操作间表面取 3-5个点。3.2操作人员人体表面：任意取一位操作工人，双手手指及掌内侧、双手前臂、前胸或腹、眼镜、前额、口罩等处任取 2-3个点4、监测标准：合格标准洁净度等级 接触（ 90cm）CFU/皿五指手套CFU/手套警戒限CFU/皿（手套）纠偏限CFU/皿（手套）A级 1 1 / 0B级 5 5 3 4C级 25 / 22 24D级 50 / 45 48
