三、色谱定性与定量方法,人参药材的HPLC图谱,5,1,人参皂苷标准品的HPLC色谱图,Rg1,Rb1,Re,丙二酰基人参皂苷Rb1,面积归一:Rg1=1.0%, Rb1=3.5%外标法:Rg1=0.2%, Rb1=0.5%,(1) 色谱定性分析,利用保留值及其规律定性各物质在一定的色谱条件下均有确
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1、三、色谱定性与定量方法,人参药材的HPLC图谱,5,1,人参皂苷标准品的HPLC色谱图,Rg1,Rb1,Re,丙二酰基人参皂苷Rb1,面积归一:Rg1=1.0%, Rb1=3.5%外标法:Rg1=0.2%, Rb1=0.5%,(1) 色谱定性分析,利用保留值及其规律定性各物质在一定的色谱条件下均有确定不变的保留值,因此保留值可作为定性指标。 利用纯物对照定性 利用文献值对照定性(很少用),纯物质对照定性,实现方法 利用保留时间和保留体积定性,用相对保留值定性 用已知物增加峰高法定性,应用范围:适用于简单混合物,对该样品已有了解并具有纯物质的情况。 优点:应用简便,不需要其。
2、色谱学 Chromatography ,浙江工业大学化工与材料学院 应用化学专业 分析化学方向主讲: 王 丽丽 (Ph. D),第一章 概 论,目的与要求: 了解色谱分析的发展史了解色谱分析的分类了解色谱分析的应用,色谱分析现代分离分析方法,是仪器分析的重要组成部分。由于它具有分离效能高、分析速度快、定量准确、 样品用量少及易自动化、并且可与质谱、红外联用等特 点,因而广泛地用于石油化学、化工、有机合成、医药 卫生、环境保护、科研、生产等各领域。近代所创立的各种仪器分析方法中,尚无一种象色 谱法这样得到如此迅速、广泛的应用,已成为一。
3、色谱分析概论 第一节 色谱法概述 一、色谱法的定义和用途 二、色谱法的特点 三、色谱法的起源 四、色谱法的分类 五、色谱法的发展 一、色谱法的定义及用途 定义 : 色谱法 (chromatography), 是一种物理或物理化学的分离分析方法 。 原理 :利用物质在 固定相 和 流动相 中的 分配系数不同 , 使混合物中的各组分分离 。 以前学过的分离方法有: 1. 沉淀法 是利用物质 溶解度的不同 而进行分离 。 2. 蒸馏法 是利用有机物 沸点的差异 进行分离 。 3. 萃取法 是利用组分在水相和有机相 ( 互不相溶 ) 中的 分配素数不同进行 而分离 。 色。
4、第一章 色谱分析法引论,1.1 概述色谱法也叫层析法,它是一种高效能的物理分离技术,将它用于分析化学并配合适当的检测手段,就成为色谱分析法。,色谱法的最早应用是用于分离植物色素,其方法是这样的:在一玻璃管中放入碳酸钙,将含有植物色素(植物叶的提取液)的石油醚倒入管中。 此时,玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。然后用纯石油醚冲洗,随着石油醚的加入,谱带不断地向下移动,并逐渐分开成几个不同颜色的谱带,继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素,并可分别进行鉴定。色谱法也由此而得名。,现在的色谱法早已不局限于色。
5、第二篇 色谱分析技术,一、色谱法的起源、发展及定义,概 述,一、色谱法的起源、发展及定义,柱色谱薄层色谱和纸色谱气相色谱毛细管柱色谱高效液相色谱薄层扫描仪毛细管电泳色谱-光谱联用、多维色谱、智能色谱。,液相色谱(经典),气 质 联 用,又称层析法,是一种依据物质的性质(溶解性、极性、离子交换能力、分子大小等)的不同,当流动相携带样品流经固定相时,样品各组分在两相中不断的重新分配,最终达到分离与提纯,以便于对样品进行定性和定量分析的分析方法。,一、色谱法的起源、发展及定义,二、色谱法的分类,按两相状态不同分类 按。
6、高效液相色谱应用实例,柱后pH调节电导检测,对有机酸具有高选择性和高灵敏度,有机酸分析系统流程图,1、2 泵 3 进样器4 柱温箱5 电导检测器6 数据处理机 7 混合室 8 柱子9 流动相10 缓冲液,分析条件,分离条件色谱柱:Shim-pack SCR-102H(8mmI.D300mmL.)1个或2个分析柱连接 保护柱 SCR-102H (6mmI.D.50mmL.) 流动相:5mM p-甲苯亚磺酸水溶液 流量 :0.8mL/min 温度 :40或45 检测条件 缓冲液:20mM Bis-tris 水溶液含 5mM p-甲苯亚磺酸和100 EDTA 流量 :0.8mL/min 检测器:电导检测器 polarity;+,样品的分析实例,食品 啤酒,清酒,葡萄酒,。
