1、1习 题第一章1什么是分子生物学？广义的分子生物学：蛋白质及核酸等生物大分子结构和功能的研究都属于分子生物学的范畴，即从分子水平阐明生命现象和生物学规律。狭义的分子生物学：偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或 DNA 的复制、转录、表达和调控等过程，当然也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。2列举分子生物学发展历程中的 10 个重大事件。1944 年，著名微生物学家 Avery 等在对肺炎双球杆菌的转化实验中证实了 DNA 是遗传物质。1953 年，Waston 和 Crick 提出了 DNA 双螺旋模型。1954 年，Gamnow 从理论上研究了遗传密码的编码规律，后
2、来 Nirenberg 等于 1961 年破译了第一批遗传密码。Crick 在前人基础之上提出了中心法则。1956 年，A. Kornberg 在大肠杆菌中发现了 DNA 聚合酶I，这是能在试管中合成 DNA 的第一种核酸酶。1961 年，F. Jacob J. Monod 提出调节基因表达的操纵子模型。1967 年，Gellert 发现了 DNA 连接酶。1970 年，Smith 和 Wilcox 等分离得到第一种限制性核酸内切酶。1970 年，Temin 和 Baltimore 在 RNA 肿瘤病毒中发现逆转录酶。19721973 年，H. Boyer 和 P. Berg 等发展了重组 D
3、NA技术，并完成了第一个细菌基因的克隆。19751977 年，Sanger、Maxam 和 Gilbert 发明了 DNA序列测序技术。1977 年第一个全长 5387bp 的噬菌体 X174 基因组测定完成。1981 年，Cech 等发现四膜虫 26S rRNA 前体自剪接作用，发现了核酶（ribozyme） 。1982 年，Prusiner 等在感染瘙痒病的仓鼠脑中发现了阮病毒（Prion） 。1985 年，Saiki 等发明了聚合酶链式反应（PCR） 。1988 年，McClintock 发现可移动的遗传因子（转座子） 。 。 。2001 年，RNAi 干扰机制的发现。，端粒及端粒酶的发
4、现。2006 年，成功获得诱导干细胞（iPS 细胞）2010 年，获得第一个“人造细胞”3简述分子生物学的研究内容与研究热点。研究内容DNA 重组技术（基因工程）基因的表达调控生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学）基因组、功能基因组与生物信息学研究基因的表达调控生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学）基因组、功能基因组与生物信息学研究分子生物学的研究热点及领域结构生物学（Structural Biology） 分子发育生物学（Molecular Developing Biology）分子细胞生物学 (Molecular Cell Biology)分子神经生物学（Molecular N
5、eurobiology）分子肿瘤学（Molecular Tumorology）4根据你所学的知识谈谈分子生物学在生命科学以及社会经济活动中的地位与作用。人口与粮食 ;健康与疾病 ; 环境与生态 ;能源与资源5简述分子生物学发展史中的三大理论发现和三大技术发明。理论:1940 年艾弗里（O.Avery）等人通过肺炎球菌的转化试验证明了生物的遗传物质是 DNA，而且证明了通过 DNA 可以把一个细菌的性状转移给另一个细菌；1950 年沃森（J.D.Watson）和克里克(F.Crick)发现了 DNA 分子的双螺旋结构及 DNA 半保留复制机理；1960 年关于遗传信息中心法则的确立。技术: 限制
6、性内切核酸酶; DNA 连接酶; 基因载体的发现6. 21 世纪是生命科学的世纪。20 世纪后叶分子生物学的突破性成就，使生命科学在自然科学中的位置起了革命性的变化。试阐述分子生物学研究领域的三大基本原则，三大支撑学科和研究的三大主要领域？DNA RNA RNA2三大基本原则:构成生物大分子的单体是相同的，共同的核酸语言，共同的蛋白质语言生物遗传信息表达的中心法则相同 生物大分子单体的排列（核苷酸、氨基酸）的不同 三大支撑学科:Cytology、Genetics、Biochemistry研究的三大主要领域：基因的分子生物学：基因的概念、结构、复制、表达、重组、交换结构生物学：生物大分子的结构与
