1、普通外科学专业毕业论文 精品论文 内皮祖细胞移植治疗慢性深静脉血栓的实验研究关键词：内皮祖细胞 干细胞移植 新生血管化 病理性 深静脉血栓形成摘要：目的： 体外诱导分化内皮祖细胞(endothelial progenitor cells，EPCs)，探讨其生物学特性，观察 EPCs 移植对慢性深静脉血栓的治疗作用，为慢性深静脉血栓的治疗提供一种新的思路。 方法： 1.密度梯度离心法获取 Wistar 大鼠的骨髓单个核细胞(bone marrow-derived mononuclear cells，BMMNCs)，内皮祖细胞培养基(EGM-2MV)体外诱导分化为 EPCs 并进行鉴定。MTT 比
2、色法观察其增殖能力。 2.采用结扎肾下段下腔静脉结合注射凝血酶的方法建立大鼠深静脉血栓模型，并饲养 10 d 以上。动物随机分三组，经大鼠股静脉穿刺注射移植液体。A 组(n=25)：EPCs 移植组，移植 1ml 含有 106 个EPCs 的细胞悬液；B 组(n=25)：EGM-2MV 对照组，移植 1ml 培养基；C 组(n=25)：空白对照组，建立血栓模型后不做其他处理。 3.移植后分时间段取出血栓段下腔静脉及血栓，应用免疫组织化学法检测各组血栓中新生血管及机化再通的情况。Western blot 测定第 14 天各组血栓内血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的
3、蛋白表达变化。 4.采用 SPSS13.0 软件进行分析。 结果： 体外成功诱导培养了大鼠骨髓源性 EPCs，下腔静脉造影显示成功构建了大鼠慢性深静脉血栓模型；vWF 免疫组化显示 A 组的血栓再通毛细血管密度明显高于 B、C 组，B、C 组之间差异无统计学意义；Western blot 结果显示 A、B、C 三组 VEGF、bFGF 蛋白均有表达，A 组较 B、C 组明显上调(Plt;0.05)，B 组和 C 组之间差异无统计学意义。 结论： EPCs 移植后分化为内皮细胞，使血栓内血管的新生能力明显增强，加快血栓的机化和再通。正文内容目的： 体外诱导分化内皮祖细胞(endothelial
4、progenitor cells，EPCs)，探讨其生物学特性，观察 EPCs 移植对慢性深静脉血栓的治疗作用，为慢性深静脉血栓的治疗提供一种新的思路。 方法： 1.密度梯度离心法获取 Wistar 大鼠的骨髓单个核细胞(bone marrow-derived mononuclear cells，BMMNCs)，内皮祖细胞培养基(EGM-2MV)体外诱导分化为 EPCs 并进行鉴定。MTT 比色法观察其增殖能力。 2.采用结扎肾下段下腔静脉结合注射凝血酶的方法建立大鼠深静脉血栓模型，并饲养 10 d 以上。动物随机分三组，经大鼠股静脉穿刺注射移植液体。A 组(n=25)：EPCs 移植组，移植
5、 1ml 含有 106 个EPCs 的细胞悬液；B 组(n=25)：EGM-2MV 对照组，移植 1ml 培养基；C 组(n=25)：空白对照组，建立血栓模型后不做其他处理。 3.移植后分时间段取出血栓段下腔静脉及血栓，应用免疫组织化学法检测各组血栓中新生血管及机化再通的情况。Western blot 测定第 14 天各组血栓内血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的蛋白表达变化。 4.采用 SPSS13.0 软件进行分析。 结果： 体外成功诱导培养了大鼠骨髓源性 EPCs，下腔静脉造影显示成功构建了大鼠慢性深静脉血栓模型；vWF 免疫组化显示 A 组的血栓再通毛细血
6、管密度明显高于 B、C 组，B、C 组之间差异无统计学意义；Western blot 结果显示 A、B、C 三组 VEGF、bFGF 蛋白均有表达，A 组较 B、C 组明显上调(Plt;0.05)，B 组和 C 组之间差异无统计学意义。 结论： EPCs 移植后分化为内皮细胞，使血栓内血管的新生能力明显增强，加快血栓的机化和再通。目的： 体外诱导分化内皮祖细胞(endothelial progenitor cells，EPCs)，探讨其生物学特性，观察 EPCs 移植对慢性深静脉血栓的治疗作用，为慢性深静脉血栓的治疗提供一种新的思路。 方法： 1.密度梯度离心法获取 Wistar大鼠的骨髓单个
