1、分子生物学 2014 年复习题第二章题目一、单选题(17 小题,共 18 分 )1对 Ds 元件描述错误的是( )。A是自主转座元件 B是染色体断裂的位点 C与 Ac 元件相似 D内部有缺失2对非复制转座描述错误的是( )。A 要求有解离酶 B移动元件到一个新的位点,在原位点上不留元件 C要求有转座酶 D涉及保守的复制,在这个过程中转座子序列不发生改变3细菌的错配修复机制可以识别复制时新旧 DNA 链之间错误配对的碱基,这是因为( )。A新 DNA 链含有错误的碱基 B旧 DNA 链更倾向于含有错误碱基 C旧 DNA 链在特殊位点含有甲基化基团 D新 DNA 链在特殊位点含有甲基化基团4下面叙
2、述哪些是正确的?( )AC 值与生物体的形态复杂性呈正相关 BC 值与生物体的形态复杂性呈负相关 C每个门的最大 C值与生物体形态复杂性是大致相关的 D每个门的最小 C 值与生物体形态复杂性是大致相关的5DNA 在 10m 纤丝中压缩多少倍?( ) 。A6 倍 B10 倍 C40 倍 D240 倍 6下列有关 TATA 盒(Hognessbox)的叙述,哪个是正确的:( )A.它位于第一个结构基因处 B.它和 RNA 聚合酶结合C.它编码阻遏蛋白 D.它和反密码子结合7理论上自发突变是随机发生的,并均匀分布于基因组中。然而,精细分析表明,DNA 中的某些位点较其他位点更易发生突变。这些“热点”
3、突变是由于( ) 。A存在可被进一步修饰(如脱氨基 )的已修饰碱基(如甲基化) ,导致碱基转换并通过复制产生突变 BDNA 的空间结构选择性地使部分 DNA 暴露在诱变因子的作用下 C被修饰(如甲基化) 碱基的存在,易于发生错配复制并因此产生突变 D.DNA 中富含 AT 区域的存在,使得自发解链及错配碱基的掺入8一个复制子是( )。A任何自发复制的 DNA 序列(它与复制起点相连) B复制的 DNA 片段和在此过程中所需的酶和蛋白质 C任何给定的复制机制的产物(如单环) D复制起点和复制叉之间的 DNA 片段9最常见的 DNA 修饰是甲基化,在原核细胞中,下列叙述错误的是:A鉴别需修复的损伤
4、 DNA。 B区别复制后的核酸链和允许不允许继续复制。 C鉴别在重组中插入到基因组中的甲基化的外源 DNA。 D保护自身 DNA 免受内切核酸酶作用,而不保护外源DNA。10原核生物中,后随链的引物是被( )清除的。A.3至 5外切核酸酶 B.DNA 连接酶 C.DNA 聚合酶 I D.DNA 聚合酶11.真核复制子有下列哪些特征?A由于存在终止序列,所以比原核复制子要短的多。 B由于基因组较大,所以比原核复制子要长的多。 C常是双向复制,且能融合。 D全部立即激活,确保 S 期中整条染色体被复制12分子生物学检测证实:DNA 序列可在( )之间转移。A线粒体 DNA 与核 DNA B叶绿体
5、DNA 与线粒体 DNA C不同的叶绿体分子 D以上都对13通过突变分析最终将“基因”确定为遗传单位后,就必须从分子水平评价基因的功能。这一问题的成功解决是由于发现了( )。A显性等位基因上的突变使其表型类似隐性基因 B突变基因不能编码产生存在于野生型个体中的蛋白质 C突变基因的蛋白质产物与野生型基因的产物有差别 D营养缺陷型细菌只有经过致突变剂处理后才能在基本培养基上生长14以下哪一个在 260nm 波长下具有最大的单位质量吸收:( )A.双链 DNA B.单核苷酸 C.RNA D.蛋白质16Copia 元件( )。A两侧为定向重复 B串联排列 C在果蝇基因组中约有 20000 个拷贝 D不
6、被转录17下列关于滚环复制描述错误的是( ) 。A是细菌 DNA 的主要复制方式 B可以使复制子大量扩增 C是噬菌体 DNA 在细菌中最通常的一种复制方式 D复制子中编码切口蛋白的基因的表达是自动调节的二、名词解释(1 小题,共 2 分)1超螺旋三、判断题(13 小题,共 14 分 )1拓扑异构酶 I 和 II 可以使 DNA 产生正向超螺旋。2在高盐和低温条件下由 DNA 单链杂交形成的双螺旋表现出几乎完全的互补性,这一过程可看作是一个复性(退火) 反应。3单个核苷酸通过磷酸二酯键连接到 DNA 骨架上。4复制叉上的单链结合蛋白通过覆盖碱基使 DNA 的两条单链分开,这样就避免了碱基配对。5