7、功能、生物大分子之间的互作生物技术理论与应用第二章一名词解释：1、基因: 基因是合成一种功能蛋白或 RNA 分子所必需的全部 DNA 序列，即 DNA 分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，是遗传物质的最小功能单位。2、端粒酶: 端粒酶是参与真核生物染色体末端的端粒DNA 复制的一种核糖核蛋白酶。由 RNA 和蛋白质组成，其本质是一种逆转录酶。它以自身的 RNA 作为端粒 DNA复制的模版，合成出富含脱氧单磷酸鸟苷Deoxyguanosine Monophosphate(dGMP)的 DNA 序列后添加到染色体的末端并与端粒蛋白质结合，从而稳定了染色体的结构。3、假基因:与正常基因结构相似，
8、但没有正常功能的DNA 序列 4、Alu 序列家族:Alu 重复序列是哺乳动物基因组中SINE 家族的一员，约有 50 万份拷贝。由于这种 DNA 序列中有限制性内切核酸酶 Alu 工的识别序列 AGCT，所以称为 Alu 重复序列。Alu 序列两端各有一个正向重复序列，末端有一个 poly(A)尾。5、断裂基因: 编码某一 RNA 的基因中有些序列并不出现在成熟的 RNA 序列中，成熟 RNA 的序列在 基因中被其他的序列隔开6、重叠基因: 是指两个或两个以上的基因共有一段 DNA序列，或是指一段 DNA 序列成为两个或两个以上基因的组成部分。7、变性: DNA 双螺旋区的氢键断裂，使双螺旋
9、的两条链完全分开变成单链，这一链分离的过程叫做变性。8、复性:变性 DNA 在适当条件下，两条彼此分开的链又可以重新地合成双螺旋结构的过程（退火） 。9、C 值矛盾:在真核生物中，每种生物的单倍体基因组的 DNA 总量总是恒定的，称为 C 值,形态学的复杂程度与 C-值的不一致称为 C 值矛盾.10、中心法则:指遗传信息从 DNA 传递给 RNA，再从 RNA传递给蛋白质，即完成遗传信息的转录和翻译的过程。也可以从 DNA 传递给 DNA，即完成 DNA 的复制过程。这是所有有细胞结构的生物所遵循的法则。11、增色效应:指在 DNA 变性的过程中，他在 260nm 的吸收值先是缓慢上升，达到某
10、一温度时及骤然上升.二、填空题1病毒 X174 及 M13 的遗传物质都是 单链 DNA 。2AIDS 病毒的遗传物质是 单链 RNA 。3X 射线分析证明一个完整的 DNA 螺旋延伸长度为 3.4nm 。4氢 键负责维持 A-T 间（或 G-C 间）的亲和力5天然存在的 DNA 分子形式为右手 型螺旋。6证明 DNA 是遗传物质的两个关键性实验是 肺炎双球菌转化实验、T 噬菌体侵染实验 这两个实验中主要的论点证据是：生物体吸收的外源 DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能。7DNA 是 两条核苷酸链 通过 氢键 连接起来的 双螺旋结构。DNA 和 RNA 的最大区别是在 碱基种类 。8超螺旋
11、是有 的 。有 正 超螺旋和 负 超螺旋两种。三、选择题（单选或多选）1证明 DNA 是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和 T2 噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是（ C） 。A从被感染的生物体内重新分离得到 DNA 作为疾病的致病剂BDNA 突变导致毒性丧失C生物体吸收的外源 DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能DDNA 是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子E真核心生物、原核生物、病毒的 DNA 能相互混合并彼此替代21953 年 Watson 和 Crick 提出（ A ） 。A多核苷酸 DNA 链通过氢键连接成一个双螺旋 BDNA 的