7、核细胞(bone marrow-derived mononuclear cells，BMMNCs)，内皮祖细胞培养基(EGM-2MV)体外诱导分化为 EPCs 并进行鉴定。MTT 比色法观察其增殖能力。 2.采用结扎肾下段下腔静脉结合注射凝血酶的方法建立大鼠深静脉血栓模型，并饲养 10 d 以上。动物随机分三组，经大鼠股静脉穿刺注射移植液体。A 组(n=25)：EPCs 移植组，移植 1ml 含有 106 个 EPCs 的细胞悬液；B 组(n=25)：EGM-2MV 对照组，移植 1ml 培养基；C 组(n=25)：空白对照组，建立血栓模型后不做其他处理。 3.移植后分时间段取出血栓段下腔静脉
8、及血栓，应用免疫组织化学法检测各组血栓中新生血管及机化再通的情况。Western blot 测定第 14 天各组血栓内血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的蛋白表达变化。 4.采用 SPSS13.0 软件进行分析。 结果： 体外成功诱导培养了大鼠骨髓源性 EPCs，下腔静脉造影显示成功构建了大鼠慢性深静脉血栓模型；vWF 免疫组化显示 A 组的血栓再通毛细血管密度明显高于B、C 组，B、C 组之间差异无统计学意义；Western blot 结果显示 A、B、C 三组 VEGF、bFGF 蛋白均有表达，A 组较 B、C 组明显上调(Plt;0.05)，B 组和 C 组
9、之间差异无统计学意义。 结论： EPCs 移植后分化为内皮细胞，使血栓内血管的新生能力明显增强，加快血栓的机化和再通。目的： 体外诱导分化内皮祖细胞(endothelial progenitor cells，EPCs)，探讨其生物学特性，观察 EPCs 移植对慢性深静脉血栓的治疗作用，为慢性深静脉血栓的治疗提供一种新的思路。 方法： 1.密度梯度离心法获取 Wistar大鼠的骨髓单个核细胞(bone marrow-derived mononuclear cells，BMMNCs)，内皮祖细胞培养基(EGM-2MV)体外诱导分化为 EPCs 并进行鉴定。MTT 比色法观察其增殖能力。 2.采用结
10、扎肾下段下腔静脉结合注射凝血酶的方法建立大鼠深静脉血栓模型，并饲养 10 d 以上。动物随机分三组，经大鼠股静脉穿刺注射移植液体。A 组(n=25)：EPCs 移植组，移植 1ml 含有 106 个 EPCs 的细胞悬液；B 组(n=25)：EGM-2MV 对照组，移植 1ml 培养基；C 组(n=25)：空白对照组，建立血栓模型后不做其他处理。 3.移植后分时间段取出血栓段下腔静脉及血栓，应用免疫组织化学法检测各组血栓中新生血管及机化再通的情况。Western blot 测定第 14 天各组血栓内血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的蛋白表达变化。 4.采用 SP
11、SS13.0 软件进行分析。 结果： 体外成功诱导培养了大鼠骨髓源性 EPCs，下腔静脉造影显示成功构建了大鼠慢性深静脉血栓模型；vWF 免疫组化显示 A 组的血栓再通毛细血管密度明显高于B、C 组，B、C 组之间差异无统计学意义；Western blot 结果显示 A、B、C 三组 VEGF、bFGF 蛋白均有表达，A 组较 B、C 组明显上调(Plt;0.05)，B 组和 C 组之间差异无统计学意义。 结论： EPCs 移植后分化为内皮细胞，使血栓内血管的新生能力明显增强，加快血栓的机化和再通。目的： 体外诱导分化内皮祖细胞(endothelial progenitor cells，EPC
12、s)，探讨其生物学特性，观察 EPCs 移植对慢性深静脉血栓的治疗作用，为慢性深静脉血栓的治疗提供一种新的思路。 方法： 1.密度梯度离心法获取 Wistar大鼠的骨髓单个核细胞(bone marrow-derived mononuclear cells，BMMNCs)，内皮祖细胞培养基(EGM-2MV)体外诱导分化为 EPCs 并进行鉴定。MTT 比色法观察其增殖能力。 2.采用结扎肾下段下腔静脉结合注射凝血酶的方法建立大鼠深静脉血栓模型，并饲养 10 d 以上。动物随机分三组，经大鼠股静脉穿刺注射移植液体。A 组(n=25)：EPCs 移植组，移植 1ml 含有 106 个 EPCs 的细
