1、1第十四章 遗传病的治疗遗传病的治疗包括传统治疗和基因治疗两种方法，手术治疗、药物治疗、饮食疗法是遗传病的治疗的传统方法，这些方法可以取得一定疗效，但不能根治。而基因治疗是运用重组 DNA 技术，将具有正常基因及其表达所需的序列导入到病变细胞或体细胞中，以替代或补偿缺陷基因的功能，或抑制基因的过度表达，从而达到治疗遗传性或获得性疾病的目的，是治疗遗传病的理想方法。目前，遗传病的基因治疗有了突破性的进展，但也存在许多问题。本章详细介绍了各种传统的遗传病治疗的方法和技术，并重点介绍了基因治疗的方法、策略、常用技术、应用、问题和展望等问题。一、基本纲要1掌握遗传病的治疗原则。2掌握遗传病基因治疗的基
2、本概念。3掌握基因治疗的策略及转基因治疗的技术考虑。4熟悉基因治疗的临床应用。5熟悉转基因治疗的问题与风险性。6了解传统的遗传病的治疗方法。二、习 题（一）选择题（A 型选择题）1由于分子遗传学的飞速发展，遗传病的治疗有了突破性的进展，已从传统的手术治疗、饮食方法、药物疗法等跨入了 。A基因治疗 B手术与药物治疗 C饮食与维生素治疗D蛋白质与糖类治疗 E物理治疗22由于成功的同种异体移植可以持续提供所缺乏的酶或蛋白质，因此，对于某些先天性代谢病进行器官移植而达到治疗目的，所以这种移植又称 。A.器官移植 B.组织移植 C.细胞移植 D.蛋白移植 E 酶移植3目前能采用症状前药物治疗的疾病是A.
3、甲状腺功能低下 B.苯丙酮尿症 C.枫糖尿症D.同型胱氨酸尿症或半乳糖血症 E.以上都是4目前，遗传病的手术疗法主要包括 。A手术矫正和器官移植 B器官组织细胞修复C克隆技术 D推拿疗法 E手术的剖折5目前，饮食疗法治疗遗传病的基本原则是 。A少食 B多食肉类 C口服维生素 D禁其所忌 E补其所缺6通过特定的方法如同源重组或靶向突变等对突变的 DNA 进行原位修复,将致病基因的突变碱基序列纠正，而正常部分予以保留，就称其为 。A基因修正 B基因转移 C基因添加D基因复制 E基因突变7假如在基因治疗时仅仅将正常的 DNA 导入细胞而不替换掉有缺陷的基因，从而使细胞的功能恢复正常，就称其为 。A基
4、因修正 B基因转移 C基因添加D基因复制 E基因突变8对于缺陷型遗传病患者进行体细胞基因治疗，可以采用的方法为 。ASSCP B基因添加 C三螺旋 DNA 技术D反义技术 EcDNA 杂交9去除整个变异基因，用有功能的正常基因取代之，使致病基因得到永久地更正的策略称为 。A基因替代 B基因转移 C基因修正D基因复制 E基因突变10对有些遗传病是因为某些酶缺乏而不能形成机体所必需的代谢产物，如给予补3充，即可使症状得到明显的改善，达到治疗目的，即称 。A添加 B补缺 C基因突变 D基因修正 EcDNA11外源基因克隆至一个合适的载体，首先导入体外培养的自体或异体的细胞，经筛选后将能表达外源基因的
5、受体细胞重新输回受试者体内称之为 。A直接活体转移 B回体转移 C间体转移 D导入 E移植12将正常基因转移到患者的生殖细胞中而使之发育成一个正常的个体称为 。A体细胞基因治疗 B生殖细胞基因治疗C胚胎细胞的基因治疗 D胚胎组织细胞基因治疗E胎儿的基因治疗13将目的基因导入病变细胞或其他细胞，目的基因的表达产物可以补偿缺陷细胞的功能或使原有的功能得到加强称之为 。A基因突变 B基因增强 C基因复制D基因转移 E基因互补14将含有外源基因的重组病毒、脂质体或裸露的 DNA 直接导入体内称之为 。A直接活体转移 B回体转移 C间体转移D导入 E移植15遗传病治疗不包括下列 方面。A针对突变基因的生