7、DNA 分子整体都具有强的电负性,因此没有极性。6DNA 的复制需要 DNA 聚合酶和 RNA 聚合酶。7DNA 双螺旋的 B 型代表了 DNA 的一般结构,z 型 DNA 到目前为止仅在低等真核细胞中被鉴定。8只要子链和亲本链中的一条或两条被甲基化,大肠杆菌中的错配校正系统就可以把它们区别开来,但如果两条链都没有甲基化则不行。9转座酶可以识别整合区周围足够多的序列,这样,转座子不整合到基因的中间,因为破坏基因对细胞是致死的。10 TnA 转座子家族通常含有三个基因:转座酶,解离酶,氨苄青霉素抗性基因。11Cot1/2 与基因组的大小有关12若一个二倍体酵母细胞中发生了一个错义突变,而这一突变
8、将另外一个不同的氨基酸引入了一个分解代谢酶的催化位点,从而使得这种酶可以利用别的底物。这就是所谓的功能获得性突变。13拓扑异构酶之所以不需要 ATP 来断裂和重接 DNA 链,是因为磷酸二酯键的能量被暂时储存在酶活性位点的磷酸酪氨酸连接处。四、填空题(14 小题,共 32 分)1双链 DNA 放入蒸馏水中会发生 。2一个核苷酸的 5-磷酸和相邻核苷酸的 3-羟基连接形成 键3在 DNA 复制过程中,连续合成的子链称为,另一条非连续合成的子链称为。4DNA 后随链合成的起始要一段短的 ,它是由 以核糖核苷酸为底物合成的。5DNA 复制时需要解开 DNA 的双螺旋结构,参与该过程的酶有 与 ;原核
9、生物有三种DNA 聚合酶,其中 的核苷聚合活性最强。6假设一个不含双螺旋的 DNA 分子有 4800 个碱基对。一共存在 圈螺旋;如果该分子以线性、双链的形式存在,它的长度是 m7大肠杆菌的染色体配对需要_,它与单链 DNA 结合并使同源双链 DNA 与之配对。一般性重组的主要中间体是_,也用它的发现者名字命名为_.8由一个亲代环状 DNA 分子产生两个子代环的复制模式是 ,由一个亲代环产生带有线性分支环的复制模式是 。在一个环中,生长叉的复制移动会产生 超螺旋,DNA 促旋酶会产生 超螺旋。9根据 DNA 复性动力学研究, DNA 序列可以分成: , , 。10偶然情况下,在同一基因两个稍微
10、不同拷贝(等位基因) 间发生重组的过程中,一个等位基因经过_过程会被另一等位基因代替。通过_基因重组,游动 DNA 序列和一些病毒可进入或离开一条目的染色体。1132gml 浓度的 DNA 溶液的 A260 值是_12DNA 修复包括三个步骤:_对 DNA 链上不正常碱基的识别与切除,_对已切除区域的重新合成,_对剩下切口的修补。13_途径可以切去任何造成 DNA 双螺旋大片段改变的 DNA 损伤;大肠杆菌中,任何由于DNA 损伤造成的 DNA 复制障碍都会诱导_的信号,即允许跨过障碍进行复制,给细胞一个生存的机会。14只有真核 DNA 聚合酶_和_显示_外切核酸酶活性。五、简答题(8 小题,
11、共 30 分)1请描述 C 值矛盾,并举一个例子说明。2RecA 蛋白是怎样调节 SOS 反应的?3哪些条件可促使 DNA 复性(退火)?5大肠杆菌染色体的分子质量大约是 25X109Da,核苷酸的平均分子质量是 330Da,两个邻近核苷酸对之间的距离是 0.34nm,双螺旋每一转的高度(即螺距) 是 34nm ,请问:(1)该分子有多长?(2)该 DNA 有多少转?6一个基因组有两个序列。一个是 A,另一个是 B,各有 2000bp 长,其中一个是由 400bp 的序列重复 5次而成,另一个则由 50bp 的序列重复 40 次而成,问:(1) 这个基因组的大小怎样?(2) 这个基因组的复杂性
12、如何?答案部分,一、单选题(17 小题,共 4 分)1A2A 3C4D 5A6B7A8A9C10C11 B1213C14B16A17A二、名词解释(1 小题,共 4 分 )1超螺旋:如果固定 DNA 分子的两端,或者本身是共价闭合环状 DNA 或与蛋白质结合的 DNA 分子,DNA 分子两条链不能自由转动,额外的张力不能释放,DNA 分子就会发生扭曲,用以抵消张力。这种扭曲称为超螺旋,是双螺旋的螺旋。三、判断题(13 小题,共 4 分)1错 2错 3对 4错 5错 6对 7错 8错 9错 10对 11对 12对 13对四、填空题(14 小题,共 4 分)1变性 2磷酸二酯键 3先导链,后随链