12、复制是半保留的，常常形成亲本-子代双螺旋杂合链C三个连续的核苷酸代表一个遗传密码D遗传物质通常是 DNA 而非 RNAE分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变3DNA 双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键，并因此改变了它们的光吸收特性。以下哪些是对 DNA 的解链温度的正确描述？（ C D ）A哺乳动物 DNA 约为 45，因此发烧时体温高于 42是十分危险的3B依赖于 A-T 含量，因为 A-T 含量越高则双链分开所需要的能量越少C是双链 DNA 中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值D可通过碱基在 260nm 的特征吸收峰的改变来确定E就是单链发生断裂（磷酸二酯键断裂）时的温
13、度4DNA 的变性（ A C E ） 。 A包括双螺旋的解链 B可以由低温产生 C是可逆的 D是磷酸二酯键的断裂 E包括氢键的断裂5在类似 RNA 这样的单链核酸所表现出的“二级结构”中，发夹结构的形成（ AD ） 。A基于各个片段间的互补，形成反向平行双螺旋B依赖于 A-U 含量，因为形成的氢键越少则发生碱基配对所需的能量也越少C仅仅当两配对区段中所有的碱基均互补时才会发生D同样包括有像 G-U 这样的不规则碱基配对E允许存在几个只有提供过量的自由能才能形成碱基对的碱基6DNA 分子中的超螺旋（ A CE ） 。A 仅发生于环状 DNA 中。如果双螺旋在围绕其自身的轴缠绕后（即增加缠绕数）才
14、闭合，则双螺旋在扭转力的作用下，处于静止B在线性和环状 DNA 中均有发生。缠绕数的增加可被碱基配对的改变和氢键的增加所抑制C可在一个闭合的 DNA 分子中形成一个左手双螺旋。负超螺旋是 DNA 修饰的前提，为酶接触 DNA 提供了条件D是真核生物 DNA 有比分裂过程中固缩的原因E是双螺旋中一条链绕另一条链的旋转数和双螺旋轴的回转数的总和7DNA 在 10nm 纤丝中压缩多少倍？（ A ）A6 倍 B10 倍 C40 倍 D240 倍 E1000 倍8下列哪一条适用于同源染色单体？（ D ）A有共同的着丝粒 B遗传一致性C有丝分列后期彼此分开D两者都按照同样的顺序，分布着相同的基因，但可具有
15、不同的等位基因E以上描述中，有不止一种特性适用同源染色单体9 DNA 在 30nm 纤丝中压缩多少倍？（ C ）A6 倍 B10 倍 C40 倍 D240 倍 E1000 倍10DNA 在染色体的常染色质区压缩多少倍？（ E ）A6 倍 B10 倍 C40 倍 D240 倍 E1000 倍11DNA 在中期染色体中压缩多少倍？（ E ）A6 倍 B10 倍 C40 倍 D240 倍 E10000 倍12分裂间期的早期，DNA 处于（ A ）状态。A单体连续的线性双螺旋分子 B半保留复制的双螺旋结构 C保留复制的双螺旋结构 D单链 DNA E以上都不正确13分裂间期 S 期，DNA 处于（ B
16、）状态。A单体连续的线性双螺旋分子 B半保留复制的双螺旋结构 C保留复制的双螺旋结构 D单链 DNA E以上都不正确14、在 DNA 组成中符合当量定律，即 A=T, G=C, A+G=T+C; 这就是- -A-定则。A Chargaff B Watson-Crick C van de Waal D S-D15、DNA 的复制方向只能以 D 方向复制。 A 2-3 B 5-2 C 3-5 D 5-316、逆转录酶和逆转录作用的发现，才使-C-得到补充和完善。A 复制 B 转录 C 中心法则 D 翻译17、B 型 DNA 中，螺旋的半径是_B_。A.5 B.10 C.15 D.1818核酸对紫外
17、线的最大吸收峰在哪一波长附近？A280nm B260nm C200nm D340nm E220nm19某 DNA 分子中腺嘌呤的含量为 15%，则胞嘧啶的含量应为：A15% B30% C40% D35% E7%20双螺旋 DNA 有 A 型、B 型、C 型以及 Z 型等结构形成，在正常生理条件下占优势的形式是： AA 型 BB 型 CC 型 DZ 型四、判断题1在高盐和低温条件下由 DNA 单链杂交形成的双螺旋表现出几乎完全的互补性，这一过程可看作是一个复性（退火）反应。（错误）2单个核苷酸通过磷酸二酯键连接到 DNA 骨架上。(正确)3DNA 分子整体都具有强的负电性，因此没有极性。（错误）