13、胞悬液；B 组(n=25)：EGM-2MV 对照组，移植 1ml 培养基；C 组(n=25)：空白对照组，建立血栓模型后不做其他处理。 3.移植后分时间段取出血栓段下腔静脉及血栓，应用免疫组织化学法检测各组血栓中新生血管及机化再通的情况。Western blot 测定第 14 天各组血栓内血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的蛋白表达变化。 4.采用 SPSS13.0 软件进行分析。 结果： 体外成功诱导培养了大鼠骨髓源性 EPCs，下腔静脉造影显示成功构建了大鼠慢性深静脉血栓模型；vWF 免疫组化显示 A 组的血栓再通毛细血管密度明显高于B、C 组，B、C 组之间
14、差异无统计学意义；Western blot 结果显示 A、B、C 三组 VEGF、bFGF 蛋白均有表达，A 组较 B、C 组明显上调(Plt;0.05)，B 组和 C 组之间差异无统计学意义。 结论： EPCs 移植后分化为内皮细胞，使血栓内血管的新生能力明显增强，加快血栓的机化和再通。目的： 体外诱导分化内皮祖细胞(endothelial progenitor cells，EPCs)，探讨其生物学特性，观察 EPCs 移植对慢性深静脉血栓的治疗作用，为慢性深静脉血栓的治疗提供一种新的思路。 方法： 1.密度梯度离心法获取 Wistar大鼠的骨髓单个核细胞(bone marrow-deriv
15、ed mononuclear cells，BMMNCs)，内皮祖细胞培养基(EGM-2MV)体外诱导分化为 EPCs 并进行鉴定。MTT 比色法观察其增殖能力。 2.采用结扎肾下段下腔静脉结合注射凝血酶的方法建立大鼠深静脉血栓模型，并饲养 10 d 以上。动物随机分三组，经大鼠股静脉穿刺注射移植液体。A 组(n=25)：EPCs 移植组，移植 1ml 含有 106 个 EPCs 的细胞悬液；B 组(n=25)：EGM-2MV 对照组，移植 1ml 培养基；C 组(n=25)：空白对照组，建立血栓模型后不做其他处理。 3.移植后分时间段取出血栓段下腔静脉及血栓，应用免疫组织化学法检测各组血栓中新
16、生血管及机化再通的情况。Western blot 测定第 14 天各组血栓内血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的蛋白表达变化。 4.采用 SPSS13.0 软件进行分析。 结果： 体外成功诱导培养了大鼠骨髓源性 EPCs，下腔静脉造影显示成功构建了大鼠慢性深静脉血栓模型；vWF 免疫组化显示 A 组的血栓再通毛细血管密度明显高于B、C 组，B、C 组之间差异无统计学意义；Western blot 结果显示 A、B、C 三组 VEGF、bFGF 蛋白均有表达，A 组较 B、C 组明显上调(Plt;0.05)，B 组和 C 组之间差异无统计学意义。 结论： EPCs
17、移植后分化为内皮细胞，使血栓内血管的新生能力明显增强，加快血栓的机化和再通。目的： 体外诱导分化内皮祖细胞(endothelial progenitor cells，EPCs)，探讨其生物学特性，观察 EPCs 移植对慢性深静脉血栓的治疗作用，为慢性深静脉血栓的治疗提供一种新的思路。 方法： 1.密度梯度离心法获取 Wistar大鼠的骨髓单个核细胞(bone marrow-derived mononuclear cells，BMMNCs)，内皮祖细胞培养基(EGM-2MV)体外诱导分化为 EPCs 并进行鉴定。MTT 比色法观察其增殖能力。 2.采用结扎肾下段下腔静脉结合注射凝血酶的方法建立大
18、鼠深静脉血栓模型，并饲养 10 d 以上。动物随机分三组，经大鼠股静脉穿刺注射移植液体。A 组(n=25)：EPCs 移植组，移植 1ml 含有 106 个 EPCs 的细胞悬液；B 组(n=25)：EGM-2MV 对照组，移植 1ml 培养基；C 组(n=25)：空白对照组，建立血栓模型后不做其他处理。 3.移植后分时间段取出血栓段下腔静脉及血栓，应用免疫组织化学法检测各组血栓中新生血管及机化再通的情况。Western blot 测定第 14 天各组血栓内血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的蛋白表达变化。 4.采用 SPSS13.0 软件进行分析。 结果： 体外
