1、 张 婷，王 文 彤，陈 玲.同 时 测 定 心 安 宁 胶 囊 中的 种 药 效 成 分.中 国 现 代 应 用 药 学，（）：.邓 俊 杰，谢 浙 裕，何 丽 娜.法 同 时 测 定 杞 菊 地 黄 丸（浓 缩 丸）中 种 成 分 的 含 量.西 北 药 学 杂 志，（）：.刘 文 静，王 子 健，马 杰，等.测 定 清 热 凉 血 方 中 种 成 分 的 含 量.中 药 材，（）：.关 皎，马 莹 慧，刘 娇，等.法 同 时 测 定 五 味 子 中 个活 性 成 分 的 含 量.中 药 新 药 与 临 床 药 理，（）：.崔 悦，高 兴，韩 丽 琴，等.法 同 时 测 定 黄 芪 中 黄
2、 芪 甲苷 和 毛 蕊 异 黄 酮 葡 萄 糖 苷 的 含 量.中 药 新 药 与 临 床 药 理，（）：.不 同 厂 家 川 贝 清 肺 糖 浆 中 防 腐 剂 测 定 方 法 的 建 立 及 考 察林 娟（三 明 市 检 验 检 测 中 心，福 建 三 明）摘 要：目 的 建 立 川 贝 清 肺 糖 浆 中 防 腐 剂 的 含 量 测 定 方 法，以 考 察 该 品 种 防 腐 剂 的 添 加 情 况。方 法 采 用 柱（.，），以 甲 醇.乙 酸 铵 溶 液 为 流 动 相 梯 度 洗 脱，检 测 波 长 和，用 检 测 器，流 速 为，柱 温。结 果 防 腐 剂 苯 甲 酸、羟 苯 甲
3、 酯、羟 苯 乙 酯、羟 苯 丙 酯、羟 苯 丁 酯 在 相 应 质 量 浓 度 范 围 内 线 性 关 系 均 良 好，回 收 率 均 满 意；个 不 同厂 家 均 能 准 确 测 出 所 添 加 的 防 腐 剂 含 量。结 论 建 立 的 方 法 准 确、高 效，可 用 于 考 察 不 同 厂 家 川 贝 清 肺 糖 浆 中 各 种 防 腐 剂 的 添 加 情 况。关 键 词：川 贝 清 肺 糖 浆；防 腐 剂；高 效 液 相 色 谱；含 量 测 定中 图 分 类 号：文 献 标 识 码：文 章 编 号：（）作 者 简 介：林 娟，女。职 称：主 管 药 师。主 要 从 事 药 品 检 验
4、 工 作。（，）：，.（.，）；.；.，；.，.：；川 贝 清 肺 糖 浆 由 枇 杷 叶、苦 杏 仁、川 贝 母、麦 冬、地 黄、甘草、桔 梗、薄 荷 等 味 药 组 成，具 有 清 肺 润 燥、止 咳 化 痰 功 效，临 床 上 用 于 风 热 感 冒 引 起 的 燥 咳，咽 干，咽 痛。现 行 标 准为 卫 生 部 药 品 标 准，只 要 求 性 状、相 对 密 度及 糖 浆 剂 通 则 项 检 查。对 于 多 剂 量 灌 装 的 糖 浆 剂 为 防 止 贮 存期 间 发 霉、酸 败 或 者 变 质 等 问 题 可 根 据 需 要 加 入 防 腐 剂，若 用量 不 足 难 以 达 到 抑