18、4在核酸双螺旋（如 DNA）中形成发夹环结构的频率比单链分子低。发夹结构的产生需要回文序列使双链形成对称的发夹，呈十字结构。(正确)5病毒的遗传因子可包括 1-300 个基因。与生命有机4体不同，病毒的遗传因子可能是 DNA 或 RNA，（但不可能同时兼有！）因此 DNA 不是完全通用的遗传物质。(正确)6一段长度 100bp 的 DNA，具有 4100 种可能的序列组合形式。(正确)7C0t1/2 与基因组大小相关。(正确)8C0t1/2 与基因组复杂性相关。(正确)9非组蛋白染色体蛋白负责 30nm 纤丝高度有序的压缩。(正确)10因为组蛋白 H4 在所有物种中都是一样的，可以预期该蛋白质
19、基因在不同物种中也是一样的。（错误）（不同物种组蛋白 H4 基因的核苷酸序列变化很大，）11、DNA 是所有生物遗传信息的携带者。 （错误）考查点 ： 生物遗传信息的载体。12、Z 型 DNA 是右手双螺旋。 （错误）13、在 DNA 双螺旋结构模型中，碱基处于螺旋的外侧。（错误）五、简答题1DNA 携带哪两类不同的遗传信息?答：从化学角度看，不同的核苷酸仅是含氮碱基的差别。从信息方面看，储存在 DNA 中的信息是指碱基的顺序，而碱基不参与核苷酸之间的共价连接，因此储存在 DNA的信息不会影响分子结构，来自突变或重组的信息改变也不会破坏分子。2在何种情况下有可能预测某一给定的核苷酸链中“G”的
20、百分含量？答：由于在 DNA 分子中互补碱基的含量相同的，因此只有在双链中 G+C 的百分比可知时，G%=（G+C）%/23真核基因组的哪些参数影响 C0t1/2 值？答：C0t1/2 值受基因组大小和基因组中重复 DNA 的类型和总数影响。4哪些条件可促使 DNA 复性（退火）？答：降低温度、pH 和增加盐浓度。5为什么 DNA 双螺旋中维持特定的沟很重要？答：形成沟状结构是 DNA 与蛋白质相互作用所必需。6大肠杆菌染色体的分子质量大约是 2.5109Da，核苷酸的平均分子质量是 330Da，两个邻近核苷酸对之间的距离是 0.34nm，双螺旋每一转的高度（即螺距）是3.4nm，请问：（1）
21、该分子有多长？答：1 碱基=330Da，1 碱基对=660Da碱基对=2.5109/660=3.8106 kb染色体 DNA 的长度=3.8106/0.34=1.3106nm=1.3mm（2）该 DNA 有多少转？答：转数=3.81060.34/3.4=3.81057说明三股螺旋 DNA 形成的条件与结构特点及其可能的功能。答：在 1949-1951 年间，E Chargaff 发现：（1）不同来源的 DNA 的碱基组成变化极大（2）A 和 T、C 和 G 的总量几乎是相等的（即 Chargaff规则）（3）虽然（A+G）/（C+T）=1，但（A+T）/（G+C）的比值在各种生物之间变化极大8
22、为什么在 DNA 中通常只发现 A-T 和 C-G 碱基配对？答：（1）C-A 配对过于庞大而不能存在于双螺旋中；G-T 碱基对太小，核苷酸间的空间空隙太大无法形成氢键。（2）A 和 T 通常形成两个氢键，而 C 和 G 可形成三个氢键。正常情况下，可形成两个氢键的碱基不与可形成三个氢键的碱基配对。9为什么只有 DNA 适合作为遗传物质？答：是磷酸二酯键连接的简单核苷酸多聚体，其双链结构保证了依赖于模板合成的准确性，DNA 的以遗传密码的形式编码多肽和蛋白质，其编码形式多样而复杂10简述真核生物的染色体结构，它们是如何组装的?有几种组蛋白参与核小体的形成?答：DNA 和组蛋白构成核小体 多个核
23、小体形成串珠链 串珠链绕成每圈 6 个核小体的中空螺旋管的微纤丝 微纤丝与多种非蛋白结合形成的突环，每个突环含若干功能基因 由 6 个突环形成一个玫瑰花结状结构 组装成每圈 30 个玫瑰花结的螺旋圈 由 10个螺旋圈再组装成一个染色单体2 分子 H3 和 2 分子 H4 形成四聚体；H2A 和 H2B11核酸变性后分子结构和性质发生了哪几种变化?答：变性：DNA 双螺旋区的氢键断裂，使双螺旋的两条链完全分开变成单链，这一链分离的过程叫做变性。变化：DNA 溶液的黏度大大下降；沉淀速度增加；浮力密度上升；紫外吸收光谱升高；酸碱滴定曲线改变；生物活性丧失。第三章一名词解释：1、复制: 亲代双链 D
