第八章 分子生物学常用技术的原理及其应用及人类基因组学测 试 题一、名词解释1分子杂交2Southern blotting3Northern blotting4Western blotting 5dot blotting6DNA 芯片技术7PCR8功能性克隆9转基因技术二、填空题1Southern
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1、第八章 分子生物学常用技术的原理及其应用及人类基因组学测 试 题一、名词解释1分子杂交2Southern blotting3Northern blotting4Western blotting 5dot blotting6DNA 芯片技术7PCR8功能性克隆9转基因技术二、填空题1Southern blotting 用于研究 、Northern blotting 用于研究 ,Western blotting 用于研究 。2PCR 的基本反应步骤包括 、 和 三步。3. 在 PCR 反应体系中,除了 DNA 模板外,还需加入 、 、 和 。4Sange 法测序的基本步骤包括 、 、 和 。5目前克隆致病相关基因的主要策略有 、 、 。6血友病第因子基因的首次克隆成功所采用的。
2、常用分子生物学技术及基因诊断、治疗一、选择题 (一) A 型题 1 印迹技术可以分为 A DNA 印迹 B RNA 印迹 C 蛋白质印迹 D 斑点印迹 E 以上都对 2 PCR 实验延伸温度一般是 A 90 B 72 C 80 D 95 E 60 3 Western blot 中的探针是 A RNA B 单链 DNA C cDNA D 抗体 E 双链 DNA 4 Northern blotting 与 Southern blotting 不同的是 A 基本原理不同 B 无需进行限制性内切酶消化 C 探针必须是 RNA D 探针必须是 DNA E 靠毛细作用进行转移 5 可以不经电泳分离而直接点样在 NC 膜上进行杂交分析的是 A 斑点印迹 B 原位杂交 C RNA 印迹 D DNA 芯片技。
3、电电 泳泳德厚行远,因尔成道电泳基本原理电泳基本原理电泳电泳 是指带电颗粒在电场的作用下发生迁是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。移的过程。许多重要的生物分子,如氨基酸、多肽、许多重要的生物分子,如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团,团, 它们在某个特定的它们在某个特定的 pH值下可以带正电值下可以带正电或负电,或负电, 在电场的作用下,这些带电分子在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向会向着与其所带电荷极性相反的电。
4、电泳技术及其 在分子生物学中的应用,环境科学与技术研究中心,电泳是带电荷的胶体颗粒在电场中的移动。,净电荷:生物大分子如蛋白质、核酸、多糖等常以颗粒形式分散在溶液中,它们的净电荷取决于介质的H+浓度与其他大分子的相互作用。在电场中,带电颗粒向阴极或阳极迁移,迁移的方向取决于它们带电的符号。,电泳的实现还依赖于支持介质的存在。,电泳的三要素,以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。,琼脂糖凝胶电泳 (agrose gel electrophoresis ) 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (polyacrylamide g。
5、概 述电泳是指带粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。例如蛋白质具有两性电离性质。当蛋白质溶液的 pH 在蛋白质等电点的碱侧时,该蛋白质带负电荷,在电场中向正极移动,相反则带正电荷,在电场中向负极移动。只有蛋白质溶液 pH 在蛋白质的等电点时静电荷是零,在电场中不向任何一极移动。电泳现象早在 1890 年就被发现,1907 年有人曾在琼脂中电泳,研究白喉毒素;1937 年由Tiselius 制成界面电泳仪,并开始用于蛋白质的研究。从此,人们才逐渐认 识到电泳技术对于生物科学研究是一种重要工具。然而,界面电泳结构复杂。价。