13、4RNA 引物,DNA 引发酶 5拓扑异构酶,解旋酶,聚合酶6480 圈 1.632 7RecA 蛋白,交叉链互换,Holliday 连接8 复制 滚环复制 正超螺旋 负超螺旋 9高度重复序列,中度重复序列,单拷贝序列。10基因突变,位点专一的 110.64 12DNA 修复核酸酶,DNA 聚合酶,DNA 连接酶13核苷酸切除修复,SOS 反应 14 3 5五、简答题(8 小题,共 4 分)1对高等真核生物而言,生物体基因组的大小与其复杂性并没有直接的联系。亲缘关系相近的生物体的DNA 含量可能相差很大。例如,一些两栖类动物比其他的两栖类动物的 DNA 含量多 100 倍,但它们的进化地位并不
14、因此而更高。2RecA 蛋白识别损伤 DNA,引发 LexA 蛋白的自身催化切割。LexA 蛋白的失活,可以除去那些含有编码修复与防御蛋白质基因(如 recA、uvrAB 和 umuC)的操纵子上的阻抑蛋白。由于 lexA 的表达是自我调节的,所以 SOS 反应会在产生必须修复功能的同时,也会产生中止反应的产物,使反应恢复正常状态。产生这些产物的操纵子也受 LexA 蛋白的阻抑。3降低温度、pH 和增加盐浓度可以促进 DNA 复性( 退火)。5(1)l 碱基 =330Da,1 碱基对=660Da碱基对数=25X109 660=3 8X106=3800kb 每个碱基对相距 034nm,这样染色体
15、 DNA 分子的长度=38X106X034nm=13X106nm=13mm(2)该 DNA 双螺旋中的转数=38X106X03434=38X105。6基因组的大小是指在基因组中 DNA 的总量、复杂性是指基因组中所有单一序列的总长度。(1)4000bp。(2)450bp。第二章 作业1、请列举 3 项实验证据来说明为什么染色质中 DNA 与蛋白质分子是相互作用的。2、简述组蛋白都是有那些类型的修饰,其功能分别是什么?3、DNA 复制时为什么前导链是连续复制,而后随链是以不连续的方式复制?并请以大肠杆菌为例简述后随链复制的各个步骤。4、真核生物 DNA 的复制在哪些水平上受调控?5、什么是转座子
16、?可分为哪些种类?6、什么是 SNP? SNP 作为第三代遗传标记的优点是什么?答案1、Tm 值高;DNA 酶消化慢;DNA 聚合酶和 RNA 聚合酶催化复制和转录活性低于自由 DNA。2、组蛋白的修饰作用包括甲基化、乙酰化、泛素化等,降低了组蛋白所带正电荷,直接或间接影响基因的转录活性,组蛋白甲基化可发生在组蛋白的赖氨酸和精氨酸残基上,与基因激活和基因沉默相关。组蛋白乙酰化主要发生在核心组蛋白上,组蛋白乙酰化呈多样性,核小体上有多个位点可提供乙酰化,乙酰化/去乙酰化修饰影响染色质结构和基因活化,高乙酰化水平会使转录活化,低乙酰化则抑制转录。磷酸化? 组蛋白泛素化修饰位点为高度保守的赖氨酸残基
17、,但与经典蛋白质泛素化不同,不会导致蛋白质的降解,但能够招募核小体到染色体,参与 X 染色体的失活,影响组蛋白的甲基化和基因转录。(p27)3、复制叉,引发酶,冈崎片段,然后以与复制叉移动相反的方向按照 53方向合成一系列的冈崎片段,引物去除,连接酶连接。 以大肠杆菌为例见 p51。4、 (1)细胞生活周期水平调控: 也称限制点调控,即决定细胞停留在 G1 期还是进入 S 期。 (2)染色体水平调控:决定不同染色体或同一染色体不同部位的房子字按一定顺序在 S 期起始复制。(3)复制子水平调控:决定复制的起始与否。这种调控从单细胞上午到高等生物是高度保守的。5、转座子是存在于染色体 DNA 上可