24、NA 分子在 DNA 聚合酶的作用下，分别以每单链 DNA 分子为模板，聚合与自身碱基可以互补配对的游离的 dNTP,合成出两条与亲代 DNA 分子完全相同的子代 DNA 分子的过程。52、半保留复制: 在 DNA 复制时，子代双链 DNA 中，一条链来自亲代，另一条链是新合成的互补链，这种方式称半保留复制。3、复制叉: 复制开始，在复制起点形成的一个特殊的叉形结构，是复制有关的酶和蛋白质组装成复合物和新链合成的部位，这个部位称为复制叉。4、引发酶: 为 DNA 复制中引物-RNA 的合成酶，狭义的引发酶是指大肠杆菌 dnaG 遗传因子的产物。5、复制子: 是 DNA 复制时从一个 DNA 复
25、制起点到复制终止的一段区域，能够独立地进行复制。6、半不连续复制: DNA 双链复制时，一条链是连续合成的, 另一条链是不连续合成的, 这种前导链的连续复制和后随链的不连续复制方式称 DNA 的半不连续复制。7、先导链: 又称前导链，是在复制叉处从 53进行连续合成的一条子链。8、后随链: 又称滞后链，复制方向与复制叉的方向相反,后随链的合成要等前导开始合成从而将其模板链暴露出来后,才得以进行。后随链上先合成了不连续的冈崎片段,然后在 DNA 聚合酶 I 的催化下切除RNA 引物,同时填补切除 RNA 后的空隙,再在 DNA 连接酶的作用下,将冈崎片段连接成一条连续的 DNA 单链。9、DNA
26、 复制的转录激活: DNA 复制起始时通过RNApolymerse 的转录过程而解开局部的双链。10、夹子装置器: 又称为-复合物，主要功能是帮助 亚基夹住 DNA，并有增强核心酶活性的作用。11、DNA 连接酶: 是将 DNA 双链上的两个缺口同时连接起来的酶。若双链 DNA 中一条链有切口, 一端是3-OH, 另一端是 5-磷酸基,连接酶可催化这两端形成磷酸二酯键，而使切口连接的酶。12、SSB: 单链结合蛋白，稳定已被解开的 DNA 单链，阻止复性和保护单链不被核酸酶降解。13、HU: 类组蛋白，和 DNA 结合蛋白，能促进复制的起始。14、DnaA: 引发体的部分组成，辨认复制起始点。
27、15、DnaB: 引发体的部分组成，与 DnaC 相互作用，解螺旋作用。16、DnaC: 引发体的部分组成，与 DnaB 相互作用，使 DnaB 蛋白组装到复制起始点上。17、回环模型: 滞后链绕酶一圈形成的环形，使得滞后链和前导链朝着同一方向沿复制叉进行。二、填空题1在 DNA 合成中负责复制和修复的酶是 DNA 聚合酶2染色体中参与复制的活性区呈 Y 开结构，称为 DNA复制叉3在 DNA 复制和修复过程中，修补 DNA 螺旋上缺口的酶称为 DNA 连接酶4在 DNA 复制过程中，连续合成的子链称为先导链，另一条非连续合成的子链称为后随链5如果 DNA 聚合酶把一个不正确的核苷酸加到 3端
28、，一个含 35活性的独立催化区会将这个错配碱基切去。这个催化区称为校正核酸外切酶。6DNA 后随链合成的起始要一段短的 RNA 引物，它是由DNA 引发酶以核糖核苷酸为底物合成的。7复制叉上 DNA 双螺旋的解旋作用由 DNA 解旋酶催化的，它利用来源于 ATP 水解产生的能量沿 DNA 链单向移动。8帮助 DNA 解旋的单链结合蛋白（SSB）与单链 DNA 结合，使碱基仍可参与模板反应。9DNA 引发酶分子与 DNA 解旋酶直接结合形成一个引发体单位，它可在复制叉上沿后随链下移，随着后随链的延伸合成 RNA 引物。10如果 DNA 聚合酶出现错误，会产生一对错配碱基，这种错误可以被一个通过甲
29、基化作用来区别新链和旧链的判别的错配校正（错配修复）系统进行校正。11对酵母、细菌以及几种生活在真核生物细胞中的病毒来说，都可以在 DNA 独特序列的复制起点处观察到复制泡的形成。12DNA 拓扑酶可被看成一种可形成暂时单链缺口（I型）或暂时双链缺口（II 型）的可逆核酸酶。13拓扑异构酶通过在 DNA 上形成缺口 松弛超螺旋结构。14真核生物中有五种 DNA 聚合酶，它们是 A. B. C. D. E. 15 有真核 DNA 聚合酶 和 显示 35 外切核酸酶活性。16. 原核生物 DNA 复制的主要酶是 DNA-pol,真核生物中 DNA 复制的主要酶是 DNA 聚合酶 与 DNA 聚合酶
