1、ICS 点击此处添加 ICS 号点击此处添加中国标准文献分类号中 华 人 民 共 和 国 粮 食 行 业 标 准LS/T XXXXXXXXX粮油检验 粮食中玉米赤霉烯酮毒素测定方法 胶体金快速测试卡检测法Detection of Zearalenone in GrainRapid Method of Colloidal Gold Technique 点击此处添加与国际标准一致性程度的标识（征求意见稿）XXXX - XX - XX 发布 XXXX - XX - XX 实施发 布II前 言本标准是按照 GB/T 1.12000 标准化工作导则 第 1部分：标准的结构和编写规则及 GB/T 2000
2、1.42001标准编写规则 第 4部分：化学分析方法的要求进行编写。本标准由国家粮食局提出并归口。本标准起草单位：本标准主要起草人：SB/T XXXXXXXXX1粮油检验 粮食中玉米赤霉烯酮毒素测定方法 胶体金快速测试卡检测法1 范围本标准规定了玉米赤霉烯酮的胶体金快速测试卡检测方法的原理、试剂、仪器设备、样品制备、样品测定与结果判定本方法适用于小麦和玉米等粮食中玉米赤霉烯酮快速筛选的测定。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这
3、些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB 5491-1985 粮食、油料检验 扦样、分样法3 原理玉米赤霉烯酮毒素胶体金快速测试卡检测技术原理是基于抗原抗体反应、免疫金标记技术及毛细管层析技术。以微孔膜为固相载体，将可特异性识别玉米赤霉烯酮的抗体标记红色或紫红色的胶体金颗粒，检测卡的膜上两个色带分别固定玉米赤霉烯酮抗原，以及抗鼠源性抗体的二抗，根据色带的颜色变化进行结果评估。质控色带（control line）不会被样品中的玉米赤霉烯酮影响，而在每次反应后都应出现，用于证明检测条是否正常。检测色带（test line）在样品中没有玉米赤霉烯酮或样品中玉米赤霉烯酮的
4、含量低于检测限时会显现；在样品中玉米赤霉烯酮含量等于或高于检测限时不出现。4 试剂胶体金免疫层析快速检测装置（卡）试剂盒5 仪器设备5.1 架盘天平：分度值 0.1g5.2 小型粉碎机5.3 振荡器SB/T XXXXXXXXX25.4 离心机5.5 记时器5.6 量筒：10mL5.7 离心管：50ml6 样品制备6.1 扦样与分样：按 GB 5491 执行6.2 样品处理6.2.1 取有代表性的样品 500g，粉碎，过 20 目筛,混匀；6.2.2 样品溶液制备方法应按照胶体金免疫层析快速检测装置（卡）使用说明中规定方法进行操作。7 样品测定7.1 从包装袋中取出试纸卡，打开后平放在桌面上，做
5、好标记，并在 1 小时内尽快地使用（受潮后试剂失效）。7.2 加样：按照测试卡使用说明规定操作方法，用吸管吸取一定量待测样品提取溶液，缓慢滴加至测试卡加样孔中。注：如加入检测液后 30 秒内，在测试窗口无液体移动则再补加一滴检测液。7.3 计时：测试窗口有液体移动开始计时，5min 后观察测试结果。8 结果判定5min 至 10min 内判读结果（超过十分钟后结果不准确） ，如下图所示：阳性 阴性 无效a) 阳性：位置 C 显示出红色线条，而位置 T 不显色时，或者位置 C 显示出红色线条，位置 T 显示颜色非常模糊时，判为阳性，表明样品中的玉米赤霉烯酮含量高于限量。b) 阴性：位置 C 显示
6、出红色线条，位置 T 线在规定观测时间内显示出红色线条，为阴性结果，表明样品中的玉米赤霉烯酮含量低于限量。c) 无效：位置 C 不显示出红色线条，而位置 T 显示出红色线条，或者位置 C 和 T 都不显示红色线条，该试纸卡判为无效。SB/T XXXXXXXXX39 注意事项9.1 测试卡外观检查：测试卡包装完好。9.2 环境温度检查：应符合测试卡使用说明中规定的温度范围。9.3 本方法为快速筛选方法，阳性结果应采用高效液相色谱法作进一步确证。SB/T XXXXXXXXX4A A附 录 A（资料性附录）粮食中玉米赤霉烯酮胶体金快速测试卡技术要求与验证方法A.1 技术要求A.1.1 基本要求A.1
7、.1.1 工作环境要求气温：2030A.1.1.2 抗体效价参数抗体效价参数应符合以下要求：a) 多抗可以由兔或羊血清获得，效价应10000(间接 ELISA法)，或有效抗体含量应0.1mg/mL;特异性应10000（间接抑制 ELISA法） 。b) 单抗由鼠腹水获得，效价应20000(间接 ELISA法)，或有效抗体含量应1mg/ml;特异性应1000(间接抑制 ELISA法)。A.1.1.3 交叉反应率交叉反应应对黄曲霉毒素（B1,B2,G1,G2），玉米赤霉烯酮毒素，赭曲霉毒素，及其他真菌毒素均无交叉反应。A.1.2 性能要求A.1.2.1 外观外观应符合以下要求：a) 测试卡表面应平整
8、，颜色均匀一致，光滑平整，纤维膜面无露底、气泡、麻点、起皱、刷痕等缺陷；b) 点样孔部分应洁净；c) 文字符号等标志应字体端正、清晰、正确；A.1.2.2 准确度对玉米赤霉烯酮含量在50ppb70ppb范围内的样品测定，检测结果误判率不超过15%。A.1.2.3 稳定性同批次测试卡误判率不超过10%。SB/T XXXXXXXXX5批次间测试卡误判率不超过15%。A.2 验证方法A.2.1 阳性样品定值按照 GB/T 23504-2009食品中玉米赤霉烯酮毒素的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法对阳性样品进行定值。A.2.2 性能测定A.2.2.1 准确性选取50ppb70ppb范围内的10个不同浓度玉米赤霉烯酮阳性样品进行测定，计算误判率。A.2.2.2 稳定性A.2.2.2.1 批次间稳定性随机选取 3 个批次产品，每个批次用同一玉米赤霉烯酮阳性样品（浓度为 60g/kg 左右）进行至少 6 次测试，计算误判率。A.2.2.2.2 批次内稳定性随机选取1个批次产品，用同一玉米赤霉烯酮阳性样品（浓度为60g/kg左右）进行20次测试。A.2.2.3 保质期内产品失效率应符合厂家提供的允许值内。A.2.2.4 约定误差范围应符合厂家提供的允许值内。_
