1、实验二 食品中抗坏血酸含量测定,食物中抗坏血酸有还原型和脱氢型两种形式，两者可通过氧化还原互变，均具有生物活性，合称为总抗坏血酸。 通常抗坏血酸在酸性条件下以还原型存在，易氧化成脱氢型抗坏血酸。,目的：新鲜食物中的抗坏血酸主要以还原型形式存在，测定还原型抗坏血酸可粗略了解该食品中抗坏血酸的浓度。通过本实验的学习，使学生掌握还原型抗坏血酸的测定原理及其测定方法。,一、还原型抗坏血酸的测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）,实验原理,用标准碘酸钾溶液标定抗坏血酸溶液； 用已标定的抗坏血酸溶液标定2,6-二氯酚靛酚染料，再用此染料滴定样品中的抗坏血酸。,3C6H6O6+KIO3C6H4O6+KI+3H2O
2、,H0-C=C-OH具有强还原性，极容易被氧化，能把+5价的碘还原成-1价的碘离子,用标准碘酸钾溶液标定抗坏血酸溶液,IO3-+5I-+6H+=3I2+3H2O,滴定样品,标定溶液,【实验仪器与试剂】,1.仪器：组织捣碎机、5.0ml微量滴定管、100m1容量瓶、50m1具塞量筒。 2.试剂 (1) 1%草酸溶液、2%草酸溶液、白陶土。 (2) 0.01mol/L碘酸钾标准储备液： (3) 0.0001mol/L碘酸钾标准应用液： (4) 1%淀粉溶液： (5) 6%碘化钾溶液： (6) 抗坏血酸溶液： (7) 碳酸氢钠溶液： (8) 2,6-二氯酚靛酚溶液：,【操作步骤】,(1) 标定抗坏血
3、酸标准溶液：吸取抗坏血酸溶液(20g/m1)5.0m1于锥形瓶中，加入6%碘化钾溶液0.5m1，1%淀粉溶液3滴，再以0.000lmol/L碘酸钾标准溶液滴定，终点为蓝色。,V1滴定时所消耗0.001mol/L碘酸钾溶液的体积(ml) V2所取抗坏血酸溶液的体积(ml) 0.05280.0001mol/L的碘酸钾1.0ml相当于抗坏血酸0.0528mg,(2)标定2,6-二氯酚靛酚溶液：,取已标定的抗坏血酸溶液5.0m1，1%草酸溶液5.0m1于锥形瓶中，摇匀，用欲标定的2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至呈淡红色，15s不褪色为止。,C抗坏血酸溶液的浓度(mg/ml) V1抗坏血酸溶液的体积(ml)
4、 V2滴定时消耗的2,6-二氯酚靛酚的体积(ml),2. 样品测定,(1) 取样品100g剪碎后置捣碎机中，按1:1(w/v)加入2%草酸制成匀浆。 (2) 称取匀浆10g于小烧杯中，倒入50m1具塞量筒中，用1%草酸溶液冲洗烧杯，稀释至刻度，振摇。如有泡沫影响定容可加数滴戊醇。,2. 样品测定,(3) 将振摇后上层清液约20m1倒入100m1锥形瓶中，加白陶士一勺，振摇数次，使充分脱色，静置。同时，取一锥形瓶，加入1%草酸20m1，加白陶士一勺，振摇数次作为空白。 (4) 取静置后上清液过滤，吸取滤液5.0m1，以标定的2,6-二氯酚靛酚溶液滴定，至溶液呈淡红色，l5s内不变化，记录染料的用量。,【实验计算】,式中： V0空白实验消耗的染料体积(m1) V1滴定样品消耗的染料体积(ml) T单位体积的染料相当于抗坏血酸的质量(mg/ml) W滴定时所用样品的质量(g),注意事项,