6、殖细胞基因的修饰与改善B针对突变基因转录的基因表达调控C蛋白质功能的改善D在代谢水平上对代谢底物或产物的控制E临床水平的内、外科治疗以及心理治疗等16当遗传病发展到已出现各种临床症状尤其是器官组织已出现了损伤，应用外科手术的方法对病损器官进行 。4A切除 B修补 C替换 D克隆方法 E细胞转导17下列 病症，如能通过筛查在症状出现前做出诊断、及时治疗可获得最佳效果。A半乳糖血症 B糖原储积症 C苯丙酮尿症D血红蛋白病 E甲状腺肿瘤18药物治疗的原则不包括 。A去其所余 B补其所缺 C用其所余D食其所需 E取其所劣19补其所缺临床治疗方法是 。A应用鳌合剂 B应用促排泄剂 C应用酶制剂D血浆置换
7、或血浆过滤 E平衡清除法20酶补充疗法目前采用将纯化酶制剂装入载体后再输入给患者的办法，用的载体是使载体所带的酶逐渐释放，发挥治疗作用，提高疗效。常用的载体是 。A蛋白质 B糖蛋白 C红细胞胞影D反转录酶 E质粒21饮食疗法治疗遗传病的原则是 。A.去其所余 B.禁其所忌 C.补其所缺 D.用其所余 E.取其所劣22. 对因酶缺乏而造成的底物或中间产物堆积的患者正确的治疗方法是 。A制定特殊的食谱或配以药物 B增加底物或中间产物的摄入C使用诱导酶活性的药物 D多食水果E多用维生素治疗23基因治疗的策略不包括 。A基因修正 B基因替代 C基因增强D基因缺失 E基因抑制和基因失活24基因抑制是 。
8、5A导入外源基因去干扰 B抑制基因表达 C导入蛋白质基因D导入原核细胞 E抑制有害的基因表达25. 基因失活是 。A导入外源基因去干扰 B抑制基因表达 C导入蛋白质基因D导入原核细胞 E抑制有害的基因表达26目前进行的基因治疗属于 。A生殖细胞基因治疗 B原核细胞基因治疗 CcDNA 基因治疗D体细胞基因治疗 E胎儿基因治疗27目前常用的基因转移方法是 。A物理 B药学 C生物学 D数学 E化学28不是基因治疗的必要条件是 。A选择合适的疾病 B掌握该病分子缺陷的本质 C矫正遗传病的治疗基因得到克隆 D克隆基因的有效表达 E有可利用的动物模型29下列 疾病不能进行基因治疗。A癌症 B心血管病
9、C呼吸疾病 D营养不良 E神经性疾病30转基因治疗的技术考虑不包括 。A靶细胞选择 B临床实践 C载体选择D被转基因在靶细胞中具有适当的表达效率E被转基因的表达必须受到严格调控等31目前用于转基因的载体有许多，在选择载体时，不需要考虑的是 。A载体对机体的毒性 B载体所携带的转录启动子启动转录的效率C载体对靶细胞的转染效率 D载体本身的大小E载入的 DNA 在细胞中的作用32不属于遗传病的治疗方法是 。A外科治疗 B内科治疗 C基因治疗6D饮食治疗 E组织胚胎治疗33对肿瘤的基因治疗是 。A对免疫细胞的修饰 B对肿瘤细胞的修饰C体细胞的修饰 D对生殖细胞的修饰 E对胚胎细胞的修饰34. 对于单
10、基因病特别是先天性代谢病的治疗主要采用 。A. 外科治疗 B内科治疗 C基因治疗D饮食治疗 E组织胚胎治疗35. 对于多基因病的治疗主要采用 。A. 外科治疗 B细胞治疗 C基因治疗D饮食治疗 E组织治疗36. 当遗传病发展到已出现各种临床症状尤其是器官组织已出现了损伤，最好的治疗方法是 。A. 基因治疗 B内科治疗 C手术治疗D饮食治疗 E组织胚胎治疗37. 组织或器官的移植是治疗某些遗传病的有效方法,由于移植物能提供正常的酶原，所以这种移植称为 。A.组织移植 B.细胞移植 C.酶移植 D.蛋白移植 E.器官移植38. 由于酶活性过高所造成的生产过剩病，可用 。A.促排泄剂 B.代谢抑制剂
11、 C.螯合剂 D.纯化酶制剂 E.维生素39. 在某些情况下，酶活性不足不是结构基因的缺失，而是其表达功能“关闭” ，可使用药物、激素和营养物质使其“开启” ，诱导其合成相应的酶。这种疗法称为 。A.酶补充疗法 B.酶诱导治疗 C.酶介导治疗 D.酶转移治疗 E.酶导入治疗40. 产前诊断如确诊羊水中甲基丙二酸尿症，在出生前和出生后给母体和患儿注射 。7A.维生素 B6 B.维生素 B2 C.维生素 B12 D.维生素 E E.维生素 C41. 肝豆状核变性（Wilson 病）是一种铜代谢障碍性疾病，应用一些药物与铜离子能形成螯合物的原理，给患者服用 。A.青霉素 B. 青霉胺 C.维生素 B
