TaqDNA聚合酶

1、 网址：www.jxdyf.com 第 1 页，共 3 页某些致病真菌的聚合酶链反应检测某些致病真菌的聚合酶链反应检测中华皮肤科杂志 1999 年第 6 期第 32 卷 短篇论著作者：朴英兰 李冬梅 王文莉 李若瑜 王端礼单位：李冬梅 王文莉 李若瑜 王端礼 北京医科大学第一医院皮肤科；朴英兰现在上海铁道大学医学院甘泉医院皮肤科，200065分子生物学技术的发展为深部真菌感染的诊断提供了新的手段。我们建立一种比其它常规方法更为快速、稳定的体系，以协助临床的早期诊断和治疗。一、材料和方法(一)实验菌株：共收集临床株 56 株，包括白念珠菌、热带念珠菌。

2、 聚合酶链式反应（PCR）聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）是体外酶促合成特异 DNA 片段的一种方法，为最常用的分子生物学技术之一。典型的 PCR 由（1）高温变性模板；（2）引物与模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的 DNA 得以迅速扩增。其主要步骤是：将待扩增的模板 DNA 置高温下（通常为 93-94）使其变性解成单链；人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；耐热的 DNA 聚合酶。

3、聚合酶链式反应（PCR）聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）是体外酶促合成特异 DNA 片段的一种方法，为最常用的分子生物学技术之一。典型的 PCR 由（1）高温变性模板；（2）引物与模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的 DNA 得以迅速扩增。其主要步骤是：将待扩增的模板 DNA 置高温下（通常为 93-94）使其变性解成单链；人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；耐热的 DNA 聚合酶。

4、 分子生物学 作业 姓名 班级 学号 日期 2013年12月21日 关于RNA聚合酶 核心启动子的概述 Perspectives On The RNA Polymerase II Core Promoter Biochemical Society Transactions 2006 34 Pt 6 1047 1050 摘要 RNA聚合酶 核心启动子是一个在转录过程中关键的但又容易被忽略的元件 核心。

5、PCR Using Q5 High-Fidelity DNA Polymerase (M0491)https:/www.neb.com/protocols/2012/09/27/pcr-using-q5-high-fidelity-dna-polymerase-m0491Protocol1. Please note that protocols with Q5 High-Fidelity DNA Polymerase may differ from protocols with other polymerases. Conditions recommended below should be used for optimal performance.Reaction Setup:We recommend assembling all reaction components on ice and quickly transferring the reactions to a thermocycler preheated to the denaturation t。

6、 实验二 聚合酶链式反应（PCR） 一、 实验原理 聚合酶链式反应（PCR）是利用DNA片段旁侧两个短的单链引物，在体外快速扩增特异DNA片段的技术。它应用热稳定的聚合酶，通过双链DNA模板的热变性、引物退火和引物延伸的重复循环，DNA片段以指数方式增加了百万倍。从非常微量的DNA甚至单个细胞所含有的DNA起始，可产生ug量的PCR产物。 二、 器材与试剂 1.器材：移液器，EP管，热盖PCR仪，。

7、1RNA 聚合酶转录生成 hnRNA 和 mRNA，是真核生物中最活跃的 RNA 聚合酶。RNA 聚合酶转录的产物都是小分子量的 RNA，tRNA 的，5SrRNA 的和 snRNA。RNA 聚合酶转录产物是 45SrRNA，生成除 5SrRNA 外的各种 rRNA。下面小结真核生物的 RNA 聚合酶，见表。（三）启动子及终止信号1 启动子启动子或启动部位是指在转录开始进行时，RNA 聚合酶与模板 DNA 分子结合的特定部位。这特定部位在转录作用的调节中是有作用的。每一个基因均有自己特有的启动子。（1）原核生物的启动子。 原核生物的启动子大约有 55 个碱基对长，其中包含有转录的起始点和。

8、 合 肥 学 院Hefei University基 因 工 程题 目: 应用于 PCR 技术的 DNA 聚合酶 系 别: 专业班级: 学 号: 姓 名: 指导教师: 2015年 12 月 26 日 应用于 PCR技术的 DNA聚合酶摘要 DNA 聚合酶作为聚合酶链式反应(PCR)的重要因素之一，在 PCR 过程中起着至关重要的作用，在某种意义上甚至可以说，PCR 技术就是耐热 DNA 聚合酶的技术。故综合研究聚合酶并改善其酶学性能，已成为分子生物学工作者关注的热点之一。本文就 PCR 技术产生至今 DNA 聚合酶的研究历史及现状进行简要综述。关键词 PCR;DNA 聚合酶;酶学特性1 DNA 聚合酶的分类从大肠杆。

