1、1考点 33 观察类实验和鉴定提取类实验直击考纲 能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。1观察类实验操作流程模板2鉴定类实验的操作流程模板1观察类实验实验名称细胞的状态观察对象 染色剂 生物材料(及特殊要求)观察 DNA 和 RNA在细胞中的分布死细胞DNA 和 RNA的分布吡罗红甲基绿染色剂DNA、RNA 同时存在时染色剂要混合使用且现配现用观察线粒体 活细胞 线粒体 健那绿染液人的口腔上皮细胞用生理盐水配制健那绿染液，2用显微镜观察观察细胞的减数分裂死细胞无(为固定装片)蝗虫精母细
2、胞低温诱导染色体加倍死细胞改良苯酚品红染液观察细胞的有丝分裂死细胞染色体龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)洋葱根尖分生区细胞染色前需漂洗干净用显微镜观察多种多样的细胞活或死细胞细胞酵母菌细胞、水绵细胞、叶的保卫细胞、鱼的红细胞等观察叶绿体 活细胞 叶绿体藓类的叶(或菠菜叶、黑藻叶)观察植物细胞的质壁分离与复原活细胞紫色中央液泡的大小和原生质层的位置无(无需染色)紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞2.鉴定提取类实验实验名称 试剂 颜色 生物材料 备注淀粉的鉴定 碘液 蓝色 脱色的叶片等若材料有颜色，需先脱色还原糖的鉴定 斐林试剂砖红色沉淀苹果或梨匀浆等现配现用、水浴加热脂肪的鉴定苏丹(或)染液橘黄(或红)色花生种
3、子切片(或匀浆)需用高倍镜观察(匀浆不需用高倍镜观察)蛋白质的鉴定 双缩脲试剂 紫色 豆浆、稀蛋清等先加 A 液，后加B 液，摇匀使用3绿叶中色素的提取和分离提取液：无水乙醇；分离液：层析液胡萝卜素：橙黄色；叶黄素：黄色；叶绿素 a：蓝绿色；叶绿素 b：黄绿色新鲜的绿叶(如菠菜叶)加入二氧化硅是为了研磨得更充分；碳酸钙可防止在研磨中色素被破坏DNA 的粗提取和鉴定二苯胺试剂 蓝色 鸡血细胞等沸水浴加热 5 min3.关注洋葱在实验中的“一材多用”取材部位 实验名称 取材原因植物细胞的质壁分离和复原 外表皮细胞含紫色大液泡使用高倍显微镜观察细胞的多样性细胞较大，外表皮细胞有大液泡，内表皮细胞有明
4、显的细胞核鳞片叶观察 DNA 和 RNA 在细胞中的分布 内表皮细胞近于无色叶管状叶 叶绿体中色素的提取和分离观察根尖分生组织细胞的有丝分裂材料易得，且分生区细胞分裂能力强，染色体数目少，易于观察根低温诱导植物染色体数目的变化材料易得，且低温(4 )下根尖也能分裂生长，诱导染色体变异率较高4.辨析有关颜色反应类实验的五种颜色颜色 原理红 还原糖斐林试剂 砖红色沉淀 水 浴 加 热 4脂肪苏丹染液红色RNA吡罗红溶液红色染色体(质)醋酸洋红液红色黄脂肪苏丹染液橘黄色叶绿体中色素分离的滤纸条中：胡萝卜素橙黄色，叶黄素黄色绿DNA甲基绿染液绿色线粒体健那绿染液蓝绿色酒精橙色的重铬酸钾溶液 灰绿色 在
5、 酸 性 条 件 下叶绿体中色素分离的滤纸条中：叶绿素 b黄绿色，叶绿素 a蓝绿色蓝淀粉碘液蓝色DNA二苯胺试剂 蓝色 水 浴 加 热 紫染色体(质)龙胆紫溶液紫色蛋白质双缩脲试剂紫色5.常用试剂的种类及作用试剂体积分数或质量浓度作用原理 相关实验50% 洗去浮色(溶剂) 脂肪的鉴定70% 消毒 微生物的培养95% 解离观察细胞的有丝分裂；低温诱导染色体加倍酒精100% 溶解、提取色素 叶绿体色素的提取和分离5% 营造酸性环境 探究 pH 对酶活性的影响8%改变细胞膜通透性，使染色质中DNA 与蛋白质分离观察 DNA 和 RNA 在细胞中的分布盐酸15% 解离观察细胞的有丝分裂；低温诱导染色体