5、 制 微 生 物 生 长 繁 殖 的 效 果，摄 入 量 过 大 则会 对 人 体 造 成 危 害。有 相 关 文 献 对 该 品 种 主 药 或 者 辅 料 蔗 糖进 行 含 量 测 定，但 未 见 有 对 其 中 添 加 的 防 腐 剂 的 研 究 报道。本 次 监 督 性 抽 验 的 个 厂 家 样 品 中 主 要 添 加 了 苯 甲 酸（钠）和 羟 苯 酯 类（羟 苯 乙 酯、羟 苯 丙 酯），中 国 药 典 年版 四 部 糖 浆 剂 仅 规 定 苯 甲 酸 的 用 量 不 得 过.（其 钠 盐 的用 量 按 酸 计），羟 苯 酯 类 的 用 量 不 得 过.，为 了 考 察 不同 厂
6、 家 川 贝 清 肺 糖 浆 中 防 腐 剂 的 添 加 种 类 及 含 量，保 证 用 药.安 全，笔 者 筛 选 出 种 防 腐 剂 作 为 检 测 目 标，参 考 相 关 文献，建 立 了 一 种 高 效 准 确 的 方 法，利 于 该 品 种 的 质 量 控 制及 安 全 监 管。实 验 仪 器 与 材 料.仪 器 与 设 备 型 高 效 液 相 色 谱 仪，配 置 型 检 测 器（美 国 安 捷 伦 科 技 有 限 公 司）；电 子 分 析 天 平（）；型 数 控 超 声 波 清洗 器（昆 山 市 超 声 仪 器 有 限 公 司）。.药 品 与 试 剂 川 贝 清 肺 糖 浆 均 为
7、 监 督 性 抽 验 样 品，分 别为 葵 花 药 业（襄 阳）隆 中 有 限 公 司、漳 州 片 仔 癀 药 业 股 份 有 限公 司 等 个 不 同 厂 家。对 照 品 苯 甲 酸（批 号，含 量.），羟 苯 甲 酯（批 号，含 量.），羟苯 乙 酯（批 号，含 量），羟 苯 丙 酯（批 号，含 量.），羟 苯 丁 酯（批 号，含 量），所 有 对 照 品 来 源 均 为 中 国 食 品 药 品 检 定 研 究 院，流 动相 甲 醇 为 色 谱 纯（广 东 光 华 科 技 股 份 有 限 公 司），其 他 甲 醇 和乙 酸 铵 为 分 析 纯，水 为 超 纯 水。测 定 方 法 与 结 果
8、.色 谱 条 件 色 谱 柱：柱（.，）；流 动 相：以 甲 醇（）.乙酸 铵 溶 液（过.水 系 微 孔 滤 膜 抽 滤，超 声，）按照 表 梯 度 洗 脱；流 速：；柱 温：，检 测 波 长：苯 甲 酸，羟 苯 甲 酯、羟 苯 乙 酯、羟 苯 丙 酯、羟 苯 丁 酯 均为，进 样 体 积：。表 高 效 液 相 色 谱 梯 度 洗 脱 条 件时 间（）甲 醇（）乙 酸 铵 溶 液（）.溶 液 的 制 备.对 照 品 溶 液 的 制 备：取 苯 甲 酸、羟 苯 甲 酯、羟 苯 乙 酯、羟 苯 丙 酯、羟 苯 丁 酯 对 照 品 适 量，精 密 称 定，加 甲 醇 溶 解并 定 量 稀 释 制
9、成 每 含 苯 甲 酸、羟 苯 甲 酯、羟 苯 乙酯、羟 苯 丙 酯、羟 苯 丁 酯 均 为 的 混 标 溶 液，即 得。.供 试 品 溶 液 的 制 备：用 内 容 量 移 液 管 精 密 吸 取 样 品，置 容 量 瓶 中，用 甲 醇 清 洗 移 液 管 内 壁，洗 液 并入 容 量 瓶 中，加 甲 醇 适 量，超 声，放 冷 并 定 容 至 刻度，摇 匀，滤 过，续 滤 液 用.有 机 系 微 孔 滤 膜 滤 过，即得。.阴 性 对 照 溶 液 的 制 备：按 照 川 贝 清 肺 糖 浆 标 准 的 处 方 比 例 及 制 法，制 备 不 含 防 腐 剂 的 阴 性 样 品，按 照“.”
