1、ABO新生儿溶血病血清学检查,邵长峰 韩乐乐2012- 10-22,ABO新生儿溶血病,ABO新生儿溶血病血（HDN）是由于母婴ABO血型不合，母体的IgG抗A 或抗B经过胎盘进入胎儿血循环破坏胎儿红细胞所引起。此病多见于O型母亲所生A型或B型婴儿，与O型母亲血清中所含IgG抗A（B）抗体有关。新生儿溶血病血清学检查主要是进行三项试验：直抗试验、游离试验和释放试验。,试剂,抗人球蛋白血清患儿5%红细胞悬液患儿血清A型、B型、O型红细胞悬液酶处理A型、B型、O型试剂红细胞悬液,抗人球蛋白的原理,一 直接抗人球蛋白试验,本试验用于检测受检者红细胞上是否存在不完全抗体。1.取小试管2支，按下表标记及
2、加样试剂 被检管 阴性对照管 患儿5%红细胞悬液 1滴 1滴0.9%生理盐水 1滴 抗球蛋白血清 1滴 2. 混匀，3400 rpm，离心15s，轻轻摇动，观察结果。,二 游离试验,本试验用于检查新生儿血清中是否有游离的IgG型抗体1.取小试管3支 ，按下表标记及加样试剂 Ac管 Bc管 Oc管患儿血清 1滴 1滴 1滴A型试剂红细胞悬液 1滴 B型试剂红细胞悬液 1滴 O型试剂红细胞悬液 1滴2.混匀后37水浴30min，用生理盐水洗涤3次，最后一次吸尽盐水，然后向各管中加1滴抗球蛋白试剂，3400 rpm/ 分，离心15s，轻轻摇动，观察结果。,三 释放试验,本试验和直抗试验相同，也是检测
3、新生儿红细胞上的致敏的血型抗体，只是方法有所不同。释放试验首先利用特殊的方法将致敏在新生儿红细胞上的抗体放散下来，然后再检测放散液中的抗体。1、取洗涤后的压积红细胞，加等量盐水。 2、混匀后，置于56水浴中不停摇动7-10min。 3、取出后立即高速离心，3000 rpm/ 分2-3min，如果 有可能，则使用预先加热过的离心杯。 4、离心后马上吸出上清液置于小试管中再次离心3000 rpm/ 分 1min。取上清液分成3等份于 3个小试管中，分别标记上“A”、“B”、“O”。按下表标记及加样,试剂 A管 B管 O管酶处理A型红细胞悬液 1滴 酶处理B型红细胞悬液 1滴 酶处理O型红细胞悬液 1滴5、混匀后37水浴30min，用生理盐水洗涤3次，最后 一次吸尽盐水，然后向各管中加1滴抗人球蛋白试剂，3400 rpm/ 分，离心15s，轻轻摇动，观察结果。,注意事项,1、离心后要轻摇观察结果，摇动时不要使劲地甩试管，要轻摇或用手指轻弹。 2、加抗球蛋白之前要3次洗涤，最后一次在倒掉上清后不要再倒转试管，而是直接置于吸水纸上吸尽盐水。3、热放散时应严格注意温度和时间，温度过高，细胞易溶解，过低抗体放散不完全。在释放抗体时要不时地摇动，以促进抗体从细胞上游离。4、抗体释放后应立即分离，以免其重新结合到细胞上去。,
