微生物的分离与纯化,指导教师:王海丽,实验目的、要求,(1)学习并掌握细菌、放线菌、霉菌和酵母菌等四大类微生物的稀释分离、划线分离等技术。 (2)学习从样品中分离、纯化出所需菌株。 (3)了解四大类微生物的培养条件和培养时间。 (4)学习平板菌落计数法(下次实验)。 以细菌为例,实验原理,纯种分离技
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1、微生物的分离与纯化,指导教师:王海丽,实验目的、要求,(1)学习并掌握细菌、放线菌、霉菌和酵母菌等四大类微生物的稀释分离、划线分离等技术。 (2)学习从样品中分离、纯化出所需菌株。 (3)了解四大类微生物的培养条件和培养时间。 (4)学习平板菌落计数法(下次实验)。 以细菌为例,实验原理,纯种分离技术是微生物学中重要的基本技术之一。分离:从混杂的微生物群体中获得单一菌株纯培养的方法。纯种(纯培养):一株菌种或一个培养物中所有的细胞或孢子都是由一个细胞分裂、繁殖而产生的后代。 微生物的分离与纯化技术的应用:分离。
2、微 生 物 实 验,实验目录,一、显微镜油镜使用及细菌的形态观察 二、细菌的简单染色和革兰氏染色 三、细菌的芽胞染色及放线菌形态观察 四、细菌的鞭毛染色及蓝细菌形态观察 五、真菌形态观察 六、微生物细胞的大小测定及显微计数,实验目录,七、培养基的制配与灭菌 八、微生物的分离与活菌计数 九、微生物的生理生化鉴定1配制培养基 十、微生物的生理生化鉴定配制培养基,实验注意事项,一、用完显微镜等用品要清理归位,显微镜不能沾水; 二、染色试剂只能在水槽边用,不能将正在染色的装片拿到中央实验岛; 三、用火用电要小心谨慎,注意安。
3、实验三 微生物的分离、纯化与接种培养,一、实验目的 二、实验原理 三、实验器材(详略) 四、实验内容步骤 五、思考题,掌握,倒平板的方法,几种常用分离纯化微生物的基本操作技术,实验目的,平板菌落计数的基本原理和方法,(一)微生物的分离与纯化的概念,实验原理,从混杂的微生物群体中获得只含 有某一种或某一株微生物的过程,实验原理,(二)分离纯化微生物的常用方法,1.简易单细胞挑取法,单细胞挑取法可以直接得到纯培养。它需要特制的显微操纵器来分离单细胞,或直接在普通显微镜下利用低倍镜分离单孢子的方法。,2.平板分离法,选择适合。
4、08级微生物学实验考试试题解答PPT,PPT制作人:36号 龚鹏 解说人 :35号 张青36号 龚鹏37号 曾泽文,第八组,问题:,某细菌肥料是由相关的不同 组成的一个菌群并通过混合培养得到的一种产品。 的多少是质量好坏的一个重要标志之一,请设计一个实验方案来检测该细菌肥料的质量?在实验过程中为减少实验误差提高数据的可靠性,应该注意那些操作步骤?,微生物,活菌数,我们的思路,一、题目分析 二、实验设计 三、解题总结,一、题目分析,某细菌肥料是由相关的 组成的一个菌群并通过混合培养得到的一种产品。 的多少是质量好坏的一个重要标志之一,。
5、盖臀俞咆兽灶垄芭乖鲸媒易艳凯粹糊胞刨悬善讨躬兴鲸槛溯陇仰漂啥慌名微生物实验内容汇总微生物实验内容汇总医学微生物学实验微生物学教研室亏邢们枪渣诀茬文唤胁棕凝帝鞭角晨郴条审趋缴拖述异抗筑墙骤李抉诀障微生物实验内容汇总微生物实验内容汇总第一次 实验内容l细菌基本形态观察(球菌、杆菌、螺形菌)l细菌特殊结构观察(荚膜、鞭毛、芽胞)l革兰染色法窑验瘪推条阎英嫉畏骇陋伍践庙逆迫姆熔波斡耪秽缕遗寞超蜀遍户联诀欲微生物实验内容汇总微生物实验内容汇总1.细菌的三种基本形态l球菌:葡萄球菌。l杆菌:大肠杆菌。l螺形菌:霍乱。
