1、 年 月 第 卷 第 期.，.，收 稿 日 期 基 金 项 目 江 西 省 主 要 学 科 学 术 和 技 术 带 头 人 项 目（）；江 西 省 自 然 科 学 基 金 项 目（）；江 西 省 重 点 研 发 计 划项 目（，）；江 西 省 中 医 药 管 理 局 课 题（）；江 西 中 医 药 大 学 校 级 科 技 创 新 团 队 发 展 计划 项 目（）通 信 作 者 陈 耀 辉，硕 士，副 主 任 医 师，主 要 从 事 肾 病 临 床 与 实 验 研 究，：作 者 简 介 黄 丽 萍，博 士，教 授，主 要 从 事 中 药 神 经 药 理 研 究，：基 于 通 路 探 讨 二 精
2、丸 减 轻 大 鼠 神 经 炎 症 的 作 用 及 机 制黄 丽 萍，卢 龙 辉，杨 喜 洋，谢 永 艳，徐 子 薇，朱 徐 东，王 晶 晶，吴 志 鑫，唐 健 富，吴 毅，陈 耀 辉（江 西 中 医 药 大 学 药 学 院，江 西 南 昌；江 西 省 人 民 医 院，江 西 南 昌；莆 田 市 第 一 医 院，福 建 莆 田；国 家 药 品 监 督 管 理 局 中 成 药 质 量 评 价 重 点 实 验 室江 西 省 药 品 与 医 疗 器 械 质 量 工 程 研 究 中 心 江 西 省 药 品 检 验 检 测 研 究 院，江 西 南 昌；江 西 省 中 药 药 理 重 点 实 验 室，江
3、西 南 昌）摘 要 研 究 二 精 丸 对 半 乳 糖 联 合 淀 粉 样 蛋 白（）致 阿 尔 茨 海 默 病（）大 鼠 神 经 炎 症 的 改 善 作 用 及 可 能 机制。大 鼠 随 机 分 为 假 手 术 组、模 型 对 照 组、阳 性 药 物 组（多 奈 哌 齐，）、二 精 丸 高 剂 量 组（）、二 精 丸 低 剂 量组（.），每 组 只。半 乳 糖 腹 腔 注 射 周 后，连 续 灌 胃 给 药 周；半 乳 糖 腹 腔 注 射 周 后，大 鼠 双 侧 海 马 注 射。灌 胃 给 药 周 后，新 物 体 识 别 实 验 检 测 大 鼠 学 习 记 忆 能 力。末 次 给 药 后，取
4、 组 织，免 疫 荧 光 法 检 测 大 鼠 脑 组 织 小胶 质 细 胞 活 化 情 况；免 疫 组 化 检 测 大 鼠 海 马 区 和 磷 酸 化 蛋 白（，）阳 性 表 达；酶 联 免 疫 吸 附（，）法 检 测 大 鼠 脑 组 织 炎 症 因 子 白 细 胞 介 素（，）、肿 瘤 坏 死 因 子（，）、白 细 胞 介 素（）水 平；法 检 测 大 鼠 脑 组 织 样 受 体（，）核 因 子（，）核 苷 酸 结 合 寡 聚 化 结 构 域 样 受 体（，）通 路 相 关 蛋 白 表 达。结 果 显 示，与 假 手 术 组 比 较，模 型 对 照 组 大 鼠 新 物 体 识 别 指 数 明
5、显 下 降，海 马 区 沉 积 和 阳 性 蛋 白 显 著 增 多，脑 组 织 齿 状 回 处 小 胶 质 细 胞 活 化 水 平 显 著 增 高，海 马 组 织、水 平 明 显 升 高；海 马、蛋 白 表 达 水 平 显 著 升 高。与 模 型 对 照组 比 较，二 精 丸 可 提 高 大 鼠 新 物 体 识 别 指 数，减 少 海 马 区 沉 积 和 阳 性 蛋 白 表 达，抑 制 脑 组 织 齿 状 回 小 胶 质 细 胞活 化；降 低 海 马 组 织、炎 症 因 子 水 平；下 调、蛋 白 的 表 达。综 上 所 述，二 精 丸 可 能 通 过 改 善 小 胶 质 细 胞 活 化，降