19、成功诱导培养了大鼠骨髓源性 EPCs，下腔静脉造影显示成功构建了大鼠慢性深静脉血栓模型；vWF 免疫组化显示 A 组的血栓再通毛细血管密度明显高于B、C 组，B、C 组之间差异无统计学意义；Western blot 结果显示 A、B、C 三组 VEGF、bFGF 蛋白均有表达，A 组较 B、C 组明显上调(Plt;0.05)，B 组和 C 组之间差异无统计学意义。 结论： EPCs 移植后分化为内皮细胞，使血栓内血管的新生能力明显增强，加快血栓的机化和再通。目的： 体外诱导分化内皮祖细胞(endothelial progenitor cells，EPCs)，探讨其生物学特性，观察 EPCs 移
20、植对慢性深静脉血栓的治疗作用，为慢性深静脉血栓的治疗提供一种新的思路。 方法： 1.密度梯度离心法获取 Wistar大鼠的骨髓单个核细胞(bone marrow-derived mononuclear cells，BMMNCs)，内皮祖细胞培养基(EGM-2MV)体外诱导分化为 EPCs 并进行鉴定。MTT 比色法观察其增殖能力。 2.采用结扎肾下段下腔静脉结合注射凝血酶的方法建立大鼠深静脉血栓模型，并饲养 10 d 以上。动物随机分三组，经大鼠股静脉穿刺注射移植液体。A 组(n=25)：EPCs 移植组，移植 1ml 含有 106 个 EPCs 的细胞悬液；B 组(n=25)：EGM-2MV
21、 对照组，移植 1ml 培养基；C 组(n=25)：空白对照组，建立血栓模型后不做其他处理。 3.移植后分时间段取出血栓段下腔静脉及血栓，应用免疫组织化学法检测各组血栓中新生血管及机化再通的情况。Western blot 测定第 14 天各组血栓内血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的蛋白表达变化。 4.采用 SPSS13.0 软件进行分析。 结果： 体外成功诱导培养了大鼠骨髓源性 EPCs，下腔静脉造影显示成功构建了大鼠慢性深静脉血栓模型；vWF 免疫组化显示 A 组的血栓再通毛细血管密度明显高于B、C 组，B、C 组之间差异无统计学意义；Western blot
22、 结果显示 A、B、C 三组 VEGF、bFGF 蛋白均有表达，A 组较 B、C 组明显上调(Plt;0.05)，B 组和 C 组之间差异无统计学意义。 结论： EPCs 移植后分化为内皮细胞，使血栓内血管的新生能力明显增强，加快血栓的机化和再通。目的： 体外诱导分化内皮祖细胞(endothelial progenitor cells，EPCs)，探讨其生物学特性，观察 EPCs 移植对慢性深静脉血栓的治疗作用，为慢性深静脉血栓的治疗提供一种新的思路。 方法： 1.密度梯度离心法获取 Wistar大鼠的骨髓单个核细胞(bone marrow-derived mononuclear cells，
23、BMMNCs)，内皮祖细胞培养基(EGM-2MV)体外诱导分化为 EPCs 并进行鉴定。MTT 比色法观察其增殖能力。 2.采用结扎肾下段下腔静脉结合注射凝血酶的方法建立大鼠深静脉血栓模型，并饲养 10 d 以上。动物随机分三组，经大鼠股静脉穿刺注射移植液体。A 组(n=25)：EPCs 移植组，移植 1ml 含有 106 个 EPCs 的细胞悬液；B 组(n=25)：EGM-2MV 对照组，移植 1ml 培养基；C 组(n=25)：空白对照组，建立血栓模型后不做其他处理。 3.移植后分时间段取出血栓段下腔静脉及血栓，应用免疫组织化学法检测各组血栓中新生血管及机化再通的情况。Western b
24、lot 测定第 14 天各组血栓内血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的蛋白表达变化。 4.采用 SPSS13.0 软件进行分析。 结果： 体外成功诱导培养了大鼠骨髓源性 EPCs，下腔静脉造影显示成功构建了大鼠慢性深静脉血栓模型；vWF 免疫组化显示 A 组的血栓再通毛细血管密度明显高于B、C 组，B、C 组之间差异无统计学意义；Western blot 结果显示 A、B、C 三组 VEGF、bFGF 蛋白均有表达，A 组较 B、C 组明显上调(Plt;0.05)，B 组和 C 组之间差异无统计学意义。 结论： EPCs 移植后分化为内皮细胞，使血栓内血管的新生能