30、 17、大肠杆菌 RNA 聚合酶的核心酶为 2。18、在 DNA 复制中，在 dUTPase 突变菌株中，冈崎片段变大一些。在尿嘧啶-N-糖苷酶突变菌株中，冈崎片段变小一些20. DNA 拓扑异构酶是与超螺旋结构有关的酶.6三、选择题（单选或多选）1DNA 的复制（ B、D ）。A包括一个双螺旋中两条子链的合成 B遵循新的子链与其亲本链相配对的原则C依赖于物种特异的遗传密码 D是碱基错配最主要的来源E是一个描述基因表达的过程2一个复制子是（ C ）。A细胞分裂期间复制产物被分离之后的 DNA 片段 B复制的 DNA 片段和在此过程中所需的酶和蛋白质C任何自发复制的 DNA 序列（它与复制起点相
31、连）D任何给定的复制机制的产物（如单环） E复制起点和复制叉之间的 DNA 片段3真核生物复制子有下列特征，它们（ C ）。A比原核生物复制子短得多，因为有末端序列的存在 B比原核生物复制子长得多，因为有较大的基因组C通常是双向复制且能融合D全部立即启动，以确保染色体的 S 期完成复制E不是全部立即启动，在任何给定的时间只有大约 15%具有活性4下述特征是所有（原核生物、真核生物和病毒）复制起始位点都共有的是（A、C、D）。A起始位点是包括多个短重复序列的独特 DNA 片段B起始位点是形成稳定二级结构的回文序列C多聚体 DNA 结合蛋白专一性识别这些短的重复序列D起始位点旁侧序列是 A-T 丰
32、富的，能使 DNA 螺旋解开E起始位点旁侧序是 G-C 丰富的，能稳定起始复合物5下列关于 DNA 复制的说法正确的有（ D、E、F ）。A按全保留机制进行B按 35方向进行C需要 4 种 dNMP 的参与D需要 DNA 连接酶的作用E涉及 RNA 引物的形成 F需要 DNA 聚合酶 I6滚环复制（ B、D、E ）A是细胞 DNA 的主要复制方式 B可以使复制子大量扩增C产生的复制子总是双链环状拷贝 D是噬菌体 DNA在细菌中最通常的一种复制方式E复制子中编码切口蛋白的基因的表达是自动调节的7标出下列所有正确的答案。（ B、C ）A转录是以半保留的方式获得两条相同的 DNA 链的过程BDNA
33、依赖的 DNA 聚合酶是负责 DNA 复制的多亚基酶C细菌转录物（mRNA）是多基因的D 因子指导真核生物的 hnRNA 到 mRNA 的转录后修饰E促旋酶（拓扑异构酶 II）决定靠切开模板链而进行的复制的起始和终止8哺乳动物线粒体和植物叶绿体基因组是靠 D 环复制的。下面哪一种叙述准确地描述了这个过程？（ C、D ）A两条链都是从 oriD 开始复制的，这是一个独特的二级结构，由 DNA 聚合酶复合体识别B两条链的复制都是从两个独立的起点同时起始的C两条链的复制都是从两个独立的起点先后起始的D复制的起始是由一条或两条（链）替代环促使的E ter 基因座延迟一条链的复制完成直到两个复制过程同步
34、9DNA 多聚体的形成要求有模板和一个自由 3-OH 端的存在。这个末端的形成是靠（A、B、D、E ）。A在起点或冈崎片段起始位点（3-GTC）上的一个RNA 引发体的合成B随着链替换切开双链 DNA 的一条链C自由的脱氧核糖核苷酸和模板一起随机按 Watson-Crick 原则进行配对D靠在 3端形成环（自我引发） E一种末端核苷酸结合蛋白结合到模板的 3端10对于一个特定的起点，引发体的组成包括（ A、C ）。A在起始位点与 DnaG 引发酶相互作用的一个寡聚酶B一个防止 DNA 降解的单链结合蛋白CDnaB 解旋酶和附加的 DnaC、DnaT、PriA 等蛋白DDnaB、单链结合蛋白、D
35、naC、DnaT、PriA 蛋白和DnaG 引发酶EDnaB 解旋酶、DnaG 引发酶和 DNA 聚合酶 III11在原核生物复制子中以下哪种酶除去 RNA 引发体并加入脱氧核糖核苷酸？（ C ）ADNA 聚合酶 III BDNA 聚合酶 II CDNA 聚合酶 I D外切核酸酶 MFI EDNA 连接酶12使 DNA 超螺旋结构松驰的酶是（ C ）。A引发酶 B解旋酶 C拓扑异构酶 D端粒酶 E连接酶13从一个复制起点可分出几个复制叉？（ B ）7A1 B2 C3 D4 E4 个以上14、DNA 的复制是（ A ）。A 半保留复制 B 全保留复制 C 不保留复制 D 不确定性复制。15、研究
36、表明：在 DNA 复制中，新生链是分别复制的，一条是连续的，另一条是（ B ）。A 也是连续的 B 不连续的 C 确定的 D 不确定的16、大肠杆菌基因组 DNA 有（ D ）个复制子。A 3 B 4 C 2 D 117、DNA 复制时需要的 RNA 引物是由（ C ）催化合成的。A、DNA 聚合酶 B、RNA 引物酶 C、引发酶 D、RNA 合成酶18、几乎所有生物 DNA 都含有负超螺旋，的含有百分数为（ B ）。A、1% B、5% C、10% D、12%19DNA 复制时，下列哪一种酶是不需要的？（ E ）ADNA 指导的 DNA 聚合酶 B拓扑异构酶CDNA 连接酶 D解链酶 E限制性
