1、利巴韦林利巴韦林（ribavirin，RBV） ，又名病毒唑、三氮唑核苷，化学名 1-D-呋喃核糖基-1H-1,2,4-三氮唑-3-羧酰胺，分子式：C8H 12N4O5，结构式如右下图所示。该药是一种高效广谱核苷类的抗病毒药物，已列入国家基本药用品种，对至少 12 种 RNA 病毒和 10 种 DNA 病毒有强效的抑制作用。 (R)(R)(S)(R)OHONHOOHNOH2N1 发酵法1.1 反应原理2-8在 D-葡萄糖，肌苷，5- 腺苷或 D-核糖的培养基中，加入 1,2,4-三氮唑-3- 羧酰胺（TCA）和生物菌种，室温条件下培养 2 8 d，即可制得利巴韦林，但转化率不高，仅在 40%
2、60%。其中以 D-葡萄糖为原料的制备简式如下，式中所用的生物菌种为：短杆菌、棒状杆菌、节核杆菌、微球菌或杆菌等。1.2 优缺点发酵法的优越性是可以直接从核糖或 D-葡萄糖制备目标产物，操作简单，三废易于治理，能耗小。不足之处在于：（1 ）微生物的培养一般在 20 40下进行，容易产生杂菌；（2）三氮唑核苷容易分解，收率低；（3）必须长时间培养，发酵液中的各种核苷、三氮唑核苷磷酸化物及其它代谢产物，使精制分离困难；（4）必须每次培养微生物，成本高；（5）原料单耗大，如葡萄糖用量 5601，TCA 用量 191。可见该法还需进一步深入研究。2 酶促法2.1 反应原理以肌苷，鸟苷，黄苷或 D-核糖
3、 -1-磷酸酯与 1,2,4-三氮唑-3-羧酰胺（TCA）为原料，在核苷磷酸酯酶（PN Pase）的作用下合成利巴韦林，转化率 54.1% 95%不等。以鸟苷为例，其反应式如下。式中所用的核苷磷酸酯酶（PN Pase ）可由乙酰短杆菌 ATCC39311 或 TQ-952作酶源，培养获得。2.2 优缺点酶促法9-20具有以下优点：（1）在微生物不增殖条件下，以较高的温度（40 60）反应，几乎没有杂菌污染，三氮唑核苷的分解反应受到抑制，收率提高。 （2）反应时间短，副产物少，分离精制容易。 （3）核糖供体可以从多种核苷、核苷酸中选择，来源广泛。（4）操作简便、环境污染小、能耗小。酶促法的工业化
4、市场前景广阔。美国 ICN 制药公司在上世纪 80 年代末就开始用酶促法实现工业生产利巴韦林，但总收率较低，仅 55% 21。我国在酶促法合成利巴韦林研究中提出了双酶法制备22-23，使转化率提高到 95%以上。湖北潜江制药股份有限公司采用双酶法生产利巴韦林的产率达 85%，成本降低了 50%，年产能力达 350 吨24 。但为使酶促法趋于完善，在酶源的制备、保存和重复利用等方面还需进一步研究。3 化学法国内外研究和报道最多的就是利巴韦林的化学法合成。化学法总体可分为卤代糖法、肌苷法、腺苷法和核苷酸法四种25，主要经由酰化、缩合与氨解三步完成。3.1 肌苷法该法是化学法中研究最为广泛的，其以肌
5、苷为起始原料，经酰化反应制得四乙酰核糖；然后与 1,2,4-三氮唑-3- 羧酸甲酯（ TCM）熔融缩合，再经氨 -甲醇溶液氨解，得到目标产物。反应式如下： (R)(R)(S)(R)OHNHHNOH (R)(S)()(S)OAcAcAcc肌 苷 酰 化 缩 合 (R)(S)()(R)OAcONcOAcH2 氨 解 (R)(R)(S)()OHONOHH2缺点：高温下（162 165）易使四乙酰核糖分解，影响收率和质量优点：1. BSA（N,O-二(三甲基硅烷基 )乙酰胺）作硅烷化试剂，SiON(E)SiCF3SO2OSi(CH3)3 作催化剂下缩合，使收率提高到 83.4%。2 .献 31-33中
6、提到使用 SnCl4 作催化剂，且反应条件温和，易操作。3.2 核苷酸法该法以核苷酸为起始原料，先经水解制得核苷，再经乙酰化反应制得四乙酰核糖，然后经缩合、氨解反应合成目标产物。反应式如下。文献29对此进行了较为详尽得报道，反应时间长，收率为 51%。可见，核苷酸法制取利巴韦林还有待进一步改进。3.3 腺苷法该法以腺苷为起始原料，先切断与乙酰化一步实现，制得四乙酰核糖，再经缩合、氨解制得目标产物。3.4 卤代糖法该法是先将四乙酰核糖溴化物与三氮唑羧酸甲酯（TCM）高温缩合反应，再经氨解反应制得目标产物。文献1对此进行过报道，反应式如下。此方法由于反应时间长，收率低，缩合反应温度高，易使四乙酰核糖溴化物分解等缺陷，目前已不再使用。4 结论目前利巴韦林的合成主要包括化学法、酶促法与发酵法三种；其中化学法研究与报道最为广泛；酶促法具有很大的工业化市场前景；发酵法仍存在许多不完善之处，还有待进一步研究。