6、低 神 经 炎 症 因 子、表 达 水 平，抑 制 神 经 炎 症 通 路，减 少 海 马 沉 积 和 表 达，恢 复 海 马 形 态 结 构，改 善 模 型 大 鼠 的 学 习 记 忆 能 力。关 键 词 二 精 丸；神 经 炎 症；阿 尔 茨 海 默 病；通 路；小 胶 质 细 胞，（，；，；，；黄 丽 萍 等：基 于 通 路 探 讨 二 精 丸 减 轻 大 鼠 神 经 炎 症 的 作 用 及 机 制，；，）（），（，），（.），（.），（）（），（），（）（）（）（）（），；：.阿 尔 茨 海 默 病（，）是 痴 呆的 最 常 见 形 式，以 进 行 性 记 忆 和 认 知 功 能 障
7、碍 为 主要 表 现，其 特 征 性 病 理 变 化 表 现 为 皮 层 与 海 马 胆 碱能 神 经 元 缺 失、神 经 细 胞 外 淀 粉 样 肽（，）聚 集 形 成 老 年 斑（，）、细 胞内 高 度 磷 酸 化（）蛋 白 形 成 神 经 原 纤 维 缠结（，）以 及 神 经 炎 症。其 中，神 经 炎 症 和 之 间 相 互 交 织 的 病 理 学 被 认为 对 的 发 展 至 关 重 要。随 着 老 龄 化 程 度 的 加重，的 发 病 率 逐 年 上 升。年 约 有 患 者 万 人，到 年，患 者 的 数 量 预 计 将 达 到近.亿 人。严 重 威 胁 老 年 人 的 生 命 安
8、 全，是 继 心 脏 病、癌 症 后 的 第 位 死 因，世 界 卫 生 组 织已 将 其 列 为 全 球 公 共 卫 生 重 点。现 有 的 药 物 如乙 酰 胆 碱 酯 酶（）抑 制 剂、甲 基 天 冬 氨 酸（）受 体 拮 抗 剂 等 在 一 定 程 度 上 能 缓 解 症状，但 疗 效 不 理 想。流 行 病 学 证 据 表 明，非 甾 体抗 炎 药（）在 一 定 程 度 上 能 够 减 轻 神 经 炎 症 反应，延 缓 进 展，提 示 抑 制 神 经 炎 症 可 能 是 治 疗 的 未 来 策 略。但 胃 肠 道 并 发 症 的 高 发 生 率 限制 了 在 一 级 治 疗 中 的
9、长 期 临 床 应 用。因 此，寻 找 有 效 药 物 以 延 缓、控 制 的 发 生 和 发展，是 目 前 社 会 迫 切 的 需 求。中 医 学 认 为“肾 主 智，肾 虚 则 智 不 足”。二 精 丸记 载 于 圣 济 总 录，由 黄 精、枸 杞 子 味 中 药 组 成，具 有 滋 肾 益 智 作 用。现 代 药 理 研 究 发 现，二 精 丸 对于 多 种 原 因 所 致 的 动 物 模 型 有 效，可 显 著 改 善学 习 记 忆 和 病 理 形 态。但 二 精 丸 能 否 通 过 改 善 年 月 第 卷 第 期.，.，神 经 炎 症 从 而 起 到 防 治 的 作 用 目 前 尚
10、不 清 楚，值 得 进 一 步 深 入 探 讨。本 研 究 在 采 用 前 期 已 建 立 的 半 乳 糖 所 致 大 鼠 模 型，观 察 二 精 丸 对其 海 马 小 胶 质 细 胞 活 化、炎 症 相 关 因 子，以 及 神 经 炎症 的 经 典 通 路 相 关 蛋 白 表 达的 影 响，探 究 二 精 丸 是 否 能 通 过 抑 制 神 经 炎 症 达 到防 治 作 用，为 二 精 丸 临 床 防 治 提 供 科 学依 据。材 料.药 材 黄 精，枸 杞 子 购 于 樟 树 市 正 一 中 药 材 有 限 公 司，由 江 西 省药 品 检 验 检 测 研 究 院 吴 毅 主 任 药 师
