1、1选修 3 知识点复习专题 1 基因工程一、基因工程的概念基因工程又叫 或 。原理是 ，操作水平是 水平。优点： ； 地改造生物的遗传性状。二、基因工程的基本工具1.“分子手术刀” （1）来源：主要从 中分离纯化出来。（2）功能：使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开（3）特点具有 性。 （4）结果：产生： 和 。2.“分子缝合针” （1）两种 DNA 连接酶（EcoliDNA 连接酶和 T4-DNA 连接酶）的比较：相同点：都缝合 。区别：EcoliDNA 连接酶只能连接 末端；T 4DNA 连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效较 。（2）与 DNA 聚合酶作用的异同：DNA
2、聚合酶只能将 加到已有的脱氧核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA 连接酶是连接 的末端，形成磷酸二酯键。3.“分子运输车” （1）载体具备的条件：能够稳定保存并 ；有一至多个 酶切位点 含有 ，便于筛选。对受体细胞无害。（2）最常用的载体是 ，化学本质是 。（3）其它载体： 三、基因工程的基本操作程序 （一）获取目的基因1、从基因文库中获取目的基因2、利用 PCR（是 的缩写）技术扩增目的基因PCR 技术与 DNA 复制比较：相同点：原理 、原料 。PCR 技术 DNA 复制解旋方式 加热 DNA 解旋酶场所 体外 活细胞中不同点 酶 热稳定 DNA 聚合酶 DNA 聚合酶等（2）过程：第
3、一步 ：加热至 9095，DNA ，不需要解旋酶；第二步 ：冷却到5560， 结合到互补 DNA 链。变性和复性利用了 DNA 的热变性原理；第三步 ：加热至7075， 从引物起始互补链的合成。3、化学方法直接人工合成目的基因。适用范围：基因比较 ，又已知 。（二）基因表达载体的构建基因工程的核心1、基因表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中 ，并可以 给下一代,同时使目的基因能够 和发挥作用。2、基因表达载体的组成： （首端） ，是_ _的识别位点； （尾端） ；标记基因（常用的标记基因是 ）用于筛选含目的基因的细胞； 目的基因 。（三）将目的基因导入受体细胞将目的基因导入植物细胞：采用最多
4、的方法是 ，其次还有 和 等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 。此方法的受体细胞多是 。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是 最常用的原核细胞是 ，其转化方法是：先用 处理细胞，使其成为 ，再将重组表达载体 DNA 分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收 DNA 分子，完成转化过程。（四）目的基因的检测与鉴定21、分子水平DNA 分子杂交技术和分子杂交技术均需要用用放射性同位素等标记的 作探针，观察是否有杂交带。2、个体生物学水平的鉴定：如 转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。四、基因工程的应用1、植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用
5、转基因改良植物的品质。2、动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。附：乳腺生物反应器 药用蛋白基因_导入哺乳动物_早期胚胎性别鉴定_雌性动物进入泌乳期在乳腺细胞中特异性表达）。3、基因工程药物：将目的基因导入微生物，制成 ，生产药物4、基因治疗：把正常基因导入病人体内，使该基因的 发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，这是治疗 病最有效的手段。包括体外基因治疗和体内基因治疗。五、蛋白质工程的崛起：明确中心法则的逆推是蛋白质工程的实质1、基因工程原则上只能生产 蛋白质。2、蛋白质工程的基本途径：_设计预期的蛋白质结构 _找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）3、蛋白质工程是
6、指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。专题 2 细胞工程一、植物细胞工程 1.植物组织培养技术（1）原理：_（2）过程：_的植物器官、组织或细胞 愈伤组织 植物体常用的植物激素_和_。（3）用途：微型繁殖、作物脱毒（选材应该选择_）、制造人工种子、单倍体育种、筛选突变体、细胞产物的工厂化生产。2.植物体细胞杂交技术（1）原理： （2）过程：去壁的方法： ；诱导融合的方法：物理法包括 等。化学法是用 作为诱导剂。（3）意义： 。二、动物细胞工程 动物细胞工程中常用的技术手段有动物细胞培
7、养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中， 是其他技术的基础。1.动物细胞培养（1）流程：取动物组织块剪碎用 处理分散成单个细胞制成细胞悬液转入培养瓶中进行 培养贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理分散成单个细胞继续 培养。（2）悬液中分散的细胞很快就贴服在瓶壁上，称为 。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为 。（3）动物细胞培养需要满足以下条件检测对象 检测技术1 DNA2 mRNA3 蛋白质3 ：培养液应进行 处理。通常还要在培养液中添加一定量的 ，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止 。 ：培养基成分：糖、氨基酸、
