1、交叉配血操作规程(凝聚胺法)一目的 规范交叉配血试验操作;保证临床用血的安全性和有效性。二适用范围 适用于临床配血标本。三职责 血库技术人员负责交叉配血试验四所需材料和设备材料:凝聚胺试剂盒、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管、献血者标本。设备:普通离心机、血型血清学专用离心机、37恒温水浴箱、显微镜五操作步骤1.凝聚胺法(1)以生理盐水配制供、受者 35红细胞悬液。(2) 取试管 3 支,标记主、侧和自身对照主侧加受血者血浆(血清)2 滴,献血者 3%5%的红细胞悬液 1 滴;次侧加献血者血浆(血清)2 滴,受血者 3%5%的红细胞悬液 1 滴;自身对照管加患者血浆(血清)2 滴和患者 3%
2、5%的红细胞悬液 1 滴混匀。(3)以 1000r/分钟离心 1 分钟,观察盐水介质实验结果。(4)每管各加低离子介质(LIM)溶液 0.7ml,混合均匀,室温孵育 1min。(5)每管各加 2 滴凝聚胺溶液,混匀后静置 15s。(6)1000r/分钟离心 1 分钟,倾去上清液,不要沥干。(7)轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集,必须重复步骤(3)-(6)(8)加入 2 滴重悬液,并轻轻混合,观察结果。(9)结果判定如凝聚散开,则为凝聚胺引起的非特异性凝集,判为阴性结果,配血相合;如凝聚不散开,则为抗原抗体结合的特异性反应,判为阳性结果,配血不相合,如肉眼观察凝集强度弱,可进一步在显微
3、镜下观察有无凝集。结果判定要求在 1min 内完成,最长不要超过 3min,因为弱凝集的阳性结果,超过1min 可能变为阴性。六注意事项1.配血技术常规配血技术:选择的技术不仅要能检查出不配合的 IgM 抗体,还必须能检查出尽可能多的不配合的 IgG 抗体,最大限度地减少抗体的漏检。目前认为盐水法交叉配血是输血前检查必不可少的试验,首先采用盐水法进行交叉配血,再采用能够检出 IgG 类抗体的方法进行交叉配血;特殊配血技术,如:预温配血技术:主要用于解决无临床意义的冷抗体引起的交叉配血不配合。2.主侧交叉配血不相合的原因患者或供者 ABO 血型定型不正确,或二者的 ABO 血型不配合;患者血清中存在同种抗体,与供者红细胞上的相应抗原起反应;患者血清中存在自身抗体,与供者红细胞中的相应抗原起反应;供者红细胞上已经包被了抗体,导致抗球蛋白阳性;患者血 清不正常,如白蛋白/球蛋白比例不正常引起缗钱状假凝集,血清中存在高分子聚合物的血浆扩容剂引起假阳性(用盐水添加试验来解决) ;试验系统被污染。 3.次侧交叉配血不相合的原因供者血清中存在针对患者红细胞抗原的抗体;患者与供者的 ABO 血型不相合;患者红细胞已经包被了抗体,直接抗球蛋白试验阳性。