18、自主复制和位移基本单位。种类有:(1)插入序列(IS) 是最简单的转座子,不含任何宿主基因、是细菌染色体或质粒 DNA 的正常组成部分。末端具有反向重复序列。(2)复合型转座子 是一类带有某些抗药性基因的转座子,其两翼往往是两个相同或高度同源的 IS序列。(3)除以上两种外,还存在一些没有 IS 的、体积庞大的转座子-TnA 家族。其带有三个基因,其中一个编码 -内酰胺酶,另外两个则是转座作用所必需的。 (P-63)6、SNP 即单核苷酸多态性。主要指在基因水平上由单个核苷酸的变异所引起的 DNA 序列多态性。优点见 P-66.第三章题目部分,一、单选题(9 小题,共 9 分)1RNA 聚合酶
19、的 C 端结构域(CTD)的磷酸化与( )无关。ATFIID 中特异 TAF 蛋白的存在 BTFIIH 的激酶活性 D从起始聚合酶到延伸聚合酶的转换 E起始因子 TFIIA、TFIIB 及 TFIID 的释放2下面哪一项是对三元转录复合物的正确描述?( )A 因子、核心酶和双链 DNA 在启动子形成的复合物 B全酶、TFI 和解链 DNA 双链形成的复合物 C全酶、模板 DNA 和新生 RNA 形成的复合物 D三个全酶在转录起始位点(tsp)形成的复合物3起始细菌基因转录的 DNA 结合蛋白称为:A操纵子 B启动子 C阻遏物 D 因子4发生于转录以及 RNA 剪接之后的核苷酸序列的改变,称为(
20、 )。ARNA 修饰 B翻译后修饰 C甲基化 DRNA 编辑5转酯反应( ) 。A不需要 ATP B拆开一个化学键后又形成另一个化学键 C涉及对糖磷骨架 OH 基团的亲核攻击D以上都正确6 DNA 依赖的 RNA 聚合酶的通读可以靠( )。A 因子蛋白与核心酶的结合 B抗终止蛋白与一个内在的 P 因子终止位点结合,因而封闭了终止信号 CNusA 蛋白与核心酶的结合 D抗终止蛋白以它的作用位点与核心酶结合,因而改变其构象,使终止信号不能被核心酶识别8下列有关 TATA 盒(Hognessbox)的叙述,哪个是正确的:A.它位于第一个结构基因处 B.它和 RNA 聚合酶结合C.它编码阻遏蛋白 D.
21、它和反密码子结合9转酯反应:A不需要 ATP。 B断开一个键,同时形成一个新键。 C涉及 OH 基团对糖一磷酸主链的亲核攻击。D所有上述都正确。二、判断题(7 小题,共 7 分)1候选三磷酸核苷通过对生长中 RNA 链的 磷酸的亲和攻击加到链上。2在转录终止子柄部的 A-T 碱基对可以增强结构的稳定性3如果剪接发生在一个内含子的 GU 序列与相邻内含子的 AG 序列间,会使位于两个内含子之间的外显子缺失。4RNA 编辑在锥虫的线粒体中经常出现,主要包括多聚 C 残基的添加和缺失。5细菌细胞用一种 RNA 聚合酶转录所有的 RNA,而真核细胞则有三种不同的 RNA 聚合酶。6RNA 编辑是在转录
22、之前或转录之后发生的改变 mRNA 序列组成的一系列不同寻常的反应过程。7I 型剪接分两步进行。首先,一个外源腺苷残基的 3OH 攻击内含子第一个核苷酸的 5端。三、填空题(9 小题,共 30 分)1真核生物的 mRNA 加工过程中,5端加上 ,在 3端加上 ,后者由 催化。如果被转录基因是不连续的,那么 一定要被切除,并通过 过程将 连接在一起。2原核生物只有种 RNA 聚合酶而真核生物有三种,每一种都有其特定的功能。聚合酶合成,聚合酶合成,聚合酶合成和。3RNA 是由核糖核苷酸通过键连接而成的一种。在四膜虫中前体 tRNA 的切除和的拼接是通过机制。4一些基因具有称为增强子的附加元件,它们
23、位于启动子的或,甚至可以位于相反的方向上。它们在相关 DNA 形成大时与基本启动子相互作用。它们惟一的作用是增加启动子处转录因子的5测定分子量100106U 的 DNA 分子量用_.6写出两种合成后不被切割或拼接的 RNA: 和 ;与 mRNA 分子互补的一段单链核苷酸叫作序列。7原核生物体 RNA 的合成由 RNA 聚合酶全酶完成, 负责_;原核中 RNA 合成的终止有时必须_参加。8 因子专一性表现在( )。A 因子修饰酶(SME)催化 因子变构,使其成为可识别应激启动子的 因子 B不同基因编码识别不同启动子的 因子 C不同细菌产生可以互换的 因子 D 因子参与起始依靠特定的核心酶9真核
