1、实验一 细菌形态学观察,目的要求: 1、熟悉生物显微镜的使用,特别是油镜的使用。 2、观察细菌的形态结构。,实验原理:油镜的使用1.使用原理:当光线由聚光器从玻片经空气进入透镜时,由于介质密度不同而发生折射,从而使进入透镜的光线减少,视野模糊。,为了增加进入镜头的光线,提高亮度,我们在玻片上加上折光率与玻片相似的香柏油 玻片折光率=1.52 香柏油折光率=1.515 这样就可以避免光线的分散,加强视野的亮度,获得清晰的物像。,实验材料: 生物显微镜及香柏油、二甲苯、载玻片等,实验方法: 1、油镜的使用方法: (1)识别油镜头:油镜头上一般刻有“oil” 等标记,镜头前端有黑、白或红色的圆圈。其
2、入光孔径也较其他物镜小。 (2)对光:用低倍镜对光,先把低倍镜调至视野最亮,并找到标本视野的适当位置。 (3)滴加香柏油:,(4)找焦点:从侧面注视镜头,缓慢向下转移粗螺旋,直到镜头浸入香柏油中并几乎与标本接触。然后在慢慢转动粗螺旋,待到从目镜中看到模糊的物像时,改用细螺旋,以寻求清晰的物像 (5)用后处理:将镜筒升起,取出标本片,滴少许二曱苯在擦镜纸上擦拭。,细菌形态观察: 微生物 是众多个体微小,结构简单,肉眼直接看不到,必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数千倍、甚至数万倍才能观察到的微小生物。包括细菌、病毒、真菌等三大类。 细菌 用微米做单位 细菌无色半透明,只有经过染色后才能观察到细菌
3、的轮廓和结构,球 菌 双球菌 一个平面分裂,成双排列链球菌 一个平面分裂,成链状葡萄球菌 多个平面分裂不规则排列球杆菌 杆 菌 棒状杆菌 分枝杆菌弧菌 只有一个弯曲,呈逗号状螺 菌 螺菌 有23个弯曲,且较僵硬弯曲菌 有多个弯曲,细菌,细菌的结构,基本结构,特殊结构,细胞壁,细胞膜,细胞浆,核质,荚膜,鞭毛,菌毛,芽胞,结 束,荚膜 细胞壁外包着的一层较厚的粘液性物质 普通染色只能看到菌体周围有未着色的透明圈。用特殊染色法可把荚膜染成与菌体不同的颜色。 荚膜的形成受遗传及环境因素的影响。具有抗吞噬、抗有害物质损伤的作用。,鞭毛 附着在菌体表面上细长并呈波状弯曲的丝状物。是细菌的运动器官。 鞭毛
4、需经特殊染色在光镜下才可看到。 根据鞭毛数量不同鞭毛菌可分为:周毛菌丛毛菌双毛菌单毛菌,菌毛 菌体周围短而直的丝状物 只在电子显微镜下才可看到。分为: 普通菌毛:数量多,可以粘附在人或动物的红细胞、呼吸道、消化道、泌尿道的粘膜上皮细胞,与细菌致病性有关。 性菌毛:长而粗,中空,数量少,参与质粒的接合传递。,芽胞 在一定条件下,胞质脱水浓缩,在菌体内部形成的一个圆形或卵圆形小体。经特殊染色,在光镜下可见。 芽胞是细菌的休眠状态,当环境适宜时,又发育成细菌的繁殖体而大量繁殖。 芽胞对热、干燥、辐射及消毒剂有很强的抵抗力,一旦污染用具、敷料、手术器械等不易杀死 高压蒸气灭菌法是杀灭芽胞的最有效方法。,