1、抗人球蛋白交叉配血操作规程样本要求 :血 样用枸橼酸钠或 EDTA 等抗凝,用血清代替血浆进行检测时,用前离心,2000g10min,防止纤维蛋白干扰反应结果。样本准 备 :将供者 红细胞和受者红细胞各配制为 1%生理盐水悬液。将受血者与献血者的红细胞血清分离;配套试剂 :抗人球蛋白交叉配血检测卡,低离子介质溶液实验步 骤 :(1) 试剂卡室温平衡,离心一次, 标记编号;(2) 将配血的 标本 1 500 离心 5 分钟;(3) 主侧加入用低离子液稀 释至 1%的供者红细胞 50 UL,受血者血 浆(或血清)50 UL;次侧加入用低离子液稀释至 1%的受血者的红细胞 50 UL,供者血浆(或血
2、清)50 UL ;(4)将配血卡置 37 专用孵育器孵育 15 分钟;(5)使用专用离心机离心 5 分钟(900r/min2 分钟、1500r/min,3 分钟),判定结果。结果判定 :一.阳性(+ ):红细胞浮在凝胶表面或部分散入于胶中(结果大于等于 1+),表示配血不成功,需进一步检测。双相(d.p)既有阳性结果,同时也有阴性结果。溶血(Hemo) :红细胞溶解,作为阳性结果对待。二.阴性():红细胞沉于微柱凝胶的尖底部,表示配血成功。备注:1.非特异性凝集:在配血过程中还会出现一些非特异性凝集的现象。当血液标本中含有较多纤维蛋白原时,配血会出现阳性的结果,可用以下 办法去除血清中的纤维蛋
3、白:(1) 轻轻摇动试管,弃去纤维蛋白网;(2)把血标本置 37 中水浴,待血清自动析出或水浴后离心,将纤维蛋白弃去。如果患者的血液中含有较高的冷凝集素,在春、秋、冬三季用凝聚胺配血会出现凝集的现象,但凝集在 37 水浴中会解离。这种患者配血是可将红细胞用 37 的生理盐水洗涤红细胞 3 次,再在37 下操作,这样就可以排除冷凝集素的影响。 2.特异性凝集:当次侧出现凝集时,要考虑为受血者的红细胞已致敏或其他血型(A ,B 或 AB型)的受血者接受 O 型血,可使用洗 涤红细胞。当主侧出现凝集时,可考虑以下情况:(1)配血标本被细菌污染;(2)受血者与献血者血型不合;(3)受血者体内产生不规则抗体。