11、鉴 定 均 为 正 品。.动 物 只 级 雄 性 大 鼠，体 质 量（），购 于 湖 南 斯 莱 克 景 达 实 验 动 物 有 限 公司，生 产 许 可 证 号（湘）。本 实 验 获得 江 西 中 医 药 大 学 实 验 动 物 伦 理 委 员 会 批 准（动 物伦 理 委 员 会 编 号）。.试 剂 半 乳 糖（公 司，批 号）；（公 司，批 号）；盐 酸多 奈 哌 齐 片（卫 材 中 国 药 业 有 限 公 司，批 号）；组 织 细 胞 固 定 液（公 司，批 号）；白 细 胞 介 素（，）、白 细 胞 介 素（，）、肿 瘤 坏 死 因 子（，）的 酶 联 免 疫 吸 附 法（，）试 剂
12、 盒（南 京 建 成 生 物 工 程 研 究 所 有 限 公 司，批 号 分 别 为、）；蛋 白 定 量 试 剂盒（上 海 碧 云 天 生 物 技 术 有 限 公 司，批 号）；核 苷 酸 结 合 寡 聚 化 结 构 域 样 受 体（，）、样 受 体（，）、磷 酸 化 蛋 白（，）（公 司，批 号 分 别 为、）；、凋 亡相 关 斑 点 样 蛋 白（，）（公 司，批 号 分 别 为、）；溶 液（公 司，批 号）；山 羊 抗 兔 免 疫 球 蛋 白（公 司，批 号）；核 因 子（，）、内 参 抗 体、辣 根过 氧 化 物 酶 标 记 山 羊 抗 兔 二 抗（公司，批 号 分 别 为、）；兔抗 炎
13、 性 半 胱 氨 酸 天 冬 氨 酸 蛋 白 酶（，）、兔 抗 核 转 录 因子 抑 制 因 子（公 司，批 号 分 别 为、）。.仪 器 新 物 体 识 别 系 统 诺 达 思（北 京）信 息技 术 有 限 责 任 公 司；万 分 之 一 分 析 天 平（上 海 舜 宇 恒 平 科 学 仪 器 有 限 公 司）；蓝 星 脑立 体 定 位 仪、柔 性 颅 骨 钻（安 徽 正 华 生 物 仪器 设 备 有 限 公 司）；微 量 注 射 泵（公 司）；高 通 量 组 织 研 磨 器（宁 波新 芝 生 物 科 技 股 份 有 限 公 司）；电 泳 仪、制胶 设 备（公 司）；共 聚 焦 显 微镜、倒
14、 置 荧 光 显 微 镜（公 司）；型 吸 收光 酶 标 仪（公 司）；化 学 发 光成 像 仪（公 司）。方 法.药 物 制 备 参 考 文 献 方 法 制 备。黄 精、枸 杞 各 取，加 倍 体 积 自 来 水 浸 泡 后，煮 沸，煎 煮 次 第 次 煎 煮，第 次 煎 煮，次 煎 煮 液 滤 过 后 合 并，减 压 浓 缩 得 药 液 含生 药 量.，冰 箱 保 存 备 用。.动 物 造 模、分 组 及 给 药 参 考 文 献 进 行。大 鼠 在 常 规 环 境 中 适 应 性 喂 养 周，随 机 分 为 假 手术 组、模 型 对 照 组（半 乳 糖 侧）、阳 性 药 物 组（多 奈 哌
15、 齐 组，）、二精 丸 高 剂 量 组（）、二 精 丸 低 剂 量 组（.），每 组 只。除 假 手 术 组 外，其 余 各 组 腹 腔 注 射 半 乳 糖，每 日 次，持 续 周。半 乳 糖 注 射 周 后，开 始 灌 胃 给 药，每 日 次，给 药 容 量 为，连 续 给 药 周。半 乳 糖 注 射 周 后，双 侧 海马 注 射 侧。.新 物 体 识 别 实 验 检 测 学 习 记 忆 能 力 参 考 文 献 进 行。将大 鼠 放 入 敞 箱，让 其 自 由 活 动，适 应 环 境。在 敞 箱 对 角 线 中 心 放 置 物 体、，保 持 其余 因 素 不 变，记 录 大鼠 对 物 体、各