12、12 D.硫酸镁 E.去铁胺 B42. 原发性痛风和自毁容貌综合征的治疗可用代谢抑制剂抑制酶活性，常用药物是 。A.消胆胺 B.黄嘌呤氧化酶 C.腺嘌呤 D.别嘌呤醇 E.硫酸锌43. 1-抗胰蛋白酶缺乏症可用酶诱导法治疗，常用药物是 。A.苯巴比妥 B.雄激素 C.胰蛋白酶 D.雌激素 E.维生素 C44. 基因治疗时将正常基因及其表达所需的序列导入到病变细胞或体细胞中是运用 。A.反义技术 B.基因克隆技术 C.基因测序技术 D.重组 DNA 技术 E.基因芯片技术45. 是指一段 DNA 或 RNA 寡核苷酸在 DNA 大沟中以、Hoogsteen 氢键与 DNA 高嘌呤区结合，形成三链
13、结构称为 。A. 三链核苷酸 B. 三链形成寡核苷酸 C. 单链形成寡核苷酸 D. 二链形成寡核苷酸 E. 三链 DNA46. 被誉为“基因封条”的反义技术是 。A.反义基因技术 B.ribozyme 技术 C.反义 ribozyme D.反义 RNA E.反义核蛋白47. 基因转移中回体转移（ ex vivo）法的优点是 。A.经典、安全 B.效果不易控制 C.步骤多 D.技术复杂难度大 C.不容易推广48. 基因转移中直接活体转移 (in vivo)法的优点是8A.技术不成熟 B.疗效短 C.免疫排斥 D.安全性 E.操作简便49. 已经在临床上经过基因治疗获得疗效的疾病是 。A.PKU
14、B.ADA C.半乳糖血症 D.Gaucher 病 E.-抗胰蛋白酶血症等。50. 对于某一疾病进行基因治疗的价值需要进行几方面的估价 。A.人群中的发病率 B.疾病对病人的危害性 C.患者对家庭和社会的影响D.其他治疗方面的可用性 E.以上都是51. 在体内能保持相当长的寿命或者具有分裂能力的转基因治疗理想靶细胞是 。A.肝细胞 B.神经细胞 C.骨髓细胞 D.内皮细胞 E.肌细胞52. 目前用于来实现大 Kb 基因的转染的基因载体是 。A. 质粒 B.反转录病毒 C.腺病毒 D. 人工酵母染色体 E.脂质体53. 迄今为止，被列为基因治疗的主要对象的遗传病有 。A.10 种 B.20 种
15、C.30 种 D.40 种 E.50 种54. ADA 缺乏症的临床基因治疗方案使用的靶细胞或组织是 。A.造血祖细胞 B.肝细胞血 C.T 淋巴细胞 D.骨髓细胞 E.干细胞55. 我国复旦大学应用反转录病毒载体转移因子 基因转移至病人 细胞中产生了高滴度有凝血活性的因子蛋白。A.呼吸道上皮 B.皮肤成纤维 C.B 淋巴 D.肝 E.胆管上皮56.-抗胰蛋白酶缺乏的基因治疗是应用 运载体把 -抗胰蛋白酶基因转移到呼吸道上皮细胞，可阻止慢性阻塞性肺病的发展。A.质粒 B.反转录病毒 C.腺病毒 D.人工酵母染色体 E.粘粒57. 肿瘤的基因治疗中对宿主细胞的修饰技术包括 。9A.将一些对细胞毒
16、药物有抗性的基因转移至造血前体细胞B.改正肿瘤细胞的基因突变 C.导入酶药物前体，形成肿瘤特异的敏感性 D.将细胞因子基因导入肿瘤细胞 E.将抑制基因导入肿瘤细胞58.HIV 感染的基因治疗技术包括 。A.阻断 HIV 和 CD4 结合 B.直接注射 DNA C.转移携带自杀基因的 CD8+T 细胞D.将人工构建的一个重组基因导入易感细胞内 E.以上都是59乙肝的基因治疗的可行方法是 。A.基因修正 B.基因替代 C.反义核酸技术 D.基因增强 E.基因失活60. 血管疾病的基因治疗是在一个特定的部位把转移基因转移到 。A.呼吸道上皮细胞 B.皮肤成纤维细胞 C.血管壁细胞 D.肝细胞 E.淋
