1、精品文档教学准备1 .教学目标（一）知识与技能1、识记固定化技术的常用方法2、理解固定化酵母细胞的制备过程3、知道固定化酶的实例（二）过程与方法1、固定化细胞技术2、制备固定化酵母细胞的过程（三）情感、态度与价值观通过固定化技术的发展过程，培养科学探究精神，同时领会研究的科学方法。2 .教学重点/难点1、课题重点：制备固定化酵母细胞2、课题难点：制备固定化酵母细胞3 .教学用具教学课件4 . 标签教学过程（一）引入新课在应用酶的过程中，人们发现了一些实际问题：酶通常对强酸、强碱、高温和有机溶 剂等条件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很难回收，提高了生产成本，也可能影响产品 质量。在本课题中，我们
2、将动手制备固定化酵母细胞，体会固定化酶的作用。如果你是工 程技术人员，你如何解决这个问题？（二）进行新课1、基础知识1.1 固定化酶技术。即将酶固定在一定空间内的技术(如固定在不溶于水的载体 上)。固定化酶是指限制或固定于特定空间位置的酶，具体来说，是指经物理或化学方法 处理，使酶变成不易随水流失即运动受到限制，而又能发挥催化作用的酶制剂。1.2 固定化酶技术的优点：(1)使酶既能与反应物接触，又能与产物分离；(2)固定在载体上的酶可以被反复利用。2、固定化酶的应用实例一一生产高果糖浆(1)高果糖浆的生产原理I葡萄糖I葡萄糖异构酶果-I(2)葡萄糖异构酶固定：将葡萄糖异构酶固定在颗粒状载体上，
3、装入反应柱中。(3)高果糖浆的生产操作(识图45反应柱)：从反应柱上端注入葡萄糖溶液，从下端流出果糖溶液，一个反应柱可连续使用半年。(4)高果糖浆是果糖含量为 42%左右的糖浆。作为蔗糖的替代品，高果糖浆不会像蔗 糖那样诱发肥胖、糖尿病、龈齿和心血管病，对人的健康有利。(5)生产高果糖浆需要葡萄糖异构酶；其作用是将葡萄糖转化为果糖；这种酶稳定性 好，可持续发挥作用。3、固定化技术的方法(识图 4 6固定方法)：细胞中含有一系列酶，在细胞正常生命活动的过程中，通过代谢产生所需要的代谢产 物。利用物理或化学方法将细胞固定在一定空间的技术。将酶和细胞固定化方法有包埋法、化学结合法和物理吸附法。有。一
4、种酶只能催化一 种化学反应，而在生产实际中很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能进行，所以操 作比较麻烦。可采用固定化细胞技术。【比较】酶和细胞的固定方法和特点固定对象甑细胞适宜固定法化学结合法、物理吸附法包埋法特点体积小，固定一种的中包理法容易丢失体极大，固定一系列幅。雎 以化学站台和唳明R思考13对固定酶的作用影响较小的固定方法是什么？吸附法。R思考23将谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的发酵过程变为连续的酶反应，应当固定(酶、细胞)；若将蛋白质变成氨基酸，应当固定(酶、细胞)。4、固定细胞的材料：固定细胞时应当选用不溶于水的多孔性载体材料，如明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸 纤维素和聚丙烯酰胺等5
5、、实验设计5.1 制备固定化酵母细胞(1)酵母细胞的活化：1g干酵母+ 10mL蒸储水一50mL烧杯一搅拌均匀一放置1h,使 之活化。R思考33活化是指让处于休眠状态的微生物重新恢复正常生活状态的过程。(2)配制CaCh溶液：0.83gCaCl 2+150mL蒸储水一200mL烧杯一溶解备用。(3)配制海藻酸钠溶液：0.7g海藻酸+ 10mL水一50mL烧杯一酒精灯微火(或间断)加热，并不断搅拌，使之溶化 一蒸储水定容到10mLR思考43微火加热并不断搅拌的目的是什么？防止海藻酸南焦糊。(4)海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合：将溶化的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入活化 酵母细胞液，搅拌后吸入到注射器
