实验七蛋白质含量的测定

1、1双缩脲法测定奶粉中的蛋白质含量【摘要】 目的 尝试建立一种快速准确地测定奶粉中蛋白质含量的方法。方法 使用双缩脲法测定蛋白质的含量，在 540 nm 波长处，分别测定标准蛋白质应用液与样品稀释液的吸光度值，基于测定液中蛋白质含量与其吸光度值呈正比关系，计算出样品中蛋白质的含量。【关键词】 奶粉；蛋白质；双缩脲法；标准曲线1【前言】 蛋白质是人类最重要的营养物质之一。因此，奶粉中蛋白质含量一直是食品检测中的重要指标。目前蛋白质定量方法较多, 如凯氏定氮法、紫外分光光度法和 Lowry 法等。虽然凯氏定氮法目前是测定蛋白。

2、实验 8 植物组织中可溶性蛋白质含量的测定斐林-酚试剂法 原 理 斐林(Folin)-酚试剂法结合了双缩脲试剂和酚试剂与蛋白质的反应， 其中包括两步反应：第一步是在碱性条件下，与铜试剂作用生成蛋白质-铜络合物；第二步是此络合物将磷钼酸、磷钨酸试剂还原，生成磷钼蓝和磷钨蓝的深蓝色混合物，颜色深浅与蛋白含量成正相关。在 650nm 时比色测定的灵敏度比双缩脲法高 100 倍。由于肤键显色效果增强，从而减少了因蛋白质种类引起的偏差。该法适于微量蛋白的测定(范围为 5l00g 蛋白质)。 材料、仪器设备及试剂(一)材料 各种植物材料。 (二)仪器。

3、实验七 考马斯亮蓝 G250 法测定的蛋白质含量一、试验目的1. 学习分光光度计的原理及操作2. 学习利用染色方法提高蛋白质消光系数，以提高分光光度法检测灵敏度 二、基本原理1. 根据物质的吸收光谱进行定性或定量分析的方法称为吸收光谱法或分光光度法 。该法所用的仪器称为分光光度计或吸收光谱仪。该法所使用的光谱范围包括可见光和紫外光，即包括波长在 200 - 800 nm 之间的光。2. 分光光度计灵敏度高，测定速度快，应用范围广，其中的紫外/可见分光光度技术更是生物化学研究工作中必不可少的基本手段之一。 3.紫外区可分为紫外（近紫外。

4、几种蛋白质含量测定方法的比较【摘要】：蛋白质含量测定方法，是生物化学研究中最常用、最基本的分析之一。目前常用的方法有凯氏定氮法、双缩脲法(Biuret)、紫外吸收法、考马斯亮蓝法（Bradford），Folin酚试剂法（Lowry）杜马斯燃烧法。其中 Bradford 法灵敏度颇高，比紫外吸收法灵敏 1020 倍,比 Biuret 法灵敏 100 倍以上。凯氏定氮法虽然比较复杂，但较准确，往往以定氮法测定的蛋白质作为其他方法的标准蛋白质。过去 Folin酚试剂法法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难（现在已可以在本公司订购），近年来逐渐被考马。

5、实验报告实验名称：蛋白质含量的测定（Folin-酚法） 实验日期： 班级： 学生姓名： 研究背景与目的：蛋白质是生物最重要的基本组成成份之一, 蛋白质的定量分析方法的研究在国际上一直十分活跃，Folin-酚法是一种灵敏度极高，可快速测定蛋白质含量的方法，广泛地应用于蛋白质含量的测定。本实验培养掌握使用 Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和操作方法，同时熟练 722 分光光度计的使用和比色法。实验原理：Folin-试剂是由两部分组成，甲试剂相当于双缩脲试剂，在碱性条件下，蛋白质中的肽键与铜离子结合生成络合物。试剂乙是磷钨酸和磷钼酸。

6、实验一:双缩脲法测定蛋白质含量一 目的 掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理及方法。二 原理 双缩脲( )是两分子尿素经 180左右加热,放出一分子氨( NH3)后得到的产物。在强碱溶液中，双缩脲与 CUSO4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。其原因是含有两个及以上肽键或类似肽键有化合物都具有类似双缩脲反应。蛋白质含有多个肽键，在碱性溶液中能与 CU2+络合成紫红色的络合物。其颜色的深浅与被测样品中蛋白质浓度呈正比，而与蛋白质分子量和氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。该法对样品中蛋白质含量要求相对较高，一般在 110mg/L 蛋白质。