17、巴细胞61对唇裂、腭裂的手术治疗的方法是 。A.矫正 B.修补 C.替换 D.切除 E.移植62对先天性心脏畸形及两性畸形的手术治疗的方法是 。A.替换 B.移植 C.矫正 D.修补 E.切除63对家族性多囊肾，遗传性肾炎治疗的有效方法是 。A.药物治疗 B.基因治疗 C.手术治疗 D.肾移植 E.饮食治疗64对重型 地中海贫血和某些遗传性免疫缺陷患者治疗的有效方法是施行 。A.骨髓移植术 B.肝细胞移植术 C.红细胞移植术 D.白细胞移植术 E.成纤维细胞移植65对 1-抗胰蛋白酶缺乏症患者在进行 治疗后，可使血中的 1-抗胰蛋白酶达到正常水平。A.白细胞移植 B.成纤维细胞移植 C.肝移植
18、 D.肾移植 E.骨髓移植术1066介导转录后基因沉默现象的分子是 。A.mRNA B. RNAi C.tRNA D.ssRNA E. dsRNA67药物治疗的时间可以在 。A.症状出现后 B.胎儿出生前 C.症状出现前 D.出生后 E.以上都是68口服消胆胺对于家族性高胆固醇血症的治疗方法属于 。A.螯合剂应用 B.促排泄剂应用 C.代谢抑制剂利用 D.平衡清除法 E.血浆置换69用别嘌呤醇治疗原发性痛风和自毁容貌综合征的方法属于 。A.螯合剂应用 B.促排泄剂应用 C.代谢抑制剂利用 D.平衡清除法 E.血浆置换70用青霉胺治疗肝豆状核变性（Wilson 病）的方法属于 。A.螯合剂应用
19、B.促排泄剂应用 C.代谢抑制剂利用 D.平衡清除法 E.血浆置换71雄激素用于 1-抗胰蛋白酶缺乏症的治疗的方法属于 。A.酶补充疗法 B.激素疗法 C.酶活化疗法 D.酶诱导治疗 E.激素补充疗法72给脑苷脂病(Gaucher 病)患者注射 -葡萄糖苷酶制剂的方法属于 。A.酶补充疗法 B.激素疗法 C.酶活化疗法 D.酶诱导治疗 E.激素补充疗法73由于酶反应辅助因子合成不足，或者是缺乏的酶与维生素辅助因子的亲和力降低的遗传代谢病，应给予相应的 。A.酶 B.蛋白质 C.维生素 D.微量元素 E.激素74对患有半乳糖血症风险的胎儿，在孕妇的饮食中限制摄入量的成分是 。11A.水解蛋白 B
20、.乳糖和半乳糖 C.葡萄糖 D.淀粉 E.蔗糖75治疗苯丙酮尿症患儿的主要方法是 。A.早期治疗 B.服用低苯丙氨酸奶粉 C.服用苯丙氨酸氨基水解酶的胶囊 D.低苯丙氨酸饮食法 E.以上都是76以骨髓细胞作为基因治疗靶细胞的血液系统疾病是 。A.ADA 缺乏症 B.珠蛋白生成障碍性贫血 C.镰状细胞贫血 D.CGD E.以上都是77在选择载体时，需要考虑的因素是 。A.载体对机体的毒性 B.载体所携带的转录启动子启动转录的效率 C.载体所携带基因片段的大小 D.载体对靶细胞的转染效率 E. 以上都是78囊性纤维化（CF）基因治疗所使用的靶细胞或组织是 。A.呼吸道 B.肝细胞 C.淋巴细胞 D
21、.骨髓细胞 E.造血祖细胞79LDL 受体缺乏基因治疗所使用的靶细胞或组织是 。A.造血祖细胞 B.肝细胞 C.骨髓细胞 D.淋巴细胞 E. 呼吸道80范可尼综合征基因治疗所使用的靶细胞或组织是 。A.淋巴细胞 B.肝细胞 C.呼吸道 D.造血祖细胞 E.骨髓细胞（二）填空题1. 遗传病的治疗有了突破性的进展，已从传统的 、 、 等跨入了 ，为遗传病根治开辟了广阔的前景。2. 遗传病治疗的策略包括 、 、 、 和 。3. 传统的遗传病的治疗方法包括 、 和 等。124. 遗传病的手术疗法主要包括 和 两方面。5.“去其所余”的主要方法包括 、 、 、和 。6. 遗传性代谢病通常是由于基因突变造
22、成 或 ，可用 和的方法进行治疗。7. 饮食疗法治疗遗传病的原则是 ，即对因 而造成的或 堆积的患者，制定特殊的 或 ，以控制底物或中间产物的摄入，减少代谢产物的堆积，达到治疗的目的。8. 基因治疗的策略不同，概括起来主要有下列几种： 、 、 、 。9. 反义技术是 ， 及 的总称。10. 基因治疗根据靶细胞的类型可分为 和 。11基因转移的途径有两类：一类是 ，称为 ；另一类为 ，称为 。基因转移方法可分为 、 和 等方法。12对于进行成功的基因治疗来说，必要条件是： 、 、 、 和 。13对于某一疾病进行基因治疗的价值需要进行几方面的估价： 、 和 。14除了骨髓细胞以外， 、 、 和 也
