1、青海省血液中心血型参比室技术文件聚凝胺试验 编号:QBC/CB S 09-2004操 作 规 程 版号:第 A 版第 0 次修改第 1 页 共 4 页11.目的：是一种快速、简便检测红细胞不完全抗体的方法，可应用交叉配血试验、抗体筛选和抗体测定等。2.要求：要求全科人员能够熟练掌握原理及操作。3.原理：聚凝胺是一种多价阳离子聚合物，在溶液中有多个阳离子集团，能中和红细胞表面的负电荷，从而缩短红细胞间的正常距离，通过正负电荷的作用，借助离心作用引起红细胞的非特异性凝聚，这种凝聚是可逆的，当红细胞与血清在低离子介质孵育，IgG 抗体与红细胞上相应抗原结合后，在凝聚和凝集外表上是不能区分的，再加入枸
2、橼酸钠重悬液，使枸橼酸根的负电荷与聚凝胺上的正电荷中和，重悬后，非特异性凝聚现象消失，而真正存在的凝集不消失。4.材料与试剂4.1 待检血清（或已知血清） ，待检 2%5%红细胞悬液（或 2%5%已知抗原红细胞）4.2 聚凝胺试剂盒（市售）： 5.操作：5.1 取一支试管，加入待检血清 2 滴或（已知血清 1 滴） 。5.2 加 2%5%待检红细胞（或 2%5%已知红细胞） 1 滴。5.3 加按要求稀释的 LIM 液 0.6ml（或 12 滴） ，混匀，置室温至少 1 分钟（时间长效果好） 。5. 4 加 Polybrene 试剂 1 滴，混匀后 1000g ,离心 1560 秒。5.5 轻摇
3、观察由 Polybrene 引起的红细胞非特异性凝集,若未见红细胞凝集则需重做。5.6 加入 1 滴重悬液轻摇看结果：由 Polybrene 引起的非特异性凝集应在 1 分钟青海省血液中心血型参比室技术文件聚凝胺试验 编号:QBC/CB S 09-2004操 作 规 程 版号:第 A 版第 0 次修改第 2 页 共 4 页2内完全散开，若是由免疫性抗体引起的凝集反应则不会完全散开。5.7 阳性对照试剂代替待检血清按同样的步骤进行质控试验，结果应为“1+”的弱凝集。6、附注6.1 若红细胞中含有较多血清或血浆则需用盐水洗涤细胞一次。6.2 加 Polybrene 试剂时只需加 1 滴，多加 Po
4、lybrene 可能导致重悬液无法充分解散非特异凝集,出现假凝集; 如果使用肝素抗凝的血浆配血需多加 1 滴Polybrene 试剂以中和肝素。6.3 冷凝集处理：在室温较低时（15）使用 Polybrene 方法试验，冷凝集会因 Polybrene 方法而加强，建议使用 LIM 配制的红细胞悬液加待检血清直接离心进行盐水对照试验，如果在盐水法试验中发现有冷凝集，则可将 Polybrene试验结果置 371 分钟后再判读，这时较弱的冷凝集会散开，真凝集会有所减弱，但不会完全散开；或者在室温致敏 1 分钟后用温盐水（45左右）三洗，做间接抗球蛋白试验。7、相关文件7.1中国输血技术操作规程8、相关表单8.1 CB001 青海省血液中心血型参比实验室免疫血液学研究起草人：审核人：批准人：青海省血液中心血型参比室技术文件聚凝胺试验 编号:QBC/CB S 09-2004操 作 规 程 版号:第 A 版第 0 次修改第 3 页 共 4 页3青海省血液中心血型参比室技术文件聚凝胺试验 编号:QBC/CB S 09-2004操 作 规 程 版号:第 A 版第 0 次修改第 4 页 共 4 页4