7、蛋白质羰基含量检测实验步骤1. 阳性对照、处理样品的制备（无处理，抗氧化剂保护,阳性对照只加氧化剂）5mg/ml BSA (pH=7.4 的 Tris-Hcl 缓冲液) 只加 pH=7.4 的 Tris-Hcl 缓冲液加入抗氧化剂(Trolox)，氧化剂（1mM 硫酸亚铁 1mM 过氧化氢现加， ）只加氧化剂室温孵育 30 分钟已氧化 BAS加入 1ml 20%的三氯乙酸，使终浓度为 10%，漩涡振荡，1000g 离心10 分钟，弃上清沉淀 12蛋白质羰基含量的测定注：以上三组分别有一空白对照（不与 DNPH 反应）沉淀 1加 2ml 10mM DNPH（2M 盐酸溶解） ，空白管加 2ml 2M 盐酸，混匀，室温黑暗 1 小时，每。

8、南方医科大学生物化学实验报告姓 名： 学 号： 专业年级： 组 别： 第七实验室 生物化学与分子生物学实验教学中心实验名称 Folin-酚试剂法测定蛋白质含量实验日期 实验地点 第七实验室合作者 指导老师评分 教师签名 批改日期格式要求：正文请统一用：小四号，宋体，1.5 倍行距；数字、英文用 Times New Roman；标题用：四号，黑体，加粗。需强调的地方请用蓝颜色标出。不得出现多行、多页空白现象。一、实验目的1、掌握 Folin-酚试剂法测定蛋白质含量的原理及其实验操作技术。2、熟悉分光光度计的用法。3、掌握制作标准曲线的要领和通过标。

9、植物体内可溶性蛋白质含量的测定 植物体内的可溶性蛋白质含量是一个重要的生理生化指标 如在研究每一种酶的作用时常以比活 酶活力单位 毫克蛋白质 unIT Mg ProTeIn 表示酶活力大小及酶制剂纯度 这就需要测定蛋白质含量 常用的测定方法有LoWry法和考马斯亮蓝G 250染色法 本实验将分别介绍这两种方法 方法一 LoWry法 劳里法 原理 LoWry法是双缩脲法 BIureT 和福林酚法 o。

10、溶液中蛋白质含量的测定学案【实验分析】应用分光光度计等测试仪器定量测定食物中营养物质的含量，是中学生物实验技术的升级。它不仅让学生感悟到生物学研究技术早就进入科学精准测量时代，而且可以让学生知道自己在课堂中学会的实验技术可以应用到日常生活中，感受学习的乐趣。“溶液中蛋白质含量的测定”是上海市高中生命科学教材第一册中有关蛋白质含量测定的定量实验，也是高中第一个定量的生物学实验。【实验原理】1. 双缩脲反应：双缩脲(NH3CONHCONH3) 是两个分子脲经 180 摄氏度左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶。

11、蛋白质的测定方法测定食品中的蛋白质含量有二种方法，一是凯氏微量法，二是自动定氮分析法。一凯氏微量法有手工滴定定氮和自动定氮仪定氮，实验者可根据经济条件设备而定。1.原理蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用过量硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。2NH2（CH2）2COOH+13H2SO4 （NH4）2SO4+6CO2+12SO2+16H2O（NH4）2SO4+2NaOH 2NH3+2H2O+Na2SO42.方法 本法参照 GB 5009.5 -85适用于。

12、豆浆中蛋白质含量的测定1、实验目的：1、学习凯氏定氮法测定蛋白质的原理。2、掌握凯氏定氮法的操作技术，包括样品的消化处理、蒸馏、滴定及蛋白质含量计算等。二、实验原理：蛋白质是含氮的化合物。食品与浓硫酸和催化剂共同加热消化，使蛋白质分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵，留在消化液中，然后加碱蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后，再用盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量来乘以蛋白质换算系数，即得蛋白质含量。3、实验试剂与仪器：盐酸，碳酸钠，氢氧化钠，无水硫酸铜，硫酸钾，硫酸，甲基橙，甲基红，豆浆微量定氮蒸馏装置：如图 3。

13、目的意义：水稻是重要的粮食作物之一，其品质优劣是值得人们重视的问题。一个高产水稻品种，往往由于食味差、或营养不丰富，而不受大众的欢迎。因此，在保证高产的同时，还要改善稻米的品质。本实验将测定大米品质的几个重要生化指标，为水稻育种提供理论依据。 大米蛋白质含量的测定 考马斯亮兰 G250 法一、原理考马斯亮 G250 是一种染料，在游离状态下呈红色，在 465nm 波长处有最大光吸收。它能与蛋白质稳定结合，结合蛋白质后变为青色，在 595nm 处有最大吸收，在一定蛋白质浓度范围内（0 1000g/ml），蛋白质 色素结合物在 595nm 波长。