16、 自 的 探 索 时 间，分 别 记 录 为 和。第 天，将 物 体 更 换 为 物 体，记 录 新 物 体 的 学 习 时 间 为，旧 物 体 的 学 习时 间 为。新 物 体 识 别 指 数（），通 过 该 指标 可 反 映 出 大 鼠 的 学 习 记 忆 能 力。.取 材 及 处 理 末 次 给 药 后，参 考 文 献 方 法 麻 醉 大 鼠，心 脏 灌 流 后 取 脑，左 右 半 脑 分 离，左半 脑 固 定 于 多 聚 甲 醛 溶 液，右 半 脑 分 离 皮 层 与 黄 丽 萍 等：基 于 通 路 探 讨 二 精 丸 减 轻 大 鼠 神 经 炎 症 的 作 用 及 机 制海 马，放
17、于 冰 箱 保 存 备 用。.大 鼠 脑 组 织 小 胶 质 细 胞 活 化 的 检 测 参 考 文献 进 行。每 组 取 个 大 脑 组 织，冰 冻 切 片，切片 厚 度 为，按 下 法 进 行 免 疫 荧 光 染 色。冰 冻切 片 复 温；冲 洗 次，滤 纸 吸 干，免 疫组 化 笔 画 圈；配 置 好 的 封 闭 液 封 闭（一 个组 织），常 温（放 入 湿 盒，湿 盒 底 部 加 水）；甩 去 封 闭液，不 用 冲 洗，滤 纸 吸 干；用 封 闭 液 配 置 一 抗 小 胶 质 细 胞 离 子 钙 接 头 蛋 白 分 子（），兔 来 源，孵 一 抗，冰 箱 过 夜（）；甩 去 一 抗
18、，冲 洗 次，滤 纸 吸 干；用 封 闭 液 配 制 二 抗（山 羊 抗 兔，），孵 二 抗，常 温，避 光；甩 去 二 抗，冲 洗，滤 纸吸 干；染 细 胞 核，；甩 去，冲 洗，滤 纸 吸 干；抗 荧 光 衰 减 封 片 剂 封 片。冰 箱 避 光 保 存，共 聚 焦 显 微 镜 拍 照。.二 精 丸 对 大 鼠 海 马 区、蛋 白表 达 水 平 的 影 响 参 考 文 献 进 行。海 马 组 织进 行 石 蜡 切 片，将 待 测 切 片 放 于 烘 箱 烤 片，按 说 明 书 步 骤 进 行 免 疫 组 化 实 验。其 中 一 抗 孵 育方 式 及 用 量：每 片 滴 加（），或（），放
19、 于 暗 盒 中 过 夜（）。.大 鼠 海 马 组 织 神 经 炎 症 因 子、水 平 测 定 取 一 定 量 的 组 织 进 行 匀 浆 后，按 试 剂 盒 说 明 书，测 定 大 鼠 海 马 组 织、水 平。.大 鼠 海 马 通 路 相 关 蛋 白检 测 提 取 海 马 组 织 总 蛋 白，法 测 定 蛋 白 浓度，加 入 适 量，沸 水 浴 备 用。每 孔 加 入 等 量 蛋 白 样 品 进 行 电 泳，转 移 至 膜 上，脱 脂 奶 粉（或）室温 封 闭 漂 洗 后 加 入、及 抗 体，孵 育 过 夜 用 充分 漂 洗 后 加 入 标 记 的 二 抗。于 低 温 摇 床 上 常温 孵