37、内切酶20端粒酶与真核生物线形 DNA 末端的复制有关，它有一种:（ B ）A. RNA polymerase B. reverse transcriptase C. nuclease D. ribonuclease21真核生物复制起始点的特征为:（ B ） A.富含 GC 区 B.富含 AT 区 C.Z-DNA D.无明显特征四、判断题1大肠杆菌中，复制叉以每秒 500bp 的速度向前移动，复制叉前的 DNA 以大约定 3000r/min 的速度旋转。( ) （如果复制叉以每秒 500 个核苷酸的速度向前移动，那么它前面的 DNA 必须以 500/10.5=48 周/秒的速度旋转，即 288
38、0r/min）2所谓半保留复制就是以 DNA 亲本链作为合成新子链DNA 的模板，这样产生的新的双链 DNA 分子由一条旧链和一条新链组成。( )3“模板”或“反义” DNA 链可定义为：模板链是被RNA 聚合酶识别并合成一个互补的 mRNA，这一 mRNA 是蛋白质合成的模板。( )4DNA 复制中，假定都从 53同样方向读序时，新合成 DNA 链中的核苷酸序列同模板链一样。 ( ) 5DNA 的 53合成意味着当在裸露 3OH 的基团中添加 dNTP 时，除去无机焦磷酸 DNA 链就会伸长。( )6在先导链上 DNA 沿 53方向合成，在后随链上则沿 35方向合成。( )7如果 DNA 沿
39、 35合成，那它则需以 5三磷酸或 3脱氧核苷三磷酸为末端的链作为前体。( )8大肠杆菌 DNA 聚合酶缺失 35校正外切核酸酶活性时会降低 DNA 合成的速率但不影响它的可靠性。( )9DNA 的复制需要 DNA 聚合酶和 RNA 聚合酶。( )10复制叉上的单链结合蛋白通过覆盖碱基使 DNA 的两条单链分开，这样就避免了碱基配对。( ) 11只要子链和亲本链中的一条或两条被甲基化，大肠杆菌中的错配校正系统就可以把它们区别开来，但如果两条链都没有甲基化则不行。( ) 12大肠杆菌、酵母和真核生物病毒 DNA 的新一轮复制是在一个特定的位点起始的，这个位点由几个短的序列构成，可用于结合起始蛋白
40、复合体。( )13拓扑异构酶 I 之所以不需要 ATP 来断裂和重接 DNA链，是因为磷酸二酯键的能量被暂储存在酶活性位点的磷酸酪氨酸连接处。( )14酵母中的拓扑异构酶 II 突变体能够进行 DNA 复制，但是在有丝分列过程中它们的染色体不能分开。( )15拓扑异构酶 I 和 II 可以使 DNA 产生正向超螺旋。（ ）16拓扑异构酶 I 解旋需要 ATP 酶。（ ）17RNA 聚合酶 I 合成 DNA 复制的 RNA 引物。（ ）18当 DNA 两条链的复制同时发生时，它是由一个酶复合物，即 DNA 聚合酶 III 负责的。真核生物的复制利用三个独立作用的 DNA 聚合酶，Pol 的一个拷
41、贝（为了起始）和 Pol 的两个拷贝（DNA 多聚体化，当 MF1 将 RNA 引发体移去之后填入）。( )19从 ori 开始的噬菌体复制的起始是被两个噬菌体蛋白 O 和 P 所控制的。在 E.coli 中 O 和 P 是 DnaA和 DnaC 蛋白的类似物。基于这种比较，O 蛋白代表一个解旋酶，而 P 蛋白调节解旋酶和引发酶结合。( )20线粒体 DNA 的复制需要使用 DNA 引物。（ ）821在真核生物染色体 DNA 复制期间，会形成链状DNA。（ ）22滚环复制是原核生物 DNA 复制的一种特殊形式。 （ ）23大肠杆菌双向复制原点 OriC 只是一个点。（ ）24大肠杆菌在 DNA
42、 复制时，引物的形成是由 DNA 聚合酶催化合成的。（ ）25半保留复制是指有 50%的基因是新合成的，另 50%的基因是上一代的。（ ）五、问答题1描述 Meselson-Stahl 实验，说明这一实验加深我们对遗传理解的重要性。Meselson-Stahl 实验证实了 DNA 的半保留复制。证实了两个假说：（1）复制需要两条 DNA 的分离（解链/变性）（2）通过以亲本链作为模板，新合成的 DNA 链存在于两个复制体中。2请列举可以在线性染色体的末端建立线性复制的三种方式。（1）染色体末端的短重复序列使端粒酶引发非精确复制。（2）末端蛋白与模板链的 5端共价结合提供核苷酸游离的 3端（3）