6、中。R思考53为什么要海藻酸钠溶液冷却后才能加入酵母细胞？防止高温杀死酵母细胞。(5)固定化酵母细胞：以恒定速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到CaCh溶液中，形成凝胶珠状颗粒。5.2固定化酵母细胞的发酵(6)冲洗：将固定的酵母细胞凝胶珠用蒸储水冲洗23次。(7)发酵：150mL10%葡萄糖+固定化酵母细胞 一200mL锤形瓶一密封一25c发酵 24h。R思考63发酵过程中锥形瓶为什么要密封？酵母菌的酒精发酵需要缺氧条件。R思考73锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的？酵母菌进行无氧呼吸产生的。R思考83在利用固定化酶或固定化细胞进行生产的过程中，需要无菌操作码？ 聿必 而 Q5.3发酵操作殊J Ca
7、Cla溶液酵母细胞的活制海蒸酸讷溶液将樨霆段钠溶淞与静母邺庵的潮合漕精发酵一冲洗提胶珠一固定化酵母钿胞酵母刈胞固宝北固定出薛出6、结果分析与评价6.1 观察凝胶珠的颜色和形状如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数 目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败， 需要再作尝试。6.2 观察发酵的葡萄糖溶液利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可以看到产生了很多气泡，同时会闻到酒味补充：直接使用酶、固定化酶和固定化细胞催化的优缺点：类型优点不足直接使用能催化效率高，低耗就母污染等心，对环境条件寺常触感，容易失活： 溶液中的酶很雅回收，不
8、能被再次利 用，提高7生产成本工反应后南会漏在1 产物中，可能影响产品质量。固定化酹酶没能与反应物搪触， 又与产物分离*同时，B 定在载体上的曲还可以延莅 复利用。-神馥只能催化一轴化学反应，而 在生产实践中，很多芦柳的形成都通过 一系列的豳促反应才能得到的一固定化细胞成本低，操作更咨易“固定后的醯或郛胞与反应物不答 易接近，可能导致反应效果下降等口注意事项1 .配制海藻酸钠溶液：小火、间断加热、定容，如果加热太快，海藻酸钠会发生焦 糊。2 .海藻酸钠溶液与酶母细胞混合：冷却后再混合，注意混合均匀，不要进入气泡3 .制备固定化酵母细胞：高度适宜，并匀速滴入4 .刚形成的凝胶珠应在 CaCL2溶
9、液中浸泡一段时间，以便 Ca2冉Na+充分交换，形成 的凝胶珠稳定。检验凝胶珠是否形成，可用下列方法：用镣子夹起一个凝胶珠放在实验桌 上用手挤压，如果不容易破裂，没有液体流出就表明成功地制成了凝胶珠，还可以用手将 凝胶珠在实验桌上用力摔打，如果凝胶珠很容易弹起，也表明制备的凝胶珠是成功的。5 .3凝胶珠的颜色和形状如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数 目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败， 需要再作尝试。课堂小结通过本节课题三酵母细胞的固定化内容的学习，要识记固定化技术的常用方法，理解 固定化酵母细胞的制备过程，知道
10、固定化酶的实例。掌握固定化酶和固定化细胞的特性， 并能根据各自的特点合理运用。固定化酶的技术要求比较高，因此在教学过程中重点介绍 固定化酵母细胞的操作。对于固定化酶的作用、原理及其在生产中的应用，主要是让学生 通过生产实例来了解。教师在教学时可以采用让学生能够阅读自学的方式。此外还要多结 合身边实际进行学习。利用生活中的实例来调动学生的学习兴趣。通过对酵母细胞的固定化的研究，激发学 生对生物科学的兴趣，会让问题的讨论更加激烈，会让每个学生都认真地去思考。充分利 用了教材资源、本地资源和学生收集的图片资料等资源，增强学生理论联系实际能力，分 析资料的能力以及探究解决问题的能力，培养学以致用的意识。板书专题四酶的研究和应用酵母细胞的固定化一、基础知识1 .固定化酶的应用实例2 .固定化细胞技术二、实验操作1 .制备固定化酵母细胞1.1 酵母细胞的活化1.2 配制CaCL2溶液1.3 配制海藻酸钠溶液1.4 海藻酸钠溶液与酵母细胞混合1.5 固定化酵母细胞2 .用固定化酵母细胞发酵6欢血下载精品文档3发酵操作三、结果评价与分析7欢迎下载 。精品文档欢迎您的下载，资料仅供参考！致力为企业和个人提供合同协议，策划案计划书，学习资料等等打造全网一站式需求9欢血下载