7、仪器分析 谢益民,TEL. 027-88023359 E-mail: ppymxiesdili.edu.cn,讲授内容,一、绪论 二、 色 谱 法 三、 气 相 色 谱 法 四、液相色谱法 五、紫外可见分光光度法 六、 红外光谱,七、 电化学分 析 八、 其 他,第一章 绪 论,一 仪 器 分 析 方 法 分 类,二仪器分析的特点,1 高 灵 敏 度 2 高 选 择 性 3 高 分 析 速 度 4 高 适 应 性 5 高费 用 6 相 对 性,三 仪器分析发展趋势,1 引 进 新 方 法 开 发 新 仪 器 2 分 析 仪 器 的 自 动 化 3 联 用 技 术 4 新 理 念 新 要 求 新 理 论,第二章 色谱法 fundamental of chromatograph analy。
8、第六章 气相色谱分析(P214),概述 气相色谱的分离系统 气相色谱的检测系统 气相色谱的定性与定量,6.1 概述,一、色谱分析的应用概况在现代所有的分析仪器中,没有一种像色谱仪这样在实际中得到如此迅速和广泛的应用。 目前,色谱分析广泛应用在食品学科,它通过对不同的物质分析、分离和组合,对物质进行定性和定量的分析,若色谱分析和质谱分析(MS)或核磁共振(NMR)联用,则能对物质进行立体结构的分析。,二、色谱分析的发展方向1. 从宏观分析向微观分析方向发展。2. 从体相到表相,不同层次的分析。3. 从表观分析到分子内部结构变化的。
9、Chromatography,一、色谱分析法概述,国产气相色谱仪,HP高压液相色谱仪,美国气相色谱仪,一、概论,俄国植物学家Tswett于1901年发现:利用吸附原理分离植物色素,1903年发表文章:On a new category of adsorption phenomena and their application to biochemical analysis 1906年Tswett 创立“chromatography”“色谱法”新名词 1907年在德国生物会议上第一次向世界公开展示显现彩色环带的柱管,(一)色谱分析法的历史,1930年R.Kuhn用色谱柱分离出胡萝卜素 1935年Adams and Holmes 发明了苯酚-甲醛型离子交换树脂,进一步发明了离子色谱 193。
10、薄层色谱和纸层色谱简介,薄层色谱(Thin Layer Chromatography,TLC)又叫薄层层析,是色谱法的一种。色谱法是分离提纯和鉴定有机化合物的重要方法,在有机化学、生物化学和医学领域中已经得到广泛的应用。 薄层色谱是一种微量(几毫克到几十毫克)、快速、简单、准确的定性分析分离方法。可以到应用在精制样品、化合物鉴定、跟踪反映进程和柱色谱摸索最佳条件等方面。,薄层色谱是一个微量分析的分离过程,它将样品点在以玻载片或铝、塑料等片材为载体的多孔吸附剂薄层的固定相上,固定相必须经干燥、活化。用是适当极性的有机溶剂作为展。
11、高效液相色谱法,High Performance Liquid Chromatography,HPLC,高效液相色谱法(HPLC)是20世纪60年代末70年代初发展起来的一种新型分离分析技术,随着不断改进与发展,目前已成为应用极为广泛的化学分离分析的重要手段。它是在经典液相色谱基础上,引入了气相色谱的理论,在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器,因而具备速度快、效率高、灵敏度高、操作自动化的特点。为了更好地了解高效液相色谱法优越性,现从两方面进行比较:,第一节 概 述,1高效液相色谱法与经典液相色谱法,HPLC优点:高速、高效、高灵敏度、高自动化。。
12、现代色谱分离技术,中国海洋大学医药学院 海洋药物教育部重点实验室 李国强 For 博兴京博控股股份有限公司 2011-12-20,主要内容,高效液相色谱(HPLC),3,一 薄 层 色 谱,引 言,薄层色谱(Thin Layer Chromato-graphy),又称薄层层析,常用TLC表示。将固定相在玻璃、金属或塑料等光洁的表面上均匀的铺成薄层,试样点在薄层的一端,流动相借毛细作用流经固定相,使被分离的物质展开。,固定相:吸附剂。 流动相:展开剂。 分离原理:吸附与解吸附。,薄层板,固定相:硅胶为使用最广泛的薄层材料。除此之外还有氧化铝、硅藻土等。 常用薄层硅胶的。
13、1,第三章 高效液相色谱法 第一节 概 述,高效液相色谱法是继气相色谱之后,70年代初期发展起来的一种以液体做流动相的新色谱技术。高效液相色谱是在气相色谱和经典色谱的基础上发展起来的。现代液相色谱和经典液相色谱没有本质的区别。不同点仅仅是现代液相色谱比经典液相色谱有较高的效率 和实现了自动化 操作。经典的液相色谱法,流动相在常压下输送,所用的固定相柱效低,分析周期长。而现代液相色谱法引用了气相色谱的理论,流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大。