6、加倍50.1 g/mL斐林试剂、双缩脲试剂的成分检测还原糖、蛋白质5% 营造碱性环境 探究 pH 对酶活性的影响NaOH0.1% 遇酚酞呈紫红色 探究细胞表面积与体积的关系0.05 g/mL 斐林试剂的成分 检测还原糖CuSO40.01 g/mL双缩脲试剂的成分检测蛋白质6.常见疑难辨析(1)在观察类实验中低倍镜和高倍镜的使用情况如何？除观察类实验外，还有什么实验中也用到了显微镜呢？提示 观察类实验中除了“观察植物细胞的质壁分离和复原”使用低倍镜即可外，其余均需要使用高倍显微镜；还有“脂肪的切片法鉴定” “探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化”也用到了显微镜。(2)“观察 DNA 和 RNA
7、在细胞中的分布”实验中能否选用哺乳动物的成熟红细胞？为什么？提示 不能。因为哺乳动物的成熟红细胞中无细胞核和众多细胞器，几乎不含有 DNA 和RNA。(3)能否用观察叶绿体的材料来观察线粒体？为什么？提示 不能。因为叶绿体中的色素的颜色会掩盖线粒体被健那绿染色后的颜色变化。(4)在“观察细胞的有丝分裂”实验中为什么应注意观察呈正方形的根尖分生区细胞？提示 呈正方形的根尖分生区细胞分裂旺盛，而呈长方形的细胞可能是伸长区或成熟区的细胞，没有分裂能力。(5)在观察减数分裂实验中为什么不宜选择动物的卵巢或植物的雌蕊？提示 因为雄配子的产生数量远远多于雌配子，更易观察到减数分裂。(6)选用菠菜叶观察叶绿
8、体时，为什么要取稍带些叶肉细胞的下表皮？提示 因为靠近下表皮的叶肉细胞中的叶绿体较大而数目较少。(7)为什么应选取成熟的植物细胞观察质壁分离与复原实验？提示 因其含有中央大液泡，易于发生质壁分离与复原的实验现象。(8)斐林试剂能否用于蛋白质的鉴定？为什么？提示 不能，因为用于蛋白质鉴定的双缩脲试剂 B 液是 0.01 g/mL 的 CuSO4溶液，两种试剂的本质不同。斐林试剂的本质是新制的 Cu(OH)2，故应将甲液和乙液等量混匀后使用，而双缩脲试剂的本质是碱性条件下的 Cu2 ，故应先加 A 液 1 mL 造成碱性环境，再加 B 液4 滴摇匀使用。6(9)脂肪的鉴定是否一定要借助显微镜？提示
9、 不一定，因为脂肪的鉴定有两个方案，可磨碎后在试管内鉴定，肉眼观察即可，也可做切片借助显微镜观察。(10)绿叶中色素的提取和分离有何区别？提示 前者用无水乙醇提取法，原理是色素能够溶于有机溶剂无水乙醇中；而后者用纸层析法，原理是色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的色素随层析液在滤纸条上扩散得快，反之扩散得慢。题组一 观察类实验1(2018滨海新区模拟)洋葱是常用的生物学实验材料。下列有关实验中不能达到预期目的的是( )A用洋葱鳞片叶内表皮作实验材料，观察 DNA、RNA 在细胞中的分布B用紫色洋葱鳞片叶外表皮作为实验材料，观察植物细胞的质壁分离C用紫色洋葱鳞片叶外表皮作为实验材料，观察细胞中
10、的线粒体D用洋葱根尖作为实验材料，观察染色体数目发生改变的细胞答案 C解析 洋葱鳞片叶内表皮有细胞核，无紫色的大液泡，不影响颜色，可以作实验材料，观察 DNA、RNA 在细胞中的分布，A 正确；紫色洋葱鳞片叶外表皮含有紫色的大液泡，观察原生质层的变化较容易，可以作为实验材料，观察植物细胞的质壁分离，B 正确；观察细胞中的线粒体，需要染色，紫色洋葱鳞片叶外表皮含有紫色的大液泡，影响观察效果，故观察细胞中的线粒体不能用紫色洋葱鳞片叶外表皮作为实验材料，C 错误；洋葱根尖具有分生组织，能进行细胞分裂，可以作为观察染色体数目发生改变的细胞的实验材料，D 正确。2(2018榆林一模)下列用显微镜观察的实