10、项 下 方 法 制 备 得 到 阴 性 对 照 溶 液。.方 法 学 考 察.专 属 性 考 察：取 混 标 溶 液、供 试 品 溶 液、阴 性 对 照 溶液，按“.”项 色 谱 条 件 进 样 检 测 分 析，考 察 样 品 中 是 否 有 干扰 待 测 成 分 的 色 谱 峰 及 目 标 峰 的 分 离 度。结 果 显 示（见 图），样 品 中 主 药 成 分 及 其 他 辅 料 不 干 扰 防 腐 剂 的 测 定 且 目 标峰 峰 形 及 分 离 度 良 好，理 论 塔 板 数 均。图 川 贝 清 肺 糖 浆 色 谱 图.混 合 对 照 品 液；.阴 性 对 照 溶 液；.模 拟 阳 性
11、 供 试 品；.苯甲 酸；.羟 苯 甲 酯；.羟 苯 乙 酯；.羟 苯 丙 酯；.羟 苯 丁 酯.线 性 关 系 考 察 及 检 出 限：精 密 称 取 对 照 品 羟 苯 甲 酯.、羟 苯 乙 酯.、羟 苯 丙 酯.、羟 苯 丁 酯.，置 同 一 容 量 瓶 中，加 甲 醇 溶 解 并 定 容 至刻 度，摇 匀，作 为 羟 苯 酯 类 储 备 液；再 精 密 称 取 苯 甲 酸 对 照 品.置 容 量 瓶 中，精 密 吸 取 羟 苯 酯 类 储 备 液 加 入 到 同 一 容 量 瓶，加 甲 醇 溶 解 稀 释 并 定 容 至 刻 度，摇 匀，作 为 线 性 号 液；精 密 吸 取 线 性
12、号 液 置 容 量 瓶 中，加 甲 醇 稀 释 至 刻 度，摇 匀，作 为 线 性 号 液；之 后 同 线 性 号 液 稀 释 倍 数，逐 级 稀 释 得 到 线 性 号、号、号、号 液。精 密 吸 取 上 述 一 系 列 线 性 溶 液，按“.”项色 谱 条 件 进 样 测 定，记 录 色 谱 图。以 对 照 品 质 量 为 横 坐 标（），对 应 峰 面 积（）为 纵 坐 标，绘 制 标 准 曲 线，计 算 线 性 回归 方 程。以 检 测 色 谱 峰 信 噪 比 时 对 应 量 为 检 测 限，结 果见 表。.精 密 度 试 验：取“.”项 下 混 标 溶 液，按“.”项 色谱 条 件
13、连 续 进 样 次，根 据 色 谱 峰 面 积 计 算。结 果 苯 甲 海 峡 药 学 年 第 卷 第 期酸、羟 苯 甲 酯、羟 苯 乙 酯、羟 苯 丙 酯、羟 苯 丁 酯 峰 面 积 的（）分 别 为.、.、.、.、.，表 明精 密 度 良 好。表 线 性 关 系 表名 称 回 归 方 程相 关 系 数线 性 范 围（）检 测 限（）苯 甲 酸.羟 苯 甲 酯.羟 苯 乙 酯.羟 苯 丙 酯.羟 苯 丁 酯.表 回 收 率 测 定 结 果（）名 称取 样 量（）样 品 中含 量（）对 照 品加 入 量（）测 得 量（）回 收 率（）平 均 值（）（）苯 甲 酸.羟 苯 甲 酯.羟 苯 乙 酯
14、.羟 苯 丙 酯.羟 苯 丁 酯.重 复 性 试 验：取 川 贝 清 肺 糖 浆 样 品（葵 花 药 业 集 团（襄 阳）隆 中 有 限 公 司，批 号），按 照“.”项 下 方 法平 行 配 制 份 供 试 品 液，按“.”项 色 谱 条 件 进 样 分 析，测 得苯 甲 酸、羟 苯 乙 酯 含 量 平 均 值 分 别 为.、.，（）分 别 为.，.，在 本 样 品 中 加 入 羟 苯 甲酯、羟 苯 丙 酯、羟 苯 丁 酯 对 照 品 适 量 作 为 测 定 所 有 成 分 的 重 复性 试 验 模 拟 阳 性 样 品，按 照“.”项 下 方 法 平 行 配 制 份模 拟 阳 性 供 试 品
