1、细菌形态学检查,细菌的显微镜检查,显微镜:光学显微镜 所用放大倍数:101001000 所用镜头:油镜头 镜油:香柏油或石蜡油 香柏油折光率(n1.515)与玻片折光率(n1.52)接近 显微镜使用完毕须擦拭镜头。,不染色标本检查,应用:主要用于观察活菌的动力和运动方式 常用方法:压滴法、悬滴法、暗视野映光法,压滴法,悬滴法,镜检,染色标本的检查,染色方法的种类 单染法:采用一种染料染色 复染法(鉴别染色):采用两种或两种以上的不同染料进行先后染色,使不同种类的细菌、同种细菌的不同结构,分别染上不同的颜色,以便鉴别细菌。,染色标本检查的基本程序,涂片干燥固定染色 涂片方式 干燥的方法 固定的方
2、法、目的 染料种类:碱性染料、酸性染料、中性染料,碱性染料最常用,复染法基本程序,初染媒染脱色复染,革兰染色法(Gram染色),染液组成:结晶紫染液、卢戈碘液、95乙醇、稀释复红 染色方法:,结晶紫初染,卢戈碘液媒染,95乙醇脱色,稀释复红复染,1分钟,30S1min,1分钟,影响革兰染色的关键步骤是脱色,革兰染色结果,紫色革兰阳性菌 红色革兰阴性菌,染色结果图,革兰阳性菌,革兰阴性菌,染色原理,渗透学说:与肽聚糖结构有关 化学学说:与细菌细胞质中核糖核酸镁盐有关 等电点学说:与细菌所带电荷有关,革兰染色意义,有助于鉴别细菌 有助于选择用药 有助于了解细菌的致病性,影响革兰染色的因素,操作因素 涂片的厚薄 脱色时间的长短 染液因素 卢戈碘液放置时间过长 95乙醇挥发 结晶紫与草酸铵混合时间太长 细菌因素: 细菌种类、 细菌菌龄,抗酸染色,用于区别抗酸菌与非抗酸菌,细菌特殊染色,负染色法,