11、验中，细胞不需要染色的是( )A观察 DNA 和 RNA 在口腔上皮细胞中的分布B观察口腔上皮细胞中的线粒体C观察洋葱根尖细胞的有丝分裂D观察洋葱表皮细胞的质壁分离与复原答案 D解析 观察 DNA 和 RNA 在口腔上皮细胞中的分布，需要用吡罗红甲基绿染色剂染色，A 错误；观察口腔上皮细胞中的线粒体，需要用健那绿染液染色，B 错误；观察洋葱根尖细胞7的有丝分裂，需要用龙胆紫溶液或者醋酸洋红液使得染色体着色，C 错误；观察洋葱表皮细胞的质壁分离与复原，由于洋葱表皮细胞的液泡有色素，因此不需要染色，可直接观察，D 正确。3(2018保定期末)只有在保持细胞活性的条件下，才能显示细胞中某物质或结构的
12、实验是( )A苏丹染色观察花生种子子叶细胞中的脂肪B健那绿染色观察动物细胞的线粒体C龙胆紫染色观察洋葱根尖分生区细胞的有丝分裂D用甲基绿、吡罗红染液染色观察动物细胞中的 DNA 和 RNA 的分布答案 B解析 观察花生子叶中脂肪时，无需保持细胞活性，A 错误；健那绿是活性染料，因此只有在保持细胞活性的条件下才能观察到线粒体被染成蓝绿色，B 正确；观察细胞有丝分裂实验，解离时已经用盐酸和酒精将细胞杀死，C 错误；观察 DNA 和 RNA 在细胞内的分布实验中，已经用盐酸将细胞杀死，使细胞膜丧失选择透过性，D 错误。题组二 鉴定提取类实验4(2018广东模拟)下列有关组织细胞中化合物鉴定实验的叙述
13、，正确的是( )A蛋白酶和蛋白质的混合溶液中加入双缩脲试剂后，会产生紫色反应B将斐林试剂加入果糖溶液中后，溶液呈现无色，水浴加热后有砖红色沉淀生成C观察 DNA 与 RNA 在细胞中分布的实验中，用盐酸处理有利于 DNA 与吡罗红结合D酵母菌进行有氧呼吸和无氧呼吸的产物都能用酸性重铬酸钾溶液来鉴定答案 A解析 蛋白酶本身就是蛋白质，因此用双缩脲试剂鉴定会产生紫色反应，A 正确；斐林试剂本身具有蓝色，因此将斐林试剂加入果糖溶液中后，溶液呈现蓝色，B 错误；观察 DNA与 RNA 在细胞中分布的实验中，用盐酸处理有利于 DNA 与甲基绿结合，C 错误；酸性重铬酸钾溶液只能用于鉴定酒精，酵母菌有氧呼
14、吸不产生酒精，D 错误。5(2018旌阳区校级模拟)以下关于实验步骤的叙述(试剂、药品的浓度和用量符合要求)，正确的是( )A鉴定蛋白质：豆浆CuSO 4溶液NaOH 溶液观察颜色变化B鉴定还原糖：苹果匀浆CuSO 4溶液NaOH 溶液水浴加热观察颜色变化C提取绿叶中的色素：剪碎绿叶SiO 2CaCO 3无水乙醇研磨过滤D观察 DNA 和 RNA 在细胞中的分布：制片解离漂洗染色显微镜观察答案 C解析 蛋白质的鉴定应先加 NaOH 溶液，再加 CuSO4溶液，A 错误；用斐林试剂鉴定还原糖时，应将 NaOH 溶液和 CuSO4溶液等量混合使用，B 错误；提取绿叶中的色素的流程为剪碎8绿叶SiO
15、 2CaCO 3无水乙醇研磨过滤，C 正确；观察 DNA 和 RNA 在细胞中的分布：取口腔上皮细胞涂片烘干水解冲洗涂片染色观察，D 错误。6(2017石家庄期末)现提供可配制斐林试剂的溶液：甲液(0.1 gmL 1 的 NaOH 溶液)、乙液(0.05 gmL 1 的 CuSO4溶液)以及蒸馏水，如果充分利用上述试剂及必需的实验用具，可灵活性地鉴别出下列哪些物质( )葡萄糖 蔗糖 胃蛋白酶 RNAA只有 B和C和 D、和答案 C解析 葡萄糖是还原糖，可以用斐林试剂鉴定，所以用上述试剂可以检测，正确；蔗糖是非还原糖，不能用斐林试剂鉴定，错误；胃蛋白酶是蛋白质，可以用双缩脲试剂鉴定，可以用上述试剂鉴定，但使用时需要将斐林试剂的乙液稀释为质量分数为 0.01 gmL1 ，正确；以上试剂只能鉴定还原糖和蛋白质，而不能鉴定 RNA，错误。
