侵袭小室实验

1、迁移实验（cell migration assay）实验介绍细胞迁移与侵袭实验将 Transwell 小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔，将研究的细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。实验步骤：1 材料准备：可拍照显微镜，Transwell 小室，孔径 8m，没包被胶的(Coster 和 Corning 公司的也较常用)，Transwell 迁移实验的细胞培养板 24 孔板。细胞培养板。

2、Transwell 侵袭实验全面总结第一节 概念这里想明确两个概念，一个是 Transwell，另一个是肿瘤细胞侵袭模型。1Transwelltrans-这个词根有转移、转运、穿过等意思，well 有小室的意思，可以从字面上理解，这是一类有通透性的杯状的装置，根据 Corning 公司的 Transwell 说明书中的介绍，可以认为这是一种膜滤器（Membrane filters），也可认为是一种有通透性的支架（permeable supports）。更准确地说，Transwell 应该是一种实验技术，这项技术的主要材料是 Transwell小室（Transwell chamber， Transwell insert），其外形为一个可放置在孔。

3、不同实验中 transwell 小室的选择和使用Transwell 小室在细胞实验中很常用，共培养实验、趋化实验、细胞迁移、细胞侵袭以及药物转运实验都会用到，但小室的规格有很多种，不同的实验需要用到的小室规格也不同。根据 transwell 板的不同， transwell 小室可以分为 6 孔板小室、12 孔板小室和 24 孔板小室以及和 transwell 皿配套的 75 mm 直径的小室；根据孔径的不同，从小孔径到大孔径又分为 0.4m 规格、3 m 规格、5 m 规格、8m 规格，不同实验对小室孔径的要求也不一样。小于 3m 孔径的小室，细胞不会迁移通过，研究不涉及细胞运动能力，。

4、1Transwelltrans-这个词根有转移、转运、穿过等意思，well 有小室的意思，可以从字面上理解，这是一类有通透性的杯状的装置，根据 Corning 公司的 Transwell 说明书中的介绍，可以认为这是一种膜滤器（ Membrane filters），也可认为是一种有通透性的支架（permeable supports）。更准确地说，Transwell 应该是一种实验技术，这项技术的主要材料是 Transwell 小室（Transwell chamber，Transwell insert），其外形为一个可放置在孔板里的小杯子，不同厂家对 Transwell 会有不同的命名，而不同型号也可有不同形状，不同大小，根据实验需要。

5、Transwell 侵袭实验1.实验前一天将 ECM 胶（8-12 mg/ml ） （Sigma ）放于 4冰箱中融化过夜2.实验时将所用的枪头在冰上预冷半个小时，ECM 胶用预冷的无血清 1640 按1：9 稀释（稀释至 1mg/ml） ，每孔中加入稀释好的 ECM 胶 40l ，放入 37培养箱中，孵育 5h3.水化基底膜：吸出小室中残余液体，每孔加入 70ul 含无血清 1640 培养液，37，30min，吸去培养基4.对数生长期的细胞，胰酶消化细胞，0.1%血清 1640 悬浮，计数，稀释至密度为 1106/ml，每空中加 200l细胞悬液5.24 孔板下室一般加入 600l 含 30%新生牛血清的 1640 培养基6.24h 后，。

6、侵袭小室实验摘要：在 A549 细胞中过表达 human Oct-4 基因，通过对 Oct-4 过表达细胞组、空细胞组与阴性对照组进入下室的细胞数量进行测定，研究 Oct-4 基因对细胞迁移能力的影响。实验结果显示 Oct-4 基因可以促进 A549 细胞的迁移能力。为进一步深入研究 Oct-4 基因的功能提供实验数据。关键词：Oct-4，Transwell， A549，细胞迁移一、 实验原理 Transwell 小室底层的一张有通透性的膜（一般为聚碳酸酯膜），将其放置于孔板中，小室内称上室，培养板内称下室。由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞。应用。