1、1生物药剂学与药物动力学实 验 讲 义湖南中医药大学药学技能教学实验中心二 O 一 O 年五月2目 录1前言-2页2. 实验一 固体制剂体外溶出度测定-34页3. 实验二 血药浓度法测定对乙酰氨基酚片的生物利用度等药动学参数-57 页3前 言生物药剂学与药代动力学是药学专业的一门专业课程，主要研究药物制剂的评价方法及药物的体内过程。生物药剂学与药代动力学实验是本课程的重要组成部分，实验中不仅将应用到本课程的理论知识，而且将贯通药动学、药剂学、分析化学、体内药物分析等课程，并使用 UV、HPLC 等现代分析仪器。为了达到本实验教学目的，要求学生上实验课前，必须认真预习，明确实验目的，了解实验内容
2、和方法，并结合课堂教学明白实验的基本原理。实验中要有严谨的科学态度和实事求是的作风，严格操作，正确使用仪器，详细做好实验记录。实验数据不得任意涂改，实验报告要求书写正确整洁。实验中严格遵守实验室规章制度，注意安全，保持实验台面整洁及室内卫生。本实验讲义主要参考华西医科大学临床药代动力学实验讲义 、中南大学湘雅医学院药学系生物药剂学与药物动力学实验讲义及北京医科大学生物药剂与药物动力学实验讲义编写，在此对两所学校的老师们表示感谢。由于时间仓促，错误及遗漏之处在所难免敬请批评指正。4实验一 固体制剂体外溶出度测定一目的要求1掌握固体制剂（片剂 丸剂 胶囊剂等）溶出度的测定原理、方法与数据处理。2熟
3、悉溶出度测定的意义，溶出度测定仪的使用方法。3了解溶出仪的基本构造与性能。二实验提要1 溶出度系指在规定介质中药物从片剂或胶囊等固体制剂中溶出的速度和程度。崩解（或溶散）度无法反映崩散后微细颗粒的再分散和溶解过程。当溶解过程为影响吸收的主要限速过程时，崩解（或溶散）时限往往不能作为判断药物制剂的吸收的指标。固体制剂的溶出度测定法是一种较简便的体外试验法，对主药成分不易从制剂中释放，久贮后变为难溶物，在消化液中溶解缓慢，与其他成分共存易发生化学变化的药物，以及治疗剂量与中毒剂量接近的药物，均应作溶出度检查。凡检查溶出度的制剂，不再进行崩解（或容散）时限检查。2 溶出度的测定原理为 Noyes-W
4、hitney 方程：dc/dt=ks(Cs-Ct) 式中：dc/dt 为溶出速度；k 为溶出速度常数；s 为固体药物表面积； Cs 为药物的饱和溶液浓度；Ct 为 t 时的药物浓度。试验中，溶出介质的量必须远远超过使药物饱和的介质所需要的量。一般至少为使药物饱和时介质用量的 510 倍。现行中国药典溶出度测定方法有转蓝法和桨法，并对装置的结构和要求作了具体的规定。通常以固体制剂中主药溶出一定量所需时间或规定时间内主药溶出百分数作为制剂质量评价指标。中国药典规定，除有特殊规定外，固体制剂在 45 分钟时的溶出度必须达到 70%。3. 本实验以阿斯匹林片为实验对象，采用桨法测定阿司匹林的溶出度。三
5、实验内容1 比较 E 值的测定 取阿司匹林 10 片，精密称定，计算出平均片重（ ） 。将W称定的片剂研细，再精密取相当于 的量，置 1000ml 容量瓶中，加入人工胃液W5（0.1mol/L 盐酸）至刻度，混匀，于水浴上 37放置 1 小时，每隔 10 分钟振摇1 次。冷至室温，滤过。精密吸取滤液 4ml 置 10ml 容量瓶中加 0.5mol/L 氢氧化钠液 0.7ml，加蒸馏水 3ml 置沸水浴中煮沸 5 分钟，取出冷却，加 0.25mol/L 盐酸6 滴，摇匀，加三氯化铁试液（人工胃液配制）0.3ml，加蒸馏水至刻度，摇匀，于 UV-9200 分光光度计上 540nm 波长处测吸收度
6、E 值。 (已经测得药片平均片重 = 0.365g E=0.262 )W2 样品 Ei 值的测定 取人工胃液（0.1mol/L 盐酸）1000ml，经 15 分钟超声脱气后，倒入贮液杯中，调节温度在 37 0.5，调节转速每分钟 100 转，将精密称定的药片一片（W ）放入贮液杯内，从人工胃液接触药片开始计时，在 45 分钟时取样 5ml 置于 10ml 小量筒中，再将所取样液用移液管精密量取 4ml 置于10ml 容量瓶中，余按比较值测定项下，自“加 0.5mol/L 氢氧化钠液 0.7ml”起依法测定，得药片溶出的 Ei 值。四实验数据处理1 计算：E=W/ E 溶出百分率=Ei/E100
7、%W2 结论：根据结果判断该药片的溶出是否符合规定？五思考题1固体制剂进行溶出度测定有和意义？哪些药物应进行溶出度测定？2影响溶出度测定结果的因素有哪些？6实验二 血药浓度法测定对乙酰氨基酚片的生物利用度等药动学参数实验目的学习并掌握血药浓度法测定片剂生物利用度等药动学参数的方法。实验材料1仪器：2十万分之一分析天平，紫外分光光度计，离心机。容量瓶 1000ml 1 个；具塞离心管 10ml10 支；20ml 24 支：刻度吸管 0.5ml 1 支；lml 12 支；5ml 3 支；玻璃漏斗(直径 34cm)10 个。其他：滤纸、试管架、刀片、塑料夹、酒精棉球、脱脂棉、注射器、注射针头、兔盒等