24、mRNA 的 3端的 polyA 的重要功能是_和_四、简答题(9 小题,共 45 分)1哪些转录因子含有 TBP? 为什么它们被称为定位因子? 请用一个模型解释为什么所有三种 RNA 聚合酶都能与 TBP 发生作用?2概括说明 因子对启动子调节的辅助功能。3比较真核生物与原核生物转录起始的第一步有什么不同。4列举 4 种天然存在的具有催化活性的 RNA。答案部分,一、单选题 1A 2C3D4D5D6 D8B9 D二、判断题 1对 2错 3对 4错 5对 6错 7错三、填空题(9 小题,共 9 分)1帽子结构,多腺苷化尾,poly(A)聚合酶,内含子,剪接,外显子2一,rRNA,mRNA,tR
25、NA, 5SrRNA 3磷酸二酯,多聚体,内含子,外显子,自动催化4上游,下游,环,浓度 5琼脂糖凝胶电泳,电子显微镜,沉降速度6真核生物中的 5SrRNA,原核生物中的 mRNA ;反义 RNA7识别结合-35 区; 因子 8 B 9增加 mRNA 稳定性,翻译水平上的调控四、简答题(9 小题,共 9 分)2 因子(除了 RpoN)有识别启动子序列的结构域。作为游离的蛋白质, 因子并不具备与 DNA 结合的构象。当 因子与核心酶结合后构象发生改变,其 N 端游离出与 DNA 结合的结构域。 因子的这一调节方式是为了防止游离的 因子与启动子区结合,而阻碍了依赖于全酶的转录启动。另外,这样也可防
26、止形成全酶的 因子的浓度被稀释,因为每一个细胞中,大约每 3 个核心酶对应于一个 因子。3细菌中,DNA 指导的 RNA 聚合酶核心酶由四个亚基组成(两个 亚基,一个 亚基,一个 亚基)。核心酶与 亚基结合产生全酶。核心酶可以催化 NTP 的聚合,但只有全酶能够引发转录的开始。主要的步骤是:具有特异识别能力的 亚基识别转录起始点上游的启动子特异同源序列,这样可以使全酶与启动子序列结合力增加,形成封闭的二元复合物。关键的作用是 RNA 聚合酶与 DNA 的相互作用。真核生物中,当含 TBP 的转录因子与 DNA 相互作用时,其他因子也结合上来,形成起始复合体,这一复合体再与 RNA 聚合酶结合,
27、因此主要是 RNA 聚合酶与蛋白质之间的作用。4I 组内含子、II 组内含子、RNaseP、锤头型核酶。第四章题目部分一、单选题(21 小题,共 22 分 )1反密码子中哪个碱基对参与了密码子的简并性(摇摆性)?( )A第一个 B第二个 C第三个 D第一个与第二个2氨酰 tRNA 分子同核糖体结合不需要下列哪些蛋白质因子参与?( )AEF-Tu BEF-Ts CeIF-2 DEF-13反密码子中的哪个碱基在密码子阅读中摆动?A 第一个 B 第二个 C 第一个和第二个 D 第二个和第三个4氨酰 tRNA 促进多少个核糖核苷酸三联体的翻译? A.1 B.3 C.20 D.615下列叙述不正确的是(
28、 )。A共有 20 个不同的密码子代表遗传密码 B色氨酸和甲硫氨酸都只有一个密码子 C密码子的第三位具有可变性 D不同的密码子可能编码同一个氨基酸6真核起始因子 eIF-3 的作用是( ) 。A帮助形成亚基起始复合物(elF-3、GTP、Met-tRNA 、40S) B帮助亚基起始复合物(三元复合物、40S) 与mRNA5端的结合 C若与 40S 亚基结合,防止 40S 与 60S 亚基的结合 D与 mRNA5端帽子结构相结合以解开二级结构7术语“转录三元复合物”描述如下:A 因子、核心酶和启动子处的双链 DNA 序列。 B全酶复合物、模板 DNA 和新生的 RNA。 C全酶复合物、TFI 和
29、解链双螺旋 DNA。 D转录起始位点(tsp)处的三种全酶的复合物。8tRNA 分子上结合氨基酸的序列是ACAA-3 BCCA-3 CAAC-3 DACA-3 EAAC-3 9以下哪些不是遗传密码的特征?( )A密码子与氨基酸的数量相同 B密码子几乎在任一物种中都通用 C一些氨基酸由多个密码子编码 D密码子是简并的10氨酰-tRNA 的功能决定于:A.氨基酸 B. 反密码子 C.氨基酸与反密码子之间的距离 D.氨酰-tRNA 合成酶活性1112与 mRNA 的 GCU 密码子对应的 tRNA 的反密码子是:( )A.CGA B.IGC C.CIG D.CGI13氨酰 tRNA 的作用由( )决
