1、多媒体教学参考资料/备课资料清华同方教育技术研究院微生物生长的测定微生物生长的测定，在生产和实验中有着广泛的用途，可作为发酵过程中判断微生物生长状况和发酵进程的重要指标。常用的微生物生长测定法有多种，一般分为测生长量和测细胞数目两大类。测生长量 常用的测生长量的方法有以下几种。干重法。将单位体积待测的培养液离心后，用清水洗涤 15 次，放入干燥器中加热干燥，加热温度一般在 100105之间，再称重。也可在较低的温度（如 40 ）下进行真空干燥。湿重法。将一定量的菌液离心或过滤，得到菌体，反复洗涤后称湿重。干重一般为湿重的 20%25%。微生物细胞内蛋白质、DNA 等的含量比较稳定，所以常作为生
2、长量的测定指标。例如，细菌的含氮量一般是菌体干重的 14%，这样，测出细菌的含氮总量，就可换算出菌体的干重。测定含氮量的方法也很多。例如，将样品与氧化铜混合，在 CO2 气流中加热就会产生氮气，将氮气收集在呼吸计中，用 KOH 吸去 CO2，就可测出氮气量。微生物的某些生理指标，如耗氧量或 CO2 等代谢产物的量，在一定条件与群体的生长量成正比。因此，也可用这些指标来代表生长量。测细胞数目 常用的测细胞数目的方法有以下几种。血球计数板法。血球计数板是一块特制的载玻片，计数是在计数室内进行的，即将菌液置于血球计数板的计数室内，在显微镜下进行计数。由于计数室的体积是一定（0.1mL ）的，这样，根
3、据计数出来的数字，就可以算出单位体积菌液内的菌体总数。但一般情况下，要取一定数量的计数室进行计数，在算出计数室的平均菌数后，再进行计算。染色涂片计数法。将已知体积的菌液均匀地涂布在玻片的一定面积上，经固定染色在显微镜下数视野中的菌数，并得出若干个视野中的平均菌数。通常在 1.0cm2 的玻片上涂布 0.01 mL 样品。用台微尺测视野的直径，算出视野面积（ r 2） 。1.0 cm2 除以视野面积即为 1.0cm2 中的视野数。然后按下列公式计算每毫升的细胞数：视野中的细胞平均数（1.0 cm2视野面积） 100。比浊法。细菌的菌体是不透光的，呈混浊状态。根据混浊程度，可用比浊计、分光多媒体教学参考资料/备课资料清华同方教育技术研究院光度计等来测定菌液的透光度，然后根据事先绘制的标准曲线查出菌液浓度。