20、育。再 用 洗 膜 次，每 次，化 学 发 光 法 显 色 曝 光。.统 计 学 分 析 标 准 曲 线 回 归 方 程 使 用 进 行 计 算，拟 合 模 型 选 用 曲 线（四参 数）。用 软 件 对 图 片 进 行 分析；数 据 采 用.软 件 处 理，多 组 间 样 本 差 异采 用 单 因 素 方 差 分 析（）方 法 分 析，计 量 资 料 用 均 值 标 准 差（）表 示，以.为差 异 有 统 计 学 意 义。结 果.二 精 丸 对 大 鼠 学 习 记 忆 能 力 的 影 响 熟悉 期 大 鼠 对 于 相 同 物 体 的 探 索 时 间 没 有 明 显 区 别，说 明 大 鼠 对
21、 个 物 体 不 存 在 偏 好 选 择。模 型 对 照 组大 鼠 较 假 手 术 组 大 鼠 的 识 别 指 数 明 显 下 降，提 示 其记 忆 能 力 下 降；二 精 丸 高 剂 量 组 大 鼠 识 别 指 数 显 著性 增 高，提 示 二 精 丸 高 剂 量 可 明 显 改 善 大 鼠 学习 记 忆 能 力，见 图。假 手 术 组、模 型 对 照 组、阳 性 药 物 组、二 精 丸 高 剂 量 组、二 精 丸 低 剂 量组 样 本 量 分 别 为、（图、，表、同）。与 假 手 术 组 比较.，.；与 模 型 对 照 组 比 较.，.（图、同）。图 二 精 丸 对 半 乳 糖 联 合 所
22、 致 大 鼠 学 习 记忆 能 力 的 影 响（）（）.二 精 丸 对 大 鼠 海 马 区 和 表达 水 平 的 影 响 与 假 手 术 组 比 较，模 型 对 照 组 大 鼠海 马 区 细 胞 减 少，周 围 着 色 较 深，表 达 显著 增 多，区 胞 浆 和 突 起 着 色 较 深，蛋 白表 达 水 平 显 著 升 高；与 模 型 对 照 组 比 较，二 精 丸 高、低 剂 量 组 大 鼠 海 马 区 细 胞 增 多，着 色 较 浅，表 达 显 著 减 少；二 精 丸 高 剂 量 组 大 鼠 海 马 区 细 胞 着 色 较 浅，阳 性 表 达 细 胞 显 著降 低，提 示 二 精 丸 可
23、 明 显 改 善 大 鼠 病 理 变 化，见图、表。.二 精 丸 对 模 型 大 鼠 脑 组 织 小 胶 质 细 胞 活化 水 平 的 影 响 假 手 术 组 大 鼠 齿 状 回 区 荧 光 强 度弱，小 胶 质 细 胞 均 匀 分 布 于 脑 组 织，胞 体 小 而 圆，突起 呈 现“树 枝 状”，提 示 大 多 处 于 型；与 假 手 术 比 年 月 第 卷 第 期.，.，图 二 精 丸 对 大 鼠 海 马 区、表 达 水 平 的 影 响（免 疫 组 化，；）（，；）表 二 精 丸 对 大 鼠 海 马 区、表 达 水 平 的影 响（）（）组 别 剂 量阳 性 表 达 强 度 假 手 术.模
24、 型 对 照.）.）阳 性 药 物.）.）二 精 丸.）.）.）.注：与 假 手 术 组 比 较）.；与 模 型 对 照 组 比 较）.（表 同）。较，模 型 对 照 组 大 鼠 脑 组 织 齿 状 回 处 小 胶 质 细 胞“树 枝 状”突 起 消 失，形 态 呈“阿 米 巴 虫 状”，荧 光 强度 信 号 变 强 且 密 集，说 明 小 胶 质 细 胞 转 变 为 活 化 状态，且 活 化 水 平 显 著 升 高；与 模 型 对 照 组 比 较 二 精 丸组 大 鼠 脑 组 织 齿 状 回 处 小 胶 质 细 胞“阿 米 巴 虫 状”形 态 减 少，呈 现 较 多“树 枝 状”突 起，且