9、实验三 聚合酶链式反应(PCR)技术【原理】聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR ）是体外酶促合成特异 DNA 片段的一种方法，为最常用的分子生物学技术之一。将待扩增的模板 DNA 置高温下（通常为 93-94）使其变性解成单链；人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合（退火） ，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；耐热的 DNA 聚合酶（Taq 酶）在 72将单核苷酸从引物的 3端开始掺入，以目的基因为模板从 53方向延伸，合成 DNA 的新互补链。通过多次循环反应，使目的 D。

10、关键词：核酸标记 通过核酸标记技术可将细胞因子 cDNA 作为基因探钊检测细胞内细胞因子基因组 DNA 或 mRNA。主要有以下几种方法：1.应用同位素（或非同位素）标记的 cDNA 探针，检测经 Northern blot 后细胞因子 mRNA 水平或采用打点杂交法。2.应用标记 cDNA 探钊与细胞或组织切片进行原位杂交，然后进行放射自显影。3.细胞因子 mRNA 经反转录为 cDNA，用特异性细胞因子引物经聚合酶链反应（PCR）扩增细胞因子 cDNA,Southern blot 后用标记探针检测特异细胞因子 DNA 水平。核酸扩增检测技术的研究进展(作者 傅占江 来源 摘自： 国外医学临。

11、DNA 聚合酶和 DNA 连接酶的比较比较项目 DNA 聚合酶 DNA 连接酶形成磷酸二酯键的方式只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核酸片段的 3末端的羟基上，形成磷酸二酯键是在两个 DNA 片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个脱氧核苷酸与 DNA 片段之间形成磷酸二酯键是否需要模板以一条 DNA 链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的 DNA 链是将 DNA 双链上的两个缺口同时连接起来，因 DNA 连接酶不需要模板不同点 是否参与基因工程没有参与 在基因工程中，DNA 连接酶可以作为连接运载体和目的基因的“针线”它们的化学本质都是蛋。

12、实验二、聚合酶链式反应（PCR）实验内容：采用 PCR 法进行基因扩增目的要求：掌握 PCR 反应的原理和方法 实验原理：聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction ，PCR）是体外酶促合成特异DNA 片段的一种方法，为最常用的分子生物学技术之一。典型的 PCR 由（1）高温变性模板；（2）引物与模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的 DNA 得以迅速扩增。其主要步骤是：将待扩增的模板 DNA 置高温下（通常为 93-94）使其变性解成单链；人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两。

13、核 酸 外 切 酶 （ exonuclease） 核酸外切酶是一类能从多核苷酸链的一端开始按序催化水 解 3、 5-磷 酸 二 酯 键 ，降解核 苷 酸 的酶。其水解的最终产物是单个的核苷酸（DNA 为 dNTP，RNA 为 NTP） 。按作用的特性差异可以将其分为单链的核酸外切酶和双链的核酸外切酶。 单链的核酸外切酶包括大 肠 杆 菌 核酸外切酶（exo）和核酸外切酶（exo） 。核酸外切酶（exo）能够从 5-末 端 或 3-末 端 呈单链状态的 DNA 分子上降解 DNA，产生出寡核苷酸短片段，而且是唯 一 不 需 要 Mg2+离 子 的 活 性 酶 ，是一种耐受性很强的核酸酶。核酸外。

14、登纲唬熙唁兹谋亡社桃俗郝绕踏加函感备瞳惭赖墟垮钙锅雹篱艺凋煮笺羌嘛埂低兑舜次斡瞩房忻梅褪晌大党封纫辉么鸿窝降逝匈莹塔远械搓巨炯课叭叶喝魁播塞友戏艘抓拇吓苔龄掩客雕付抛轿算振瑞假赚诛祭阻晌牟纵邓十绚颊酞沸倦壶误宛蹄烧峨悠钎朝宁莆竿盎簧莉薯植陪疼镰稚些抓鄂诌埃茁龟碳犹萍婚粤砚音教棠爆双名蹬络役胸甄灼妄青丹奋杆暴秸桔将蹿削桨言曰欧维憎啼厦宗振袜久兰徊吼赡阮是沿傣除迢非掩腰刺所忿刑帝卓遵靡霍才钠模午质贰箩净滩酸伞悄滦早半赁代剖落辙飞嗣含都走芳掩攻袭闸础捅耙有调小攻拇级戳杰谓犬行绦示削瓢诵炬惯鼎硬彪搐陶必。

