1、自制质控物在 DS5 糖化血红蛋白分析仪中的应用评价李坚，隆维东，郭富饶（重庆市巴南区人民医院检验科，重庆 巴南 401320）摘要：目的 评价自制质控物在 DS5 糖化血红蛋白分析仪中的应用效果。方法 利用配套稀释液配制溶血液，并添加少量戊二醛，定值、分装，于-20保存；同时与原装配套质控品进行室内质控对比。结果 -20保存 1 个月，3 个月及 6 个月后的测定值与定值结果无显著性差异；室内质控结果与原装配套质控品具有高度一致性（r=0.86） 。结论 自制质控物作为 DS5 糖化血红蛋白分析仪的室内质控效果较好,值得推广。关键词:离子交换低压液相色谱法(LPLC)；糖化血红蛋白(HbA1
2、C)；质控物。目前,糖化血红蛋白作为糖尿病筛查、诊断、血糖控制、疗效评估的有效指标,在临床中已得到广泛使用1 2。2002 年美国糖尿病协会已将其作为检测糖尿病血糖控制的“金标准” 。而糖化血红蛋白的测定方法较多,常用的有微柱法,亲和层析法,化学发光法,胶乳凝集透射终点法等,而各系统检测之间仍存在一定的误差3 4。为此，良好的室内质控结果则可保证检测结果的稳定性，本文利用自制质控物在 DS5 糖化血红蛋白分析仪上进行应用，效果较好，现报道如下：1. 资料与方法1.1. 仪器及试剂：DS5 糖化血红蛋白分析仪及配套试剂，原装配套质控品为美国海伦娜公司提供，批号 100170B，质控范围 4.26
3、.2；1.5戊二醛。1.2. 方法：1.2.1. 自制质控物的配制：取 EDTA K2抗凝正常体检人员血液标本一份，按 DS5 糖化血红蛋白分析仪使用说明配制溶血液 100ml，并加 1.5戊二醛 1ml，用 1.5ml 离心管分装，每支 1ml，一部分用于定值，另一部分置-20冰柜保存。1.2.2. 自制质控物的定值：随机取 20 支自制质控物于当日上、下午各测 10 次，共 20 次，计算平均值（x）和标准差（SD） 。1.2.3. 干扰实验：取上述同一血液标本，按使用说明书测定 10 次（未加入戊二醛） ，并与定值时测定结果进行统计分析。1.2.4. 稳定性试验：分别将放置-20冰柜的自
4、制质控物于 1 个月,3 个月,6 个月后各取10 支解冻，测定糖化血红蛋白量，并与定值进行统计学分析。1.2.5. 自制质控物的室内质控效果观察：每日取 1 支自制质控物与配套原装质控品同临床标本一起检测，连续记录 20 天的结果，并对两组数据进行统计分析。2. 结果2.1. 自制质控物的定值结果：5.040.24(XSD)2.2. 稳定性实验：结果见表，经统计学处理后，各组与定值比较 P0.05，均无显著性差异。表 自制质控物稳定性试验结果（单位：%）定值 1 个月 3 个月 6 个月结果 5.040.24 5.050.21 * 5.080.23 * 5.100.27 * P0.052.3
5、. 干扰实验结果见表 II。经统计处理，干扰值=0.024，在 95%置信区间（1.96s=0.245）范围内，固表明戊二醛溶液对糖化血红蛋白测定无显著性干扰5。表 II 自制质控物戊二醛干扰实验结果（单位：%）次数 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10溶血液（含戊二醛）5.11 5.06 4.98 5.01 5.13 4.95 5.1 5.04 4.97 4.93溶血液（无戊二醛）5.28 5.2 4.78 5.2 4.89 5.2 4.98 4.89 5.05 5.062.4. 自制质控物与原装配套质控品的 20 天室内质控结果见表 III，配对 t 检验分析：P=0.001， t=6
6、.55 ， n=19 。经相关回归分析 Y=1.52X+0.73 ，r=0.86，说明两者具有较好的相关性。两种质控品 20 天测定结果 CV 分别为 3.9%和 4.8%，均小于 CAP能力验证（靶值8%）的质量要求。表 III 两种质控品 20 天室内质控结果（单位：%）天数 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10原装配套质控品 5.52 5.42 5.16 5.48 5.07 4.97 5.15 5.27 5.52 5.32自制质控物 5.16 5.09 4.85 5.24 4.92 4.81 4.98 5.14 5.42 5.21天数 11 12 13 14 15 16 17 18
7、19 20 CV原装配套质控品 5.27 5.38 5.07 4.96 4.88 5.04 5.06 5.28 4.96 5.32 3.9%自制质控品 5.42 5.21 4.88 4.73 4.67 4.92 4.65 5.14 4.77 5.28 4.8%3. 讨论：DS5 糖化血红蛋白分析仪采用低压阳离子交换色谱法（LPLC）联合梯度规避法,从经溶血处理的全血中分离血红蛋白亚基及变异体，分离后的血红蛋白含量可通过 415nm 处吸光平均值测得。该方法具有较高的准确性及稳定性，与高效液相色谱法（HPLC）有极好的一致性6。但该仪器所配原装质控品量较少，且价格昂贵。为此，本文自制质控物以期能
8、达到满足室内质控的需要。由于 DS5 糖化血红蛋白分析仪配套试剂中稀释液较充足，故溶血液的制备则比较方便。另加入一定量的戊二醛可稳定血红蛋白四聚体，便于长期保存7，且对实验测定结果无干扰。从试验结果来看，在-20以下其稳定期至少可达半年，与有关文献报道相似8。动态观察 20 天的室内质控效果，与原装配套的质控品具有较好的一致性。因此，自制质控品用于评价 DS5 糖化血红蛋白分析仪的室内质控，效果较好，能满足要求，故值得推广。参考文献：1 刘艳梅糖化血红蛋白糖尿病中的临床应用国际检验医学杂志，2007，28（11）：1035-10372 凌冲. 糖化血红蛋白在糖尿病诊治中的应用，赣南医学院学报，
9、2010，30（2） ，2823 李绍红，李泽民两种糖化血红蛋白分析方法的评价，国际检验医学杂志，2006，27（8）：751-7524 陈富，廖焕兰，熊小泉两种糖化血红蛋白检测系统的方法学比对和偏倚评估实用医学杂志，2009，18：3146-31485 杨昌国，许叶线性评价和干扰实验中 NCCLS 评价方案的应用临床检验杂志，1999，17（3）：184-1866 冯雪凤，贾支俊，黄群离子交换 HPLC 和 LPLC 测定 HbA1c 的比较医学临床研究，2007,24(12):2105-21067 杨懿铭, 王永彬,范华骅抗氧化酶交联的多聚血红蛋白的制备及其自氧化稳定性研究临床输血与检验,2009,11(3)：199-2038 尤昕,姜春善,金春花糖化血红蛋白在 TTAB 溶血剂中的稳定性分析中国误诊学杂志,2010,10(3):520 至编委说明：1 由于 HbA1C 测定为百分比结果，因此加全血量的多少对其无影响，故回收实验无法证实。另基质液与原装配套试剂一至且无糖化血红蛋白标准物质，因此作者未加入回收实验一项。2 HbA1C 的测定在 CLIA 能力验证计划中没有给出质量要求，故参照 2010 年 CAP 能力验证要求（靶值8%） 。