25、荧 光 强 度 信号 减 弱，表 示 小 胶 质 细 胞 活 化 程 度 显 著 降 低，见 图、表。.二 精 丸 对 大 鼠 海 马 组 织、水 平 的 影 响 与 假 手 术 组 相 比，模 型 对 照 组 大 图 二 精 丸 对 模 型 大 鼠 脑 组 织 小 胶 质 细 胞 活 化 水 平 的 影 响（免 疫 荧 光，）（，）鼠 海 马 组 织 中、含 量 均 明 显 升 高，差 异 具 有 统 计 学 意 义；与 模 型 对 照 组 相 比，二 精 丸 高剂 量 组 大 鼠 海 马 组 织 中、含 量 明显 降 低，见 图。黄 丽 萍 等：基 于 通 路 探 讨 二 精 丸 减 轻
26、大 鼠 神 经 炎 症 的 作 用 及 机 制表 二 精 丸 对 模 型 大 鼠 脑 组 织 小 胶 质 细 胞 平 均 荧 光 强度 的 影 响（）（）组 别 剂 量 平 均 荧 光 强 度假 手 术.模 型 对 照.）阳 性 药 物.）二 精 丸.）.）.二 精 丸 对 大 鼠 海 马 通 路 相 关 蛋 白 表 达 的 影 响 与 假 手 术 组 比 较，模 型对 照 组 大 鼠 海 马、炎 性 小 体 水 平 明显 升 高；与 模 型 对 照 组 相 比，二 精 丸 高 剂 量 组 大 鼠 海 马、炎 性 小体 水 平 明 显 下 降，见 图。讨 论目 前 临 床 对 于 的 干 预，
27、以 对 症 治 疗、延 缓 进 图 二 精 丸 对 大 鼠 海 马 组 织、水 平 的 影 响（），（）图 二 精 丸 对 大 鼠 海 马 通 路 相 关 蛋 白 表 达 的 影 响（，）（，）年 月 第 卷 第 期.，.，程 为 主，尚 无 治 愈 或 逆 转 疾 病 的 药 物 或 方 法。越 来越 多 的 证 据 表 明，大 脑 持 续 慢 性 神 经 炎 症 反 应（）是 的 另 一 个 核 心 特 征。大 量 的动 物 实 验 和 临 床 研 究 证 实，神 经 炎 症 贯 穿 于 发生 的 始 终，神 经 炎 症 不 但 是 病 理 的 重 要 组 成 部分，并 可 能 是 其 他
28、 病 理 特 征 形 成 和 发 展 的 诱 发 因 素。神 经 炎 症 与 发 生 发 展 密 切 相 关，并 有 可 能 作 为新 的 药 物 靶 点。本 研 究 通 过 半 乳 糖 联 合 复 合 造 模 法 建 立 大 鼠 模 型，对 脑 组 织 小 胶 质 细胞 活 化 水 平、炎 症 因 子 水 平、炎 症 相 关 通 路、病 理 学 指 标、行 为 学 指 标 等 进行 检 测，研 究 与 慢 性 炎 症 反 应 之 间 的 关 系，以 及二 精 丸 对 其 干 预 作 用。小 胶 质 细 胞 是 中 枢 神 经 系 统 的 常 驻 吞 噬 细胞，在 神 经 炎 症 过 程 中
29、起 关 键 作 用。静 息 状 态 为正 常 生 理 状 态，突 起 呈 现“树 枝 状”，胞 体 小 而 圆。当 受 到、炎 症 因 子 等 刺 激 时，突 起 逐 渐 消 失，形 态呈“阿 米 巴 虫 状”，进 行 趋 化 和 吞 噬。是 小 胶质 细 胞 激 活 的 标 记 物，可 反 映 小 胶 质 细 胞 的 活 化 程度。本 研 究 采 用 免 疫 荧 光 技 术 对 其 标 记，检 测 其 活化 程 度。结 果 表 明，与 假 手 术 组 大 鼠 比 较，模 型 对 照组 大 鼠 脑 组 织 齿 状 回 处 小 胶 质 细 胞“树 枝 状”突 起消 失，形 态 呈“阿 米 巴 虫
