1、纺织化学与染整 李立名,液相色谱,读书报告,201120303008,2. 液相色谱法的原理,3. 液相色谱仪的介绍,4. 液相色谱技术的应用,5. 总结,1. 概述,Contents,概述,色谱法最早是由俄国植物学家茨维特在1906年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的，色谱法(Chromatography)因之得名。,M.（M ）（18721919）俄国植物生理学家和化学家。1872年 5月14日生于意大利阿斯蒂,1919年6月26日卒于苏联沃罗涅日。1896年获日内瓦大学哲学博士学位后，全家移居俄国。1901年获喀山大学植物学学士学位。1902年任华沙大学讲师，1907年任兽医学院教授，19
2、08年任华沙理工大学教授。,茨维特生平,色谱法,液相色谱法,气相色谱法,纸色谱法,薄层色谱法,概述,液相色谱法,经典液相色谱法,高效液相色谱法,可分为 经典液相色谱法 和 高效液相色谱法,引入气相色谱理论而迅速发展起来。 与经典液相色谱法区别：填料颗粒小而均匀，具高柱效 缺陷：需高压输送,是液相色谱法发展的初始阶段。 用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相。 缺点：柱效低 时间长,概述,A B C D,A. 不同溶质在两个液相中的分配系数不同,B. 物质吸附作用的不同进行分离,C. 各离子与离子交换基团的电荷吸引力不同,D. 溶质在两相之间按分子大小进行分离,液相色谱法的原理,液固
3、色谱法,液液色谱法,离子交换色谱法,排阻色谱法,进样系统,输液系统,分离系统,检测系统,主要分为进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统五部分,液相色谱仪的介绍,数据处理系统,一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成操作，进样量恒定。,包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪。,包括色谱柱、连接管和恒温器等。,常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种。,可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作,液相色谱仪的介绍,1贮液罐（滤棒，可滤去 颗粒状物质） 2高压泵（输液泵） 3进样装置 4色谱柱分离 5检测器分析 6废液出口或组分收集器 7记录装置,液相色谱法的应用,了解
4、样品情况 明确分析目的,1,样品预处理，进行特殊步骤,选择仪器类型，确定检测器参数,2,3,4,5,6,7,8,选择分离类型、色谱柱、流动相、相关条件，进行预实验,优化分离条件，选择最佳参数,进行实验 检查出现的问题，选择解决办法,回收纯化物质,定性分析 定量矫正,液相色谱法分析的一般步骤,液相色谱法的应用,色谱定性与定量方法,纯物对照定性,与其他仪器或化学方法联合定性,色谱定性分析方法,混合物经色谱分离后，将各组分直接由接口导入其它仪器中进行定性,液相色谱法的应用,基础：各物质在一定的条件下，均有确定不变的保留值，因此保留值可作为定性指标,纯物对照定性,利用保留时间和保留体积定性,用相对保留
5、值定性,已知物增加峰高法定性,液相色谱法的应用,归一化法,内标法,外标法,色谱定量分析方法,基础：色谱定量分析是基于被测物质的量与峰面积成正比。,液相色谱法的应用,校正归一化法,Ci%样品含量 Ai峰面积 fi绝对质量校正因子,面积归一化法,Ci%样品含量 Ai峰面积,若式中各组分绝对质量校正因子相近或相同,液相色谱法的应用,内标法,Ci%样品含量 Ai内标物峰面积 As试样峰面积 fi内标物绝对质量校正因子 mi内标物质量 ms试样质量,将一定量的纯物质作为内标物，加入到准确称量的试样中。,液相色谱法的应用,外标法,也称标准曲线法,将一定浓度 的 标准储备液稀释成不同浓度的系列标准溶液, 均
6、取一定量进样以测得的不同浓度的峰面积对样品的质量浓度作曲线，可得线性回归曲线,某标准样品在5 1000 mg/ L范围内的线性回归曲线,医学,食品工程,包装工程,材料科学,纺织染整,应用,液相色谱法的应用十分广泛，涉及到医学、纺织染整、生物科学、材料科学、食品工程、包装工程等诸多方面,液相色谱法的应用,医学上的应用,液相色谱法的应用,A水萃取试样； B极分； C中等极分。 其中，A试样分离使用 的流动相为混合有0.1% 蚁酸的水；B试样分离 使用的流动相为混合有 0.1%蚁酸的乙腈溶液,Combination of off-line two-dimensional hydrophilic in
7、teraction liquid chromatography for polar fraction and two-dimensional hydrophilic interaction liquid chromatography reversed-phase liquid chromatography for medium-polar fraction in a traditional Chinese medicine,液相色谱法的应用,纺织染整上的应用,Analysis of natural red dyes (cochineal) in textiles of historical i
8、mportance using HPLC and multivariate data analysis,A标准程序，MeOH:H2O=1:1,B改进后程序 H2O:MeOH:0.3%高氯酸水溶液=50:20:30,草酸提取的方法和用重组水：甲醇：0.3高氯酸水溶液为50:20:30的溶液提取染料的方法，用高效液相色谱仪分离在不明显转变胭脂红染料洗脱外观的情况下，具有良好的分辨率,液相色谱法的应用,材料科学上的应用,流动相变化对6 种异氰酸酯色谱分离的影响,高效液相色谱/荧光检测法同时测定高分子材料中6 种异氰酸酯,A: 甲醇 水B: 乙腈 水C: 甲醇 三乙胺缓冲溶液D: 乙腈 三乙胺缓冲溶液
9、,三乙胺缓冲溶液的比例越少，异氰酸酯出峰越早、响应值越高，但分离效果变差，尤其是1和2号异氰酸酯以及3 和4号异氰酸酯 无法有效分离,液相色谱法的应用,包装工程上的应用,啤酒瓶内衬垫溶出物色谱图,高效液相色谱测定啤酒瓶盖内衬垫DEHP 的含量,DEHP 标准样品在5 1000 mg/ L 范围内的线性回归曲线,DEHP 溶出的色谱图, 可以发现其峰面积分别为125 212, 195 818,根据回归方程计算出啤酒瓶内衬垫在甲醇( 95%) 和无水乙醇中的溶出量分别为15. 97% 和24. 45%。,液相色谱法的应用,氨基甲酸甲酯的液相谱图,食品工程上的应用,高效液相色谱 质谱联用测定红酒中的氨基甲酸甲酯,高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。,总结,Thank You!,