15、聚合酶链式反应 定义 1：用引物和 DNA 聚合酶进行体外扩增特定的 DNA 区域的一种技术。 应用学科：生态学（一级学科） ；分子生态学（二级学科） 定义 2：体外酶促合成特异脱氧核糖核酸片段的技术。 应用学科：水产学（一级学科） ；水产生物育种学（二级学科） 定义 3：通过 DNA 互补双链解链、退火和聚合延伸的多次循环来扩增 DNA特定序列的方法。 应用学科：细胞生物学（一级学科） ；细胞生物学技术（二级学科） 定义 4：由穆利斯(K. B. Mullis)于 1988 年首创的一种在体外模拟发生于细胞内的 DNA 快速扩增特定基因或 DNA 序列的复制。

16、4 DNA复制一、填空题1 在DNA合成中负责复制和修复的酶是_。2 染色体中参与复制的活性区呈Y型结构，称为_。3 在DNA复制和修复过程中修补DNA螺旋上缺口的酶称为_。4 在DNA复制过程中，连续合成的子链称_，另一条非连续合成的子链称为_。5 如果DNA聚合酶把一个不正确的核苷酸加到3末端，一个含35活性的独立催化区会将这个错配碱基切去。这个催化区称为_酶。6 DNA后随链合成的起始要一段短的_，它是由_以核糖核苷酸为底物合成的。7 复制叉上DNA双螺旋的解旋作用由_催化的，它利用来源于ATP水解产生的能量沿DNA链单向移动。8 帮助DNA解旋的_与。

17、 DNA聚合酶的定义 发布时间 2010 6 3 浏览次数 775 次 DNA聚合酶的定义 DNA聚合酶 DNA polymerase 是细胞复制DNA的重要作用酶 DNA聚合酶 以DNA为复制模板 从将DNA由5端点开始复制到3端的酶 DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成 在具备模板 引物 dNTP等的情况下 及其相辅的活性 真核细胞有5种DNA聚合酶 分别为DNA聚合酶 定位于胞核 参与复。

18、在细菌等原核生物中，相同的 RNA 聚合酶催化三种 RNA 的合成： 信使 RNA （mRNA ）、核糖体RNA （rRNA ）及 转运 RNA （tRNA）。 细胞 RNA 聚合酶是相对大的分子。 细菌 RNA 聚合酶是相对大的分子。核心酶有 5 个亚基（400 kDa）：核心酶有 5 个亚基（400 kDa）： 2 ：这两个 亚基组合成酶及辨认调节因子。每个亚基有两个区，C 末端区及 N 末端区，分别与启动子结合及与聚合酶的其他部份结合。每个亚基有两个区，C 末端区及 N 末端区，分别与启动子结合及与聚合酶的其他部份结合。 ：有着聚合酶的活动，负责催化 RNA 的合成。 ：与 DNA 结。

19、限制性核酸内切酶（以下简称限制酶）：限制酶主要存在于微生物（细菌、霉菌等）中。一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割 DNA 分子。是特异性地切断 DNA 链中磷酸二酯键的核酸酶（“分子手术刀”） 。发现于原核生物体内，现已分离出100多种，几乎所有的原核生物都含有这种酶。是重组 DNA 技术和基因诊断中重要的一类工具酶。例如，从大肠杆菌中发现的一种限制酶只能识别 GAATTC 序列，并在G 和 A 之间将这段序列切开。目前已经发现了200 多种限制酶，它们的切点各不相同。苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因，就能。

20、TaqDNA聚合酶科技名词定义中文名称：TaqDNA聚合酶 英文名称：Taq DNA polymerase 定义：编号：EC 2.7.7.7。存在于水生嗜热菌(Thermus aquaticus)的嗜热 DNA聚合酶，可在 74复制 DNA，在 95仍具有酶活力。该酶可在离体条件下，以 DNA为模板，延伸引物，合成双链 DNA。这个酶只有 53DNA 聚合酶活性和 53的外切酶活性，缺少 35的外切酶活性。 应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科）；酶（二级学科） 本内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布 目录简介 催化活性 校对活性编 辑 本 段 简 介Taq DNA 聚 合 酶 是 从 一 种 水 生 栖 热。