30、 状”，荧 光 强 度 信 号 变 强 且密 集，证 明 小 胶 质 细 胞 为 活 化 状 态，且 活 化 水 平 增多，提 示 在 病 理 状 态 下，小 胶 质 细 胞 途 径 处 于 激活 水 平。给 予 二 精 丸 药 物 干 预 后，大 鼠 脑 组 织 齿 状回 处 小 胶 质 细 胞“阿 米 巴 虫 状”形 态 减 少，呈 现 较 多“树 枝 状”突 起，且 荧 光 强 度 信 号 减 弱，表 示 小 胶 质细 胞 活 化 程 度 降 低，提 示 二 精 丸 可 以 改 善 模 型大 鼠 海 马 小 胶 质 细 胞 的 激 活。是 神 经 炎 症 反 应 的 重 要 触 发 因
31、素。当 大 量 沉 积 时，小 胶 质 细 胞 被 持 续 性 激 活，从 而 活化 为 型，吞 噬 能 力 受 损，无 法 清 除 沉 积 的 毒 性 原 纤 维，并 且 产 生 促 炎 因 子（、等），进 一 步 诱 发 神 经 炎 症 的 发 生，继 而 加 重。本 研 究 发 现 模 型 对 照 组 大 鼠 海 马 区 和 阳 性 表 达 显 著 增 多，细 胞 着 色 较 深，差 异 具 有 统 计 学意 义；同 时 模 型 对 照 组 大 鼠 海 马 组 织 中、含 量 较 假 手 术 组 相 比 均 明 显 升 高。结果 提 示，模 型 对 照 组 大 鼠 小 胶 质 细 胞 活
32、 化 后 进 一 步诱 发 神 经 炎 症 的 发 生，增 加 了 特 异 性 病 理 产 物，加 重 了。二 精 丸 给 药 后 可 使 大 鼠 海 马 组 织中、含 量 均 明 显 降 低，降 低 海 马 区 和 阳 性 表 达，且 以 二 精 丸 高 剂 量 组 更为 显 著，提 示 二 精 丸 能 逆 转 小 胶 质 细 胞 活 化，降 低 神经 炎 症 因 子 表 达 水 平，同 时 也 减 轻 了 的 病 理改 变。小 胶 质 细 胞 及 其 膜 受 体 是 神 经 炎 症 的 关 键参 与 者，是 调 控 小 胶 质 细 胞神 经 炎 症 的 重 要 信 号 通 路。样 受 体（
33、）是小 胶 质 细 胞 的 重 要 表 面 受 体，在 介 导 炎 症 的 信 号 通路 中 起 重 要 作 用，已 被 证 明 能 识 别 受 体。作 为 转 录 因 子 复 合 物 在 信 号 通 路 中 是下 游 最 重 要 的 转 录 因 子 之 一，处 于 下 游 信 号通 路 的 连 接 处，在 促 炎 细 胞 因 子 的 表 达 中 起 着 关 键性 作 用。未 激 活 的 通 常 与 抑 制 蛋 白 结 合 于 细 胞 质 中，在、炎 性 细 胞 等 刺 激 下，蛋 白 酶体 加 速 降 解，抑 制 蛋 白 磷 酸 化 增 强，使 得 释 放 与 核 易 位。随 着 转 录 的
34、 增 多，炎 性 小 体 作 为 胞 质 中 的 多 蛋 白 复 合 物 被 活 化，组装 后 促 炎 前 体 蛋 白 被 激 活 成，分泌 炎 性 细 胞 因 子、等，诱 导 机 体产 生 免 疫 应 答 反 应，建 立 脑 内 慢 性 炎 性 环 境，引 起 神经 元 损 伤 并 最 终 引 导 致 炎 症 级 联 反 应，进 而 加 重 的 病 程。本 研 究 发 现，模 型 对 照 组 大 鼠 水平 明 显 升 高，同 时、比 值 明 显 升 高，且 炎 性 小 体 水 平 明 显 升 高，说 明 被 激 活。二 精 丸 能 抑 制 跨 膜 受 体 的 表达，下 调、表达，抑 制 核