8、。2试剂：对乙酰氨基酚对照品。0.06mol/L 氢氧化钡溶液：取分析纯或化学纯氢氧化钡 19 克，加新鲜煮沸放冷的蒸馏水溶解成 1000ml。静置过夜，过滤即得。2硫酸锌溶液：取分析纯硫酸锌 20 克，加蒸馏水溶解成 1000ml 即得。3药品：对乙酰氨基酚片实验内容1家兔空白血的采集取体重 3kg 左右家兔一只，耳缘动脉取血或心脏取血 2080ml，于 20 ml具塞离心管中，室温静置四小时以上或 37水浴中保温 12 小时。离心(2500转/分)15 分，取血清供标准曲线制备用。2标准曲线的制备精密称取对乙酰氨基酚对照品 50mg，置 100ml 容量瓶中，以蒸馏水溶解，并添加至刻度，摇
9、匀，精密吸取 10ml 于 50m1 溶量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，即成 100ug/ml 的标准溶液，分别吸取下表所列体积置于 20ml 具塞试管中，分别加适量蒸馏水使成 10ml，然后各加上述血清 1ml 混匀，再各加0.06mol/L 氢氧化钡 4.5ml 混匀，放置 2 分钟，再分别加 2硫酸锌溶液 4.5ml，即出现明显乳状浑浊，用双层滤纸过滤。去初滤液，收集续滤液于 20 ml 干燥具塞试管中，以试药加空白血清作空白对照，在紫外分光光度计上于 245nm 处测定吸收度(A) ，以吸收度 (A)对血清药物浓度(C)进行线性回归，结果记录于表71。表 1 标准曲线测定结果管 号
10、空白 1 2 3 4 5 6标准液取量（ml） 0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0含药量（g） 0 50 100 150 200 250 300H2O（ml） 10 9.5 9.0 8.5 8.0 7.5 7.0血清（ml） 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.00.06mol/LBa（ OH） 2（ ml） 4.5 4.5 4.5 4.5 4.5 4.5 4.52%ZnSO4（ml） 4.5 4.5 4.5 4.5 4.5 4.5 4.5A 值 0.000 0.169 0.333 0.495 0.640 0.806 1.006线性回归方程 A=0.003285
11、C-0.000035713家兔体内血药浓度的测定血样品的采集：取体重 3kg 左右的健康家兔一只，实验先天下午禁食，实验当日晨耳静脉取血4ml，作为空白，然后即喂食对乙酰氨基酚片，剂量为 500mg/3kg，在给药后0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、10 小时耳静脉采血 4ml，供测定血药浓度用，喂药四小时后可以给食，采血时间见表 2。血药浓度测定：将采用的血样按前空白血处理方法处理后，小心吸取血清 1ml，加蒸馏水10ml，余下按标准曲线制备中“再各加 0.06mol/L 氢氧化钡溶液 4.5ml”起进行操作，将吸收值 A 代入标准曲线方程计算出血药浓度。结果记于表 2。表 2 血药
12、浓度测定结果兔重： kg 给药量： mg 给药时间：8:00编号 空白 1 2 3 4 5 6 7 8 9时间（hr ）0 0.25 0.5 1 1.5 2 3 4 5 7采血时间测 定 结 果A 值 0 0.101 0.396 0.649 0.636 0.516 0.463 0.338 0.210 0.092血药浓度（g/ml）8LgC实验结果及数据处理1药时曲线的绘制：用表 2 的浓度 C 对时间 t 作图，即得药时曲线图。2消除速率常数 K 的求算：文献报道对乙酰氨基酚的体内过程系一室模型，血管外给药一室模型动力学方程为：C=A（e -kt-e-kat）这里 A= KCa0通常 KaK，
13、当 t 充分大的 式中 e-Kate-kt 而可忽略，故式可改写为：式两端取对数：C=Ae -kt lgC=lgA-0.4343kt 用药时曲线中尾部近似于直线上的 3 点，即尾数数据，代入式作直线回归，求出系数：a、b，则：K=-2.303bA=lg-1a3半衰期 t1/2 的计算：t1/2=0.693/K4残数法求 Ka5药时曲线下面积 AUC0AUC0 =(C (n-1)+Cn)(tn-t(n-1)+ KCn6对乙酰氨基酚片相对生物利用度计算：若已知对乙酰氨基酚片某一标准制剂（如半合成脂肪酸酯）的AUC0 =1093（gml -1hr）,则用下式可计算出对乙酰氨基酚片的相对生物利用度：F= %100标 准 制 剂试 验 片 剂AUC9