8、促生长因子、无机盐等。通常需加 等天然成分。 ：适宜温度：哺乳动物多是 36.50.5；pH：7.27.4。 ：9 5%空 气 5% CO2。 O2是 细 胞 代 谢 所 必 需 的 ， CO2的 主 要 作 用 是 。（4）动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质。2.动物体细胞核移植技术和克隆动物（1）哺乳动物核移植可以分为 核移植（比较容易）和 核移植（比较难）。（2）选用去核卵母细胞的原因： ； ；含有多种促进细胞发挥全能性的物质。（3）体细胞核移植的大致过程是：（书本 P74）供体体细胞细胞培养将 注入 （胚胎移植）卵巢中卵母细胞（ ）去核 重组胚胎 代孕动
9、物 遗传基础相同的犊牛3.动物细胞融合（1）动物细胞融合也称 ，原理是 （2）诱导动物细胞融合方法与植物原生质体融合方法类似，常用的诱导因素有 等。（3）动物细胞融合的意义：克服了 ，成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。4.单克隆抗体 （1）单克隆抗体的制备过程：给小鼠注射 分离出 融合 （ ）培养基培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞 克隆 体内培养专一抗体检测 阳性细胞 体外培养 （2）杂交瘤细胞的特点：既能大量 ，又能产生 。（3）单克隆抗体的优点： 。（4）单克隆抗体的作用： 作为诊断试剂：准确识别各种 物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合，具有 的优点。 用于治疗疾
10、病和运载药物：可制成“ ”，将药物定向带到癌细胞所在位置。专题 3 胚胎工程一、体内受精和早期胚胎发育胚胎工程是指对动物 或 所进行的多种显微操作和处理技术，如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。1.精子和卵子的发生 （1）精子的发生：场所： 。 时间： 至生理机能衰退。精子发生的三个阶段有丝分裂、减数分裂和变形。精子变形： 变为精子的头部的主要部分；高尔基体发育为 ； 演变为精子的尾；线粒体聚集在尾的基部形成 ，其他物质浓缩为球状的 ，最后脱落。（2）卵子的发生 场所： 。卵子减数第一次分裂发生在 （时候），减数第二次分裂发生在 过程中。2.受精 （1）场所： 。（2）刚排出
11、的精子，不能立即与卵子结合，必须在雌性动物生殖道内发生相应生理变化后，才能获得受精能力，这一生理现象成为 。排出的卵子要在输卵管内进一步成熟，当达到 时，才具备与精子受精的能力。（3）受精的过程：精子穿越放射冠和 ，进入 ， 形成和配子结合。透 和 是防止多精入卵的两道屏障。（4）判断卵子是否受精的标志是 。单克隆抗体4受精完成的标志是 3.胚胎发育（1）卵裂期:细胞进行 裂，细胞数量不断增加，但胚胎的总体积 ，或 。（2）桑椹胚：胚胎细胞数目达到 个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹。属于 。（3）囊胚：细胞开始出现 （该时期细胞的全能性仍比较高）。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为 ，将
12、来发育成胎儿的各种组织。中间的空腔称为 。 则发育为胎儿的胎膜和胎盘。（4）原肠胚：有了三胚层的分化，分化程度高。内胚层包围的腔叫 。二、体外受精和早期胚胎培养1.卵母细胞的采集和培养：对实验动物如小鼠、兔以及家畜猪、羊等，等，用 处理，从输卵管冲取卵子（可直接受精） ；对大家畜或大型，如牛，从 中采集卵母细胞（要在体外培养成熟） 。2.精子的采集和获能：采集的方法有 等；获能的方法有两种： 法和 法3.体外受精：可在 溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。4.早期胚胎培养：培养液的成分有 等物质。三、胚胎工程的应用1.胚胎移植 胚胎移植是胚胎工程其他技术的 “工序”。（1）生理学基础：动物发情
13、排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的 。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。早期胚胎在一定时间内处于 状态。这为胚胎的收集提供了可能。受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生 。这为胚胎在受体的存活提供了可能。移入受体的供体胚胎的遗传特性在孕育过程中 （2）胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期，充分发挥雌性 。（3）基本程序主要包括：对供受体的选择和处理。选择 供体，有 受体，供体和受体是同一物种。并用孕激素进行同期发情，用 对供体母牛做超数排卵处理。配种或人工受精。对胚胎的收集、检查。配种或输精后第 7 天，把供体母牛子宫内的 冲洗出来(也叫冲卵)。对胚胎进行质量检查，胚胎应发育
14、到 阶段。向受体移植或放入-196中保存。胚胎移植。移植的方法有 和 移植后的检查。对受体母牛进行 的检查。2.胚胎分割（1）意义：来自同一胚胎的后代具有 的遗传物质，属于 繁殖。（2）材料：发育良好，形态正常的 。（3）操作过程：对囊胚阶段的胚胎分割时，要将 均等分割，否则影响分割后胚胎的进一步发育。3.胚胎干细胞（1）哺乳动物的胚胎干细胞简称 细胞，是由 或 中分离出来的一类细胞。（2）特点：在形态上表现为体积 ，细胞核 ， 明显；在功能上，具有发育的 ，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞；在体外培养条件下，ES 细胞可以 。专题 4 生物技术的安全性和伦理问题（一）转基因生物的安全性争论 ：阅读课本 P87-93（二）生物技术的伦理问题克隆人：中国政府的态度：禁止 克隆。四不原则： 任何生殖性克隆人的实验。（3）生物武器（1）种类： （2）特点：传染性强、污染面广、难以防治、容易受外界影响等。专题 5 生态工程的原理5基本原理： 原理（如无废弃物农业） 原理（提高生态系统的抵抗力稳定性） 原理（生物与环境的适应，考虑环境容纳量） 原理（考虑自然系统、经济系统和社会系统的统一） 原理（ ：考虑系统内部不同组分之间的结构，通过改变和优化结构，达到改善系统功能的目的； ：实现总体功能大于各部分之和的效果） 。