43、通过滚环复制，DNA 双链环化后被切开，产生延伸的 3-OH 端3为什么一些细菌完成分裂的时间比细菌基因组的复制所需的时间要少？为什么在选择营养条件下，E.coli中可以存在多叉的染色体或多达 4 个以上的开环染色体拷贝，而正常情况下染色体是单拷贝的？答：单拷贝复制由细胞中复制起点的浓度控制的。在适宜的培养条件下，细胞呈快速生长，稀释起始阻遏物的浓度，使复制连续进行。4在 DNA 聚合酶 III 催化新链合成以前发生了什么反应？答：DnaA（与每 9 个碱基重复结合，然后使 13 个碱基解链） 、DnaB(解旋酶)和 DnaC（先于聚合酶 III 与原核复制起点相互作用。后随链复制需要引发体完
44、成的多重复制起始，引发体由 DnaG 引发酶与多种蛋白质因子组成。5DNA 复制起始过程如何受 DNA 甲基化状态影响？答：亲本 DNA 通常发生种属特异的甲基化。在复制之后，两模板-复制体双链 DNA 是半甲基化的。半甲基化 DNA对膜受体比对 DnaA 有更高的亲和力，半甲基化 DNA 不能复制，从而防止了成熟前复制。6请指出在 oriC 或 X 型起点起始的 DNA 复制之间存在的重要差异。答：oriC 起点起始的 DNA 复制引发体只含有 DnaG。X 型起点起始的 DNA 复制需要额外的蛋白质Pri 蛋白的参与。Pri 蛋白在引物合成位点装配引发体。7大肠杆菌被 T2 噬菌体感染，当
45、它的 DNA 复制开始后提取噬菌体的 DNA，发现一些 RNA 与 DNA 紧紧结合在一起，为什么？答：该 DNA 为双链并且正在进行复制。RNA 片段是后随链复制的短的 RNA 引物。8DNA 连接酶对于 DNA 的复制是很重要的，但 RNA 的合成一般却不需要连接酶。解释这个现象的原因。答：DNA 复制时，后随链的合成需要连接酶将一个冈崎片段的 5端与另一冈崎片段的 3端连接起来。而 RNA合成时，是从转录起点开始原 53一直合成的，因此不需 DNA 连接酶。9曾经认为 DNA 的复制是全保留复制，每个双螺旋分子都作为新的子代双螺旋分子的模板。如果真是这样，在 Meselson 和 Sta
46、hl 的实验中他们将得到什么结果？答：复制一代后，一半为重链，一半为轻链；复制两代后，1/4 为重链，3/4 为轻链。10解释在 DNA 复制过程中，后随链是怎样合成的。答：（1）将大肠杆菌在 15N 培养基中培养多代，得到的 DNA 两条链都被标记，形成重链。（2）细胞移到 14N 培养基中培养，提取 DNA；（3）将 DNA 进行氯化铯密度梯度离心， ；（4）经过一定时间后，DNA 在离心管聚集成带，每个带的密度均与该点的氯化铯溶液的密度相同；（5）照相决定每条带的位置和所含的 DNA 量。1）经 15N 培养基，所有 DNA 都聚集在一条重密度带；2）经 14N 培养基一代后，所有的 D
47、NA 形成一条中间密度带；3）经 14N 继续培养基一代，DNA 一半是中间密度带，另一半是轻密度带；4）最后，他们证明第一代的分子是双链，且为半保留复制。11描述滚环复制过程及其特征。答：仅是特定环状 DNA 分子的复制方式。（1）复制过程：1）环状双链 DNA 的+链被内切酶切开；2）以-链为模板，DNA 聚合酶以+链的 3端作为引物合成新的+链，原来的+链 DNA 分子的 5端与-链分离；3）+链的 3端继续延长；94）引发酶以离开的+链为模板合成 RNA 引物，DNA 聚合酶以+链为模板合成新的-链；5）通常滚环复制的产物是一多聚物，其中大量单位基因组头尾相连。（2）复制过程的特征：1）复制是单方向不对称的；2）产物是单链 DNA，但可通过互补链的合成转变为双链；3）子代 DNA 分子可能是共价连接的连环分子；4）连环分子随后被切成与单个基因组相对应的片段。12简述 E.Coli DNA 复制起始的主要步骤。DNA 合成在复制起点(oriC)的起始，Primase(引物酶)合成 RNA 引物。DNA helicase (DNA 解旋酶)打开 DNA 双链，SSB 结合单链 DNA, DNA Gyrase(DNA 促旋酶)引入负螺旋，减少正螺旋。在 DNA 聚合酶 III 作用下,5-3合成前导链和后随链前体