15、 液，按“.”项 色 谱 条 件 进 样 分 析，测 得 苯 甲酸、羟 苯 甲 酯、羟 苯 乙 酯、羟 苯 丙 酯、羟 苯 丁 酯 含 量 平 均 值 分 别为.、.、.、.、.，（）分 别 为.，.、.、.、.，说 明 本 方 法 的 重 复 性 较 好。.稳 定 性 试 验：取.项 下 川 贝 清 肺 糖 浆 模 拟 阳 性 样品，按 照“.”项 下 方 法 制 备 供 试 品 液，分 别 在 室 温 下 放 置、进 样 测 定，计 算 苯 甲 酸、羟 苯 甲 酯、羟 苯 乙酯、羟 苯 丙 酯、羟 苯 丁 酯 色 谱 峰 峰 面 积 的（）分 别 为.，.，.，.，.，说 明 供 试 品
16、溶 液 在 内 稳 定 性 较 好。.加 样 回 收 率 试 验：取.项 下 川 贝 清 肺 糖 浆 模 拟 阳性 样 品，精 密 吸 取.置 容 量 瓶 中，平 行 吸 取 份，精 密 加 入 苯 甲 酸、羟 苯 甲 酯、羟 苯 乙 酯、羟 苯 丙 酯、羟 苯 丁 酯 对照 品 适 量，照“.”项 下 方 法 同 法 处 理，得 加 样 供 试 品 液。进 样 测 定，结 果 见 表。.样 品 的 测 定 用 本 文 建 立 的 方 法 对 抽 检 的 个 不 同 厂家 生 产 的 川 贝 清 肺 糖 浆 样 品 进 样 测 定，计 算 不 同 防 腐 剂 的 含量（外 标 法），结 果 见
17、 表。表 不 同 厂 家 防 腐 剂 含 量 测 定 结 果生 产 企 业 名 称苯 甲 酸（）羟 苯甲 酯（）羟 苯乙 酯（）羟 苯丙 酯（）羟 苯丁 酯（）葵 花 药 业（襄 阳）隆 中.漳 州 片 仔 癀.广 西 葛 洪 堂.湖 北 金 太 子.葵 花 药 业 湖 北 武 当.江 西 铜 鼓 仁 和.武 汉 鑫 瑞.广 西 大 力 神.湖 北 诺 得 胜.注：“”为 未 检 出 讨 论 与 结 论.检 测 波 长 的 确 定 通 过 检 测 器 对 苯 甲 酸 进 行 全 波长 扫 描，一 般 选 取 最 大 吸 收 时 的 波 长，最 终 确 定 苯 甲 酸 的 检 测波 长 为，羟
18、苯 酯 类 检 测 波 长 参 考 中 国 药 典 年 版四 部 药 用 辅 料 项 下 其 含 量 测 定，确 定 为。因 此 最 终选 用 分 时 段 切 换 波 长 法 对 种 防 腐 剂 进 行 同 时 测 定。.色 谱 条 件 的 优 化 对 于 同 时 测 定 种 防 腐 剂 的 色 谱 条件，在 流 动 相 选 择 上 分 别 对 甲 醇 水、甲 醇.磷 酸，乙 腈.磷 酸 以 及 甲 醇.乙 酸 铵 做 了 预 实 验，以 甲 醇 水 或 者 甲 醇.磷 酸 为 流 动 相 时 分 离 度 和 峰 形无 法 满 足 要 求，以 乙 腈.磷 酸 和 甲 醇.乙 酸 铵 为 流 动
19、 相 时 分 离 度 和 峰 形 较 好，因 乙 腈 毒 性 相 对 较 大且 成 本 较 高，最 终 以 甲 醇.乙 酸 铵 作 为 本 实 验的 流 动 相。在 梯 度 洗 脱 条 件 上，曾 尝 试 流 动 相 甲 醇（）乙酸 铵（），（），（），.（），（），（），（），（），（），结 果是 羟 苯 丁 酯 与 相 邻 峰 不 能 完 全 分 开，更 换 色 谱 柱 亦 是 如 此，不进 样 梯 度 洗 脱 此 峰 仍 然 存 在，固 在 此 洗 脱 程 序 上 微 调，分 别 考察 了 在、时 间 内 流 动 相 甲 醇（）乙 酸 铵（），（），（），结 果 在 内 完成 梯 度 变
20、 化 时 羟 苯 丁 酯 与 其 分 离 效 果 最 佳，其 余 各 目 标 峰 的分 离 度 也 符 合 要 求，因 此 最 终 选 择“.”项 下 梯 度 洗 脱 条 件。.提 取 溶 剂 的 选 择 预 实 验 时 分 别 选 用 甲 醇、甲 醇 水溶 液、乙 醇 对 川 贝 清 肺 糖 浆 进 行 提 取，发 现 选 用 甲 醇 提 取 效 果优 于 乙 醇，而 甲 醇 水 溶 液 和 甲 醇 提 取 效 果 无 显 著 差 别，固 选 取 甲 醇 为 提 取 溶 剂。.样 品 检 测 的 结 果 讨 论 通 过 本 文 建 立 的 方 法 测 得 个厂 家 防 腐 剂 的 用 量 均