30、定。A其氨基酸 B其反密码子 C其固定的碱基区 D氨酰 tRNA 合成酶的活性14GAUC 四个碱基中,在密码子的第三位上缺乏特异性的是( )。AG BA C U DC15下列哪些是起始反应的产物? AATP+Pi BGTP+Pi C起始因子 D多肽163下列关于遗传密码的叙述,错误的是A碱基缺失、插入可致框移突变 BAUG 是起始密码CUUU 是终止密码 D一个氨基酸可有多达 6 个密码子17下列关于原核生物转录的叙述中不正确的是( ) 。AIF-2 与含 GDP 的复合物中的起始 tRNA 结合 B核糖体的小亚基能直接同 mRNA 作用 C细菌所有蛋白质的第一个氨基酸是修饰过的甲硫氨酸 D
31、多肽链的第一个肽键的合成不需要 EF-G18蛋白质生物合成中的终止密码不包括( ) 。A UAC B UAA C UAG D UGA19关于 tRNA 中的内含子的叙述,错误的是:A通过两步转酯反应从 tRNA 中移去。 B有一段与反密码子互补的序列。 C形成一种同样的二级结构。 D被蛋白质酶(内切核酸酶和连接酶 )移去。20多数氨基酸都有两个以上密码子,下列哪组氨基酸只有一个密码子?( )A.苏氨酸、甘氨酸 B.脯氨酸、精氨酸 C.丝氨酸、亮氨酸 D.色氨酸、甲硫氨酸21以下哪项不属于翻译后修饰的机制?( )A甲基化 B遍在蛋白化 C磷酸化 D去磷酸化二、名词解释(2 小题,共 4 分 )
32、1SD 序列 2 EF-Tu三、判断题(11 小题,共 11 分 )1核糖体小亚基最基本的功能是连接 mRNA 与 tRNA,大亚基则催化肽键的形成。2模板和反义 DNA 链可以被描述为:模板链可被 RNA 聚合酶阅读而合成互补的核酸mRNA ,这是核糖体蛋白质合成中的有义链。3无义密码子同等于终止密码子。4真核生物和原核生物的转录和翻译都是耦联的5RNaseP 是在 tRNA 加工过程中起作用的酶,含有蛋白质和 RNA 两种成分,无论在体内和体外,起作用时都需要 RNA 和蛋白质的存在。6摇摆碱基位于密码子的第三位和反密码子的第一位。7在肽链延伸的过程中,加入下一个氨基酸比加入氨酰 tRNA
33、 更能激活每个氨酰 tRNA 间的连接。8因为 AUG 是蛋白质合成的起始密码子,所以甲硫氨酸只存在于蛋白质的 N 端。9延伸因子 eEF-1 帮助氨酰 tRNA 进入 A 位点依赖于 ATP 内一个高能键的断裂。10三种类型的 RNA 相互作用以起始和维持蛋白质的合成。11蛋白质合成时,每加入一个氨基酸要水解 4 个高能磷酸键(4 个密码子) ,所消耗的总能量比起 DNA转录(每加入一个核苷酸用两个高能磷酸键,6 个密码子) 要少。四、填空题(5 小题,共 9 分)1 包括两个 tRNA 分子的结合位点: ,即 P 位点,紧密结合与多肽链延伸尾端连接的 tRNA 分子; 即 A 位点,结合带
34、有一个氨基酸的 tRNA 分子。2在活细胞中,最稳定的 RNA 类型是 。3真核生物 rRNA 加工主要是两个内容:_和_。4如果碱基的改变产生一个并不改变氨基酸残基编码的密码子,并且不会造成什么影响,这就是_突变。如果改变了氨基酸残基的密码,这就是_突变。5假定摆动假说是正确的,那么最少需要种 tRNA 来翻译 61 种氨基酸密码子。五、简答题(8 小题,共 41 分)1为什么 mRNA 的翻译起始密码子的上游必须含有不被翻译的核糖核苷酸?2简述真核与原核细胞中翻译起始的主要区别。3有一个被认为是 mRNA 的核苷酸序列,长 300bp,你怎样才能:(1)证明此 RNA 是 mRNA 而不是
35、tRNA 或 rRNA。(2)确定它是真核还是原核 mRNA。4氨酰 tRNA 合成酶的功能是什么?答案部分,(卷面共有 50 题,100.0 分,各大题标有题量和总分 )一、单选题(21 小题,共 3 分)1A2B3答案:A 4答案:D5A6B7B8B9 A10B11 12B13B14B15 A16C17A18A19A20D21A二、名词解释(2 小题,共 3 分 )1SD 序列:转录出的 mRNA 要进入核糖体上进行翻译,需要一段富含嘌呤的核苷酸序列与大肠杆菌16SrRNA 末端富含嘧啶的序列互补,是核糖体的识别位点。2EF-Tu:原核生物蛋白质合成的延长因子之一,EF-Tu 首先与 GT