14、龙志敏 200930220121 09制药一班实验二 绿豆芽的蛋白质含量测定 (考马斯亮蓝G-250 比色法 ) 一、实验目的 1、了解考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的原理，掌握其测定方法。 2、熟练掌握分光光度计的使用技术。 二、实验原理 考马斯亮蓝G-250是一种染料，在游离状态下呈红色，当它与蛋白质结合后变为蓝色，该结合物在595nm波长下有最大光吸收。在一定的蛋白质浓度范围内(01000g/mL)，其吸光度与蛋白质含量成正比，故可用于可溶性蛋白质的定量测定。 三、仪器、试剂和材料 1、仪器设备 分析天平、10mL塑料离心管、5mL 移液管、研钵、量筒、50mL 。

15、牛奶中蛋白质含量的测定摘要：通过国标牛奶中蛋白质的测定找出它的不足之处，用新的方法进行蛋白质的测定。关键词：蛋白质 测定凯氏定氮法微 波消解凯式定氮法 Bradford 法 甲醛值滴定法牛奶是一种营养丰富而全面的理想食品,是人体所需蛋白质的重要来源,蛋白质是牛奶中的主要营养指标。因此，牛奶中蛋白质的测定是一件非常重要的事，也是大家非常关注的事。用凯氏定氮的方法检测蛋白质含量。蛋白质测定的国标规定方法凯氏定氮法介绍 【GB/T 5009.51985】 食品中蛋白质的测定方法 本标准适用于各类食品中蛋白质的测定。 1 原理 蛋白质是含。

16、实验一蛋白质含量的测定,(考马斯亮蓝法),实验目的,植物体内的可溶性蛋白质大多数是参与各种代谢的酶类，测其含量是了解植物体总代谢的一个重要指标。在研究每一种酶的作用时，常以比活（酶活力单位mg蛋白）表示酶活力大小及酶制剂纯度。因此，测定植物体内可溶性蛋白质是研究酶活的一个重要项目。,一、原理,考马斯亮蓝G-250（Coomassit brilliant blue G-250）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在一定蛋白质浓度范围内（5100g/ml），蛋白质色素复合物在595nm波长下的光吸收与蛋白质含量成正比，故可用于蛋白质的定量测定。,特点,蛋白。

17、170 实验部分实验一 蛋白质含量测定法本实验的目的是学会各种蛋白质含量的测定方法。了解各种测定方法的基本原理和优缺点。蛋白质含量测定法，是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四种古老的经典方法，即定氮法，双缩尿法（Biuret 法） 、Folin酚试剂法（Lowry 法）和紫外吸收法。另外还有一种近十年才普遍使用起来的新的测定法，即考马斯亮蓝法（Bradford 法） 。其中 Bradford 法和 Lowry 法灵敏度最高，比紫外吸收法灵敏 1020 倍，比 Biuret 法灵敏 100 倍以上。定氮法虽然比较复杂，但较准确，往往以定氮法测。

18、170 实验部分实验一 蛋白质含量测定法本实验的目的是学会各种蛋白质含量的测定方法。了解各种测定方法的基本原理和优缺点。蛋白质含量测定法，是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四种古老的经典方法，即定氮法，双缩尿法（Biuret 法） 、Folin酚试剂法（Lowry 法）和紫外吸收法。另外还有一种近十年才普遍使用起来的新的测定法，即考马斯亮蓝法（Bradford 法） 。其中 Bradford 法和 Lowry 法灵敏度最高，比紫外吸收法灵敏 1020 倍，比 Biuret 法灵敏 100 倍以上。定氮法虽然比较复杂，但较准确，往往以定氮法测。

19、实验七 蛋白质含量的测定衡量食品的营养成分时，要测定蛋白质含量，但由于蛋白质组成及其性质的复杂性，在食品分析中，通常用食品的总氮量表示，蛋白质是食品含氮物质的主要形式，每一蛋白质都有其恒定的含氮量，用实验方法求得某样品中的含氮量后，通过一定的换算系数。即可计算该样品的蛋白质含量。一般食品蛋白质含氮量为 l0如肉、蛋、豌豆、玉米等，其换算系数为6.25，小麦取 5.70，大米 5.95、乳制品 6.38、大豆 5.17，动物胶 5.55。一、目的与要求：掌握微量凯氏法测定蛋白质总氮量的原理及操作技术。包括样品的消化，蒸馏吸收及滴。