14、离 子 色 谱,孙俊峰 2017.5,离子色谱法的发展历史,1975年,美国Dow Chemical公司的 H. Small, T.S. Steven &W.C. Bauman首次提出 抑制型离子色谱。 1979年,美国 的 J.S. Fritz 提出 非抑制型离子色谱。 1998年,H. Small 将电解淋洗液在线发生器和自动再生抑制器结合,使得IC只用水,不需用化学试剂。 2003年,美国Dionex推出了商品仪器RFIC(ReagentFreeIonChromatography)。,离子色谱法 (ion chromatography, IC) ,是高效液相色谱法的一种,是分析离子的一种液相色谱法。,离子色谱法的基本原理,固定相:离子交换树脂(阴离子型/阳离子型。
15、纺织化学与染整 李立名,液相色谱,读书报告,201120303008,2. 液相色谱法的原理,3. 液相色谱仪的介绍,4. 液相色谱技术的应用,5. 总结,1. 概述,Contents,概述,色谱法最早是由俄国植物学家茨维特在1906年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的,色谱法(Chromatography)因之得名。,M.(M )(18721919)俄国植物生理学家和化学家。1872年 5月14日生于意大利阿斯蒂,1919年6月26日卒于苏联沃罗涅日。1896年获日内瓦大学哲学博士学位后,全家移居俄国。1901年获喀山大学植物学学士学位。1902年任华沙大学讲师,1907年任兽医学院教授,1908年任华沙理工。
16、高速逆流色谱,High-Speed Counter-Current Chromatography,一.发展史,1941年 级联链型萃取装置1944年 非连续式逆流 分溶装置CCD 1960年 高效连续混合分层装置,缺点,设备庞大复杂溶剂易乳化溶剂耗量大分离样品有局限性,70年代 Yoichiro Ito互不相溶的两相溶剂 螺旋形的小孔径管子分段割据 两溶剂相之间的逆向对流,特点:不存在固态载体样品处理量大采用较广泛的溶剂系统,二. 逆流分溶CCD,液-液分配 原理: 溶质分配系数在互相饱和的两相溶剂中为常数,C 上相 C 下相,经8次操作后,各试管中溶质分配结果如图:A:K=1,B:K=3,C:K=0.33,三. 螺旋。
17、2019/3/21,高效液相色谱分析法,一、高效液相色谱仪 HPLC 二、高效液相色谱法的特点 feature of HPLC 三、流程及主要部件 general process and main assembly of HPLC,高效液相色谱的特点与仪器,high performance liquid chromatograph( HPLC ),feature and instrument of HPLC,2019/3/21,引言,高效液相色谱(HPLC)是以溶剂液体为流动相的色谱方法。按照固定相不同可分为:液液分配色谱;吸附色谱(液固色谱);离子交换色谱;尺寸排阻色谱(凝胶渗透色谱)。此外,还有亲和色谱、平板色谱(薄层色谱)等。早期液相色谱,包括Tswett的工作,都是。
18、高效液相色谱分析,LOGO,基本概念与特点,概念:高效液相色谱法(HPLC)是在20世纪60年代末,以经典液相色谱为基础,引入了气相色谱的理论,在技术上采用了高效固定相、高压输液系统和高灵敏度的在线检测器,从而发展起来的一种新型分离分析技术。随着科学和技术的不断改进与发展,目前已成为应用极为重要、广泛的分离分析手段. 特点:分离效率高、分析速度快、应用范围广、操作自动化。,2,液相色谱流程与原理。
19、第十八章 平面色谱法 (plane chromatography),在平面上进行分离的一种色谱方法,主要包括薄层色谱法和纸色谱法。纸色谱法 薄层色谱法,第一节 平面色谱法的分类和原理,分类薄层色谱法:吸附薄层色谱法分配薄层色谱法分子排阻薄层色谱法 纸色谱法:分配薄层电泳法,平面色谱法参数,定性参数 相平衡参数 面效参数 分离参数,定性参数1,比移值(Rf值) 溶质移动距离与流动相移动距离之比。(速度之比?)Rf =L/L0 (定时展开) L为原点(origin)至斑点中心的距离,L0为原点至溶剂前沿(solvent front)的距离 与组分及色谱条件有关,定性参数2,相对。