6、微生物生理生化实验实验,微生物学教研室,一、教学目的与要求1 要求学生了解IMViC试验的原理及在肠道菌鉴定中的意义。2 掌握IMCiV及硫化氢试验的操作。教学时数:6学时,二、试验原理,微生物体内各种酶系统控制的复杂多样的生化反应完成 ;测定微生物某些酶类的有无、对底物作用与否、反应的条件、反应的产物及代谢方式都属于生理生化实验内容。在培养基内或在培养完成之后加入特定的指示剂就可确定所发生的生理生化反应类型。常用的试验:糖代谢试验、氨基酸和蛋白质代谢试验、氮源和碳源的利用试验及酶的试验等。,IMViC是四个生理生化反应。
7、微生物学综合实验,实验一 土壤中微生物的分离与计数 实验二 理化因子对微生物的影响 实验三 环境条件对微生物生长的影响,实验一 土壤中微生物的分离与计数,实验目的,掌握从土壤中分离、计数细菌和霉菌的方法,实验原理,土壤是微生物生活的大本营,是寻找和发现有重要应用潜力的微生物的主要来源。 不同土样中微生物的种类和数量各不相同,一般土壤中细菌的数量最多,其次是放线菌和霉菌。 分离微生物时,常根据目的微生物特殊的营养要求,供给只适于他们生长而不利于其他微生物生长的特殊生存条件,或加入某种限制因子抑制其他微生物的生长。
8、实验四 细菌的涂片及简单染色法和 革兰氏染色法(经典法),【目的要求】,学习并了解简单染色法的原理,并掌握其操作方法。 掌握微生物涂片、染色的基本技术和无菌操作技术。 了解革兰氏染色法的原理,并掌握其操作方法。 了解革兰氏染色法在细菌分类鉴定中的重要性。 学习并掌握微生物涂片、染色的基本技术和无菌操作技术。 巩固显微镜(油镜)的使用方法。,【基本原理】,一、细菌的涂片及简单染色法基本原理细菌的涂片和染色是微生物学实验中的一项基本技术。所谓简单染色法是利用单一染料对细菌进行染色的一种方法。此法操作简便,可用以。
9、实验六 细菌的液体接种法和生长曲线的测定,【目的要求】,了解细菌生长曲线的持点及测定原理;掌握用比浊法测定细菌的生长曲线。,【基本原理】,将一定数量的细菌,接种于适宜的液体培养基中,在适温下培养,定时取样测数,以菌数的对数为纵坐标,生长时间为横坐标,作出的曲线称为生长曲线。该曲线表明细菌在一定的环境条件下群体生长与繁殖的规律。一般分为延缓期、对数期、稳定期及衰亡期四个时期,各时期的长短同菌种本身特征、培养基成分和培养条件不同而异。比浊法是根据细菌悬液细胞数与混浊度成正比,与透光度成反比关系,利用光电。
10、食品微生物实验,实验一 培养基的配制、分装和灭菌,目录,实验目的,实验原理,实验器材,实验方法,思考题,注意事项,实验结果,实验目的,了解配制微生物培养基的原理和培养基的种类;掌握配制培养基的一般方法和操作步骤;懂得高压蒸汽灭菌的基本原理及使用注意事项; 了解几种常用灭菌方法。,实验原理,培养基是按照微生物生长繁殖或积累代谢产物所需的各种营养物质,用人工方法配制而成的一种基质。它包括碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水六类营养要素。,根据据组成成分可分为: 1. 合成培养基:由各种纯化学物质按一定比例配制而成。 2.。
11、实验一 玻璃仪器的清洗与包扎、干热灭菌,一、玻璃器皿的清洗和灭菌(一)、新购的玻璃器皿 1、先用热肥皂水刷洗,流水冲净。 2、再浸泡于的盐酸中数小时,最后用流水 冲净。,二、玻璃仪器的干热灭菌,(1)将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥后,用报纸包好,或装入特制的铁筒中。 (2)将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中,彼此间留有一定的空隙以便流通空气。 (3)关紧箱门,打开排气孔接上电源。 (4)待箱内空气排出到一定程度时,关闭上排气孔,继续加热至一定温度后,调节温度控制旋钮固定温度,在160165保持2小时即可。 (5)待自然降温冷却后(60。