25、力明显增强，加快血栓的机化和再通。目的： 体外诱导分化内皮祖细胞(endothelial progenitor cells，EPCs)，探讨其生物学特性，观察 EPCs 移植对慢性深静脉血栓的治疗作用，为慢性深静脉血栓的治疗提供一种新的思路。 方法： 1.密度梯度离心法获取 Wistar大鼠的骨髓单个核细胞(bone marrow-derived mononuclear cells，BMMNCs)，内皮祖细胞培养基(EGM-2MV)体外诱导分化为 EPCs 并进行鉴定。MTT 比色法观察其增殖能力。 2.采用结扎肾下段下腔静脉结合注射凝血酶的方法建立大鼠深静脉血栓模型，并饲养 10 d 以上。
26、动物随机分三组，经大鼠股静脉穿刺注射移植液体。A 组(n=25)：EPCs 移植组，移植 1ml 含有 106 个 EPCs 的细胞悬液；B 组(n=25)：EGM-2MV 对照组，移植 1ml 培养基；C 组(n=25)：空白对照组，建立血栓模型后不做其他处理。 3.移植后分时间段取出血栓段下腔静脉及血栓，应用免疫组织化学法检测各组血栓中新生血管及机化再通的情况。Western blot 测定第 14 天各组血栓内血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的蛋白表达变化。 4.采用 SPSS13.0 软件进行分析。 结果： 体外成功诱导培养了大鼠骨髓源性 EPCs，下腔
27、静脉造影显示成功构建了大鼠慢性深静脉血栓模型；vWF 免疫组化显示 A 组的血栓再通毛细血管密度明显高于B、C 组，B、C 组之间差异无统计学意义；Western blot 结果显示 A、B、C 三组 VEGF、bFGF 蛋白均有表达，A 组较 B、C 组明显上调(Plt;0.05)，B 组和 C 组之间差异无统计学意义。 结论： EPCs 移植后分化为内皮细胞，使血栓内血管的新生能力明显增强，加快血栓的机化和再通。目的： 体外诱导分化内皮祖细胞(endothelial progenitor cells，EPCs)，探讨其生物学特性，观察 EPCs 移植对慢性深静脉血栓的治疗作用，为慢性深静脉
28、血栓的治疗提供一种新的思路。 方法： 1.密度梯度离心法获取 Wistar大鼠的骨髓单个核细胞(bone marrow-derived mononuclear cells，BMMNCs)，内皮祖细胞培养基(EGM-2MV)体外诱导分化为 EPCs 并进行鉴定。MTT 比色法观察其增殖能力。 2.采用结扎肾下段下腔静脉结合注射凝血酶的方法建立大鼠深静脉血栓模型，并饲养 10 d 以上。动物随机分三组，经大鼠股静脉穿刺注射移植液体。A 组(n=25)：EPCs 移植组，移植 1ml 含有 106 个 EPCs 的细胞悬液；B 组(n=25)：EGM-2MV 对照组，移植 1ml 培养基；C 组(n
29、=25)：空白对照组，建立血栓模型后不做其他处理。 3.移植后分时间段取出血栓段下腔静脉及血栓，应用免疫组织化学法检测各组血栓中新生血管及机化再通的情况。Western blot 测定第 14 天各组血栓内血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的蛋白表达变化。 4.采用 SPSS13.0 软件进行分析。 结果： 体外成功诱导培养了大鼠骨髓源性 EPCs，下腔静脉造影显示成功构建了大鼠慢性深静脉血栓模型；vWF 免疫组化显示 A 组的血栓再通毛细血管密度明显高于B、C 组，B、C 组之间差异无统计学意义；Western blot 结果显示 A、B、C 三组 VEGF、b
30、FGF 蛋白均有表达，A 组较 B、C 组明显上调(Plt;0.05)，B 组和 C 组之间差异无统计学意义。 结论： EPCs 移植后分化为内皮细胞，使血栓内血管的新生能力明显增强，加快血栓的机化和再通。特别提醒 ：正文内容由 PDF 文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 http:/ 。如还不能显示，可以联系我 q q 1627550258 ，提供原格式文档。“垐垯櫃 换烫梯葺铑?endstreamendobj2x 滌?U 閩 AZ箾 FTP 鈦X 飼?狛P? 燚?琯嫼 b?袍*甒?颙嫯?4)=r 宵?i?j 彺帖 B3 锝檡骹笪 yLrQ
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