36、P 结合,然后再与氨基酰 tRNA 结合成三元复合物,这样的三元复合物才能进入 A 位。此时 GTP 水解成 GDP,EF-Tu 和 GDP 与结合在 A 位上的氨基酰 tRNA 分离。三、判断题(11 小题,共 3 分)1对 2对 3对 4错 5错 6错 7对 8错 9错 10对11错,蛋白质合成消耗的总能量比转录多,因为每个 mRNA 分子可以产生成百上千个蛋白质分子。四、填空题(5 小题,共 3 分)1核糖体,肽酰 tRNA 结合区,氨酰 tRNA 结合区 2核糖体 RNA3分子内切割,化学修饰 4同义 错义 532五、简答题(8 小题,共 3 分)1原核与真核细胞的 mRNA 必须在翻
37、译起始密码子上游有一段不被翻译的核糖核苷酸上游区( 前导序列),一则可以为核糖体结合提供位点,二则保持结合的稳定性。2原核细胞与真核细胞翻译起始的主要区别是来自 mRNA 的本质差异以及小亚基与 mRNA 起始密码子上游区结合的能力。原核细胞 mRNA 较不稳定,而且是多顺反子,在 IF-3 介导下,通过 16SrRNA 的 3端在核糖体结合位点与小亚基直接结合后,原核细胞翻译起始复合物(1F-3、30S、mRNA 、IF-2、GTP、fMet-tRNA)就装配起来了。而在真核细胞中,需要几种起始因子 (eIF-4、4A、4B)帮助 mRNA 启动,起始复合物(SIC、40S 亚基、elF-2
38、、GTP、Met、tRNA)才能结合(在 elF-4 和 elF-3 因子的促使下)到mRNA 帽子上。一旦结合,SIC 开始向 mRNA 下游区搜索,直至找到第一个 AUG 密码子。3根据序列组成进行判断:(1)此序列太长不可能是 tRNA。如果它是 rRNA,应该含有许多特殊元件,如假尿嘧啶和 5甲基胞嘧啶;同时应具有可以形成发夹环的反向重复序列。如果是 mRNA 则应有 AUG 起始密码子、一段相应的氨基酸密码子和一个相应的终止密码子构成的可读框。(2)所有的真核生物 mRNA在 5,端都含有一个 7甲基鸟苷,而且大多数还在 3端有一个长的 poly(A)尾巴。这些都是原核生物mRNA
39、所不具有的,但是原核生物 mRNA 靠近 5,端有一个核糖体结合序列(SD 序列) 。4两个类型的 10 种氨酰 tRNA 合成酶各自对应一种功能性氨酰 tRNA。通过两步反应,特定的氨基酸先通过磷酸化与氨酰 AMP 结合,然后与相关的 tRNA 结合(磷酸二酯键的断裂 ),这一反应的精确性是mRNA 遵循遗传密码进行翻译的基础。 第三、四章作业10.什么是上升突变?什么下降下降突变?上升突变:增加 Pribnow 区共同序列的同一性,转录水平会上升。例如在乳糖操纵子的启动子中,将其Pribnow 区从 TATGTT 变成 TATATT,就会提高启动子的效率,提高乳糖操纵子基因的转录水平。下降
40、突变:如果 Pribnow 区从 TATAAT 变成 AATAAT 就会大大降低其结构基因的转录水平。在原核生物中,-35 区与-10 区之间的距离大约是 16 到 19bp,小于 15bp 或大于 20bp 都会降低启动子的活性,即造成下降突变。12.真核与原核生物基因转录有哪些差异?(课本 P93)15.简述、类内含子的剪接特点。 答: 类内含子的剪接主要是转酯反应, 即剪接反应实际上是发生了两次磷酸二脂键的转移。 I 类内含子的切除体系中, 在 第一个转酯反应由一个游离的鸟苷或者鸟苷酸介导, 鸟苷或鸟苷酸的 3OH 作为亲核基团攻击内含子 5端的磷酸二 脂键,从上游切开 RNA 链。在第
41、二个转酯反应中,上游外显子的自由 3OH 作为亲核基团攻击内含子 3位核苷酸 上的磷酸二脂键,使内含子被完全切开,上下游两个外显子通过新的磷酸二脂键相连。 类内含子主要存在于真核生物的线粒体和叶绿体 rRNA 基因中,在类内含子切除体系中,转酯反应无需游离鸟苷或 鸟苷酸,而是由内含子本身的靠近 3端的腺苷酸2OH 作为亲核基团攻击内含子 5端的磷酸二脂键,从上游切开 RNA 链后形成套索结构。再由上游外显子的自由 3OH 作为亲核基团攻击内含子 3位核苷酸上的磷酸二脂键,使 得内含子被完全切开,上下游两个内含子通过新的磷酸二脂键相连。16.什么是套索状结构?哪些类型 RNA 的剪接中会形成该结