12、微生物学实验技术,第一章 普通光学显微镜的使用,一、普通光学显微镜 现代普通光学显微镜利用目镜和物镜两组透镜系统来放大成像,由机械装置和光学系统两大部分组成 。在显微镜的光学系统中,物镜的性能最为关键,它直接影响着显微镜的分辨率。,油镜:放大倍数最大,可达100x ,使用时需要在载玻片和镜头之间滴加镜油。1)增加照明亮度 2)增加显微镜的分辨率,二、使用前准备: 1)光源调节 自带光源或自然光源 2)目镜调节 双筒显微镜的目镜间距可以适当调节,左目镜上一般还配有屈光度调节环,可以适应眼距不同或双眼视力有差异的观察者。
13、实验二 斜面接种,用平板划线法分离菌种与微生物培养,【课前预习】微生物纯种分离有哪些方法?,【目的要求】,1.懂得微生物接种技术的重要性与应用面; 2.正确掌握无菌操作法移接斜面菌种的步骤与方法; 3.了解平板划线法分离菌种的基本原理; 4.熟练掌握平板划线法的操作方法; 5.掌握超净工作台的使用方法。,【基本原理】,一、斜面接种与培养基本原理操作为:用灭菌的接种环取单个菌落或少许细菌,从培养基斜面底部向上划一条直线,然后从底部向上作连续曲线划线,一直划到斜面顶端。 二、用平板划线法分离菌种基本原理步骤:用接种环在。
14、1 微生物大小测定2 微生物数量测定3 大肠杆菌生长曲线的测定 实验五 学习使用镜台测微尺和目镜测微尺 在显微镜下测定微生物大小 实验 一 微生物大小的测定 一 目的要求 二 实验原理 镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片 一般是lm。
15、实验五 微生物数量的测定,林标声,实验五 微生物数量的测定,一、实验目的1、明确血球计数板计数的原理 2、掌握测定酵母细胞总数、出芽率和死亡率的技术,二、实验原理,镜检计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液,如有杂菌或杂质常不易分辨。菌体较大的酵母菌或霉菌泡子可采用血球计数板;一般细菌则采用彼得罗夫霍泽(Petroff Hausser)细菌计数板。两种计数板的原理和部件相同,只是细菌计数板较薄,可以使用油镜观察。而血球计数板较厚,不能使用油镜,故细菌不易看清。,二、实验原理,血球计数板是一块特制的厚载玻片,载玻片上有4条。
16、微生物学实验,指导老师:袁洪生李兰芬臧淑萍,实验一 细菌的形态观察,目的要求:见实验教程 P.16实验二-1基本原理:见实验教程P.16 实验二-1,实验内容,1.实验室环境及体表微生物检查(检查手指、头发、钱币等携带微生物的情况4人一个培养皿) 2.记录三种细菌的菌落特征 3.绘制三种细菌个体形态图,并对革蓝氏染色结果小结 4思考题:实验2-(一)、(二)题,绘制三种细菌个体形态图,并对革蓝氏染色结果小结,实验二 放线菌的形态观察,目的要求:见实验教程P.24 实验二-3 基本原理:见实验教程P.24 实验二-3,实验内容,1.记录三种放线菌的菌落特征。
17、破伤风痉挛素的致病作用与破伤风抗毒素的保护作用,组别:8组,实验材料,(1) 菌种:破伤风梭菌 (2) 试剂与药物:破伤风抗毒素、破伤 风痉挛毒素、小白鼠、酒精与碘酒 (3) 器材:无菌注射器、无菌棉签,实验目的,了解并掌握破伤风梭菌的致病机制和免疫性,实验方法,1.实验组:取小鼠一只,于一侧后腿肌肉注射稀释毒素滤液0.1ml。 2.对照组:另取一只小鼠,做好标记,于腹腔注射破伤风抗毒素0.1ml,10min后于该小鼠后腿肌肉注射同样稀释毒素滤液0.1ml。,实验预测结果,注射破伤风抗毒素的小鼠(有标记)可能不会发病,而未注射破伤风抗毒素的小鼠。