21、 符 合 要 求。羟 苯 酯 类 又 称 尼 泊 金 类，本次 实 验 发 现 有 一 厂 家 的 说 明 书 中 标 明 含 有 苯 甲 酸、尼 泊 金，未具 体 说 明 是 尼 泊 金 类 中 的 哪 一 防 腐 剂，通 过 本 文 所 建 立 的 方法 检 测 出 为 羟 苯 乙 酯；还 有 另 一 厂 家 说 明 书 辅 料 项 下 列 出 了其 他 辅 料 但 未 标 明 有 添 加 防 腐 剂，同 样 通 过 此 方 法 检 测 出 其中 含 有 苯 甲 酸 和 羟 苯 乙 酯，建 议 应 当 加 强 对 企 业 标 签 说 明 书的 管 理。.结 论 本 方 法 准 确、高 效，
22、适 用 于 川 贝 清 肺 糖 浆 中 苯 甲酸、羟 苯 甲 酯、羟 苯 乙 酯、羟 苯 丙 酯、羟 苯 丁 酯 的 含 量 测 定，可作 为 川 贝 清 肺 糖 浆 质 量 控 制 的 分 析 方 法，用 于 同 时 考 察 不 同厂 家 川 贝 清 肺 糖 浆 中 各 种 防 腐 剂 的 添 加 情 况，为 药 品 的 安 全监 管 提 供 有 力 可 靠 的 支 撑。参 考 文 献 龚 雪 媛，赵 静 芳，沈 子 博，等.基 于 技 术 检 测 川贝 清 肺 糖 浆 中 掺 伪 山 麦 冬 的 研 究.海 峡 药 学，（）：.卫 生 部 药 品 标 准 中 药 成 方 制 剂.第 二 册
23、，.陈 建 琴.川 贝 清 肺 糖 浆 中 苦 杏 仁 苷、甘 草 苷 和 甘 草 酸 的 双 波 长 法 测 定.中 国 医 药 工 业 杂 志，（）：.谢 莹 莹，粟 贵，赵 勇，等.法 测 定 川 贝 清 肺 糖 浆 种 蔗 糖 的含 量 研 究.海 峡 药 学，（）：.国 家 药 典 委 员 会 编.中 国 药 典（年 版 四 部）.北 京：中 国医 药 科 技 出 版 社，：.尕 藏 卓 玛，杨 丽 琼，达 娃 卓 玛.测 定 小 儿 清 热 止 咳 口 服 液 中苯 甲 酸 的 含 量.中 国 民 族 民 间 医 药，（）：.蔡 锦 雄，庞 赛，梁 爱 仙，等.高 效 液 相 色
24、谱 法 测 定 复 方 氨 酚 美 沙 糖浆 中 抑 菌 剂 含 量.药 品 评 价，（）：.张 艳，杨 颖.高 效 液 相 色 谱 法 测 定 诺 氟 沙 星 滴 眼 液 中 羟 苯 甲 酯、羟 苯 乙 酯、羟 苯 丙 酯 含 量.中 国 药 业，（）：.国 家 药 典 委 员 会 编.中 国 药 典（年 版 四 部）.北 京：中 国医 药 科 技 出 版 社，：.响 应 面 法 优 化 灯 盏 花 乙 素 的 提 取 工 艺郑 小 力（宁 德 市 食 品 药 品 检 验 检 测 中 心，福 建 宁 德）摘 要：目 的 采 用 响 应 面 法 优 化 灯 盏 花 乙 素 的 提 取 工 艺。
25、方 法 基 于 单 因 素 试 验 结 果，采 用 回 流 提 取 方 法，以 甲 醇 浓 度、提 取 时 间、料 液 比 为自 变 量，设 计 灯 盏 花 乙 素 提 取 工 艺 的 响 应 面 试 验，确 定 最 佳 提 取 条 件。结 果 最 终 确 定 灯 盏 花 乙 素 的 最 佳 提 取 工 艺 是：甲 醇 浓 度，加 热 回流 提 取 时 间.，料 液 比，灯 盏 花 乙 素 提 取 率 理 论 值 与 实 际 验 证 值 分 别 为.、.，相 对 误 差 为.。结 论 模 型 理 论 值 与 实 验值 接 近，表 明 通 过 响 应 面 法 建 立 的 模 型 可 行 性 较 好，建 立 的 灯 盏 花 乙 素 最 佳 提 取 工 艺 稳 定 可 行。关 键 词：灯 盏 花；灯 盏 花 乙 素；提 取；单 因 素 试 验；响 应 面 试 验中 图 分 类 号：文 献 标 识 码：文 章 编 号：（）（，）：.，.：，.海 峡 药 学 年 第 卷 第 期