42、构?1)在 RNA 剪接过程中,内含子分支位点的保守腺苷酸的 2,OH 攻击 5,剪接位点保守鸟苷酸的磷酸基团,使内含子 5,端与外显子 3端之间的磷酸二酯键断开,故形状像套索。2)pre-mRNA 与类自剪接内含子形成套索状结构。第四章 5简述摆动学说。摆动学说认为,在密码子与反密码子的配对中,前两对严格遵守碱基配对原则,第三对碱基有一定的自由度,可以“摆动” ,因而使某些 tRNA 可以识别 1 个以上的密码子。反密码子的第一位碱基为 A 或 C 时,只识别一种密码子,为 G 或 U 时,可识别两种,为 I 时可识别三种密码子。12.哪些种类抗生素只能特异性地作用于原核生物核糖体?哪些只作
43、用于真核生物核糖体?哪些既能抑制原核生物核糖体,也能抑制真核生物核糖体?氯霉素 四环素 红霉素 青霉素 卡那霉素只能特异性地作用于原核生物核糖体白喉毒素 放线菌酮只作用于真核生物核糖体潮霉素 嘌呤霉素 链霉素 蓖麻毒素既能抑制原核生物核糖体,也能抑制真核生物核糖体16.蛋白质有哪些翻译后的加工修饰?其作用机制和生物学功能是什么?(课本 P144-146)1)N 端 fMet 或 Met 的切除 N 端的甲酰基被脱甲酰化酶水解 得到有功能的蛋白因子 2)二硫键的形成 通过两个半胱氨酸的氧化作用生成 稳定蛋白质天然构象 3)特定安氨基酸的修饰1.磷酸化 由多种蛋白激酶催化2.糖基化 大多数由内质网
44、中的糖基化霉催化3.甲基化 由 N-甲基转移酶催化4 乙酰化 由 N-乙酰转移酶催化4)切除新生肽链中的非功能片段 合成特定功能的具有活性的蛋白质分子。生物学功能:蛋白质经过以上各种加工修饰才能变成有活性的蛋白质在生命活动过程中执行其功能。5-6 章习题题目部分一、单选题(4 小题,共 4 分)1早期在肺炎球菌中进行的转化实验表明A细胞的遗传特性通过于不同特性细菌的 DNA 接触后会发生永久性的变化。 B细菌的非遗传特性通过于特性不同的细菌的 DNA 接触后会发生永久性的变化。 C所有遗传物质必须都含有 DNA. D细菌中的所有遗传物质必然携带在 DNA 分子上。2多克隆位点:( )A.含有许
45、多拷贝的克隆化基因 B.使得对克隆所用的限制酶的选择具有灵活性 C.使得对克隆所用的生物种类的选择具有灵活性。 D.含有许多拷贝的同一种限制酶切位点3有两种不同的方法可对核酸测序:化学测序法(MaxamGilbert)和酶测序(Sanger)法。Sanger 测序法的原理和优点是:A碱基和特定染料的不同的作用。 B合成的引物的延伸和 DNA 修复合成的可靠终止。 C末端标记 DNA 与限制位点的相互关系。 D同时对 DNA 双螺旋的两条链的测序能力。4哪一类型的突变最不可逆?( )A缺失 B转换 C颠换 D插入三、填空题(1 小题,共 2 分)1总 RNA 分离的方法很多,常采用的是 和 这两
46、种 RNase 抑制剂来抑制 RNase 的活性四、简答题(14 小题,共 49 分 )1一份蛋白质的混合物要在 3 种丙烯酰胺凝胶中电泳,每种凝胶都有一种不同的 pH 值,每种凝胶中都能看到 5 个条带。能否得出混合物中只有 5 种蛋白质的结论?试解释。如果是一个线性 DNA 片段的混合物的电泳,可否得出相同的结论?3在基因操作实践中有哪些检测核酸和蛋白质相对分子质量的方法?4色谱法常被用来从其他 RNA 分子中分离真核 mRNA,分离柱的惰性介质上连接着寡-dT。请问这种分离方法的原理是什么?答案部分,一、单选题(4 小题,共 2 分)1A2B3B4 A三、填空题(1 小题,共 2 分)1异硫氰酸胍 b-巯基乙醇四、简答题(14 小题,共 2 分)1不能,因为形状不同会影响移动性即两种分子量和形状都不同的蛋白质分子,在电泳中可能具有相同的移动性。可以,所有线性 DNA 片段都具有相同的基本形状和相同的电荷聚集率。因此,如果所有条带的强度看起来相同,那么可以得出存在 5 种不同的 DN