35、转 位，并 下 调 炎 性 小 体 的 表 达，说 明 其 可 能 通 过 抑 制，减 少 下 游 炎 性 因 子 的 含 量 而 发 挥 抑制 神 经 炎 症 作 用。模 型 大 鼠 脑 内 出 现 的 一 系 列 的 生 理 病 理 性改 变，其 外 在 表 现 形 式 学 习 记 忆 能 力 会 出 现 改 变。所 以，本 研 究 通 过 新 物 体 识 别 试 验 检 测 模 型 大鼠 的 学 习 记 忆 能 力。新 物 体 识 别 试 验 中 模 型 对 照 组大 鼠 的 识 别 指 数 下 降；给 予 二 精 丸 药 物 干 预 后，可 以升 高 新 物 体 识 别 指 数，说 明
36、 二 精 丸 可 以 改 善 大 鼠 识别 记 忆 能 力。综 上 所 述，二 精 丸 通 过 改 善 半 乳 糖 联 合 复 合 造 模 致 大 鼠 模 型 脑 内 小 胶 质 细 胞 的激 活，降 低 神 经 炎 症 因 子、表 达 水 黄 丽 萍 等：基 于 通 路 探 讨 二 精 丸 减 轻 大 鼠 神 经 炎 症 的 作 用 及 机 制平，抑 制 神 经 炎 症 通 路，减 少海 马 沉 积 和 表 达，恢 复 海 马 形 态 结 构，改善 模 型 大 鼠 的 学 习 记 忆 能 力。参 考 文 献，：，（）：，（），（）：，：，（）：张 博 宇，罗 晓 敏，丁 翼，等 基 于 信
37、号 通 路探 讨 二 十 五 味 珊 瑚 丸 对 东 莨 菪 碱 致 小 鼠 学 习 记 忆 障 碍 的 作用 研 究 中 国 中 药 杂 志，（）：，：（），：，（）：，（）：，：，：许 小 强，黄 敬 耀，罗 荣，等 二 精 丸 有 效 部 位 对 肾 阴 虚 模 型大 鼠 学 习 记 忆 障 碍 的 影 响 及 其 分 子 机 制 中 草 药，（）：黄 丽 萍，杨 喜 洋，燕 波，等 二 精 丸 对 去 卵 巢 半 乳 糖 联 合 所 致 肾 阴 虚 大 鼠 海 马 蛋 白 质 组 学 的 影 响 中 国实 验 方 剂 学 杂 志，（）：陈 耀 辉，燕 波，官 扬，等 二 精 丸 对 去
38、 卵 巢 半 乳 糖 联 合 致 肾 阴 虚 大 鼠 学 习 记 忆 能 力 的 影 响 中 药 新 药与 临 床 药 理，（）：，（）：刘 智 嘉，王 存 萍，杨 斌，等 藏 族 药 二 十 五 味 珍 珠 丸 对 缺 血 性脑 卒 中 大 鼠 的 保 护 作 用 及 其 机 制 研 究 中 国 中 药 杂 志，（）：何 川，黄 重 生，陈 虹 茹，等 预 针 刺 对 阿 尔 茨 海 默 病 样 大 鼠 学习 记 忆 能 力 及 海 马 区 炎 性 小 体 相 关 蛋 白 的 影 响 中 国 针 灸，（）：苟 于 瑞，第 五 永 长，王 登 坤，等 洗 心 汤 组 分 配 伍 对 半 乳 糖联 合 致 模 型 大 鼠 学 习 记 忆 能 力 的 影 响 及 主 要 机制 探 讨 时 珍 国 医 国 药，（）：唐 冰 雪，张 源 文，吴 雅 晨，等 淫 羊 藿 苷 对 脑 缺 血 再 灌 注 大 鼠的 神 经 保 护 及 小 胶 质 细 胞 通 路 的 影 响 中 国 实 验 方 剂 学 杂 志，（）：，：，（）：，（）：黄 崇 刚，成 黎，喇 海 芹 芪 丹 复 感 颗 粒 对 呼 吸 道 病 毒 感 染 小 鼠 信 号 通 路 的 影 响 中 国 现 代 应 用 药 学，（）：，：，（）：，（）：，：责 任 编 辑 陈 玲