23、可作为靶细胞来研究或实施转基因治疗。（三）是非判断题1染色体病则是令人棘手的一类遗传病，目前无法根治，但改善症状很容易。2遗传病的治疗与一般的疾病治疗的疗效不同，遗传病治疗的初期效果明显，但长期观察则达不到预期的目的。3药物治疗可以在胎儿出生前进行，这时可以使胎儿出生后的遗传病症状推迟出现。134对于某些遗传病，采用症状前药物治疗也可以预防遗传病的病症发生而达到治疗的效果。5当遗传病发展到各种症状已经出现，机体器官已经受到损害，这时治疗的作用就仅限于基因治疗。6在临床上很多情况下，直接输入酶制剂，能有效地发挥作用。7随着患儿年龄的增大，饮食治疗的效果就越来越差，所以要求早诊断，早治疗。8基因替
24、代指去除整个变异基因，用有功能的正常基因取代之，使致病基因得到永久地更正。9反义技术封闭某些正常基因的表达，以达到抑制有害基因表达的目的。10迄今所有导入细胞的目的基因表达率都不十分高，这与基因转移方法、靶细胞的选择等有关。（四）名词解释1平衡清除（equilibrium depletion）法：2酶诱导治疗(enzyme-inducing therapy）：3酶受体介导分子识别法：4基因治疗（gene therapy）：5基因修正（gene correction）：6基因替代（gene replacement）：7基因增强（gene augmentation ）：8反义技术（antisens
25、e technology）：9回体转移（ ex vivo ）：10生殖细胞基因治疗（gene therapy on germ cell）：11三链形成寡核苷酸(triplex-forming oligonucleotides,TFO)：12RNA 干扰（RNA interference）：13基因添加（gene augmentation）：（五）问答题1遗传病的治疗有哪些策略？142传统的遗传病的治疗方法有哪些，怎样选择应用？3去其所余是药物治疗的原则之一，简述其方法。4对遗传病怎样进行酶疗法？5什么是基因治疗？如何分类？6简述基因治疗的策略。7说明基因转移的途径、方法和特点。8进行基因治疗的
26、必要条件是什么？9基因治疗中靶细胞的选用原则和种类有哪些？10转基因过程中应注意哪些问题？11以 ADA 缺乏症为例说明基因治疗遗传病的过程。12怎样对肿瘤进行基因治疗？13基因治疗目前还存在什么问题？三、参考答案（一）A 型选择题1A 2E 3E 4A 5D 6A 7C 8B 9A 10B11.B 12.B 13.B 14.B 15.A 16.A 17.C 18.E 19.C 20C 21B 22.A 23.D 24A 25. E 26.D 27.C 28E 29D 30B 31E 32E 33B 34. B 35.A 36.C 37.C 38.B 39.B 40.C 41.B 42.D 4
27、3.B 44.D 45.B 46.D 47.A 48.E 49.B 50.E 51.C 52.D 53.B 54.C 55.B 56.C 57.A 58.E 59.C 60.C 61B 62C 63D 64A 65C 66E 67E 68B 69C 70.A 71.D 72.A 73.C 74.B 75.E 76.E 77.E 78.A 79.B 80.D（二）填空题1手术治疗；饮食疗法；药物疗法；基因治疗152针对突变基因的体细胞基因的修饰与改善；针对突变基因转录的基因表达调控；蛋白质功能的改善；在代谢水平上对代谢底物或产物的控制；临床水平的内、外科治疗3. 手术治疗；药物治疗；饮食疗法4.
28、 手术矫正；器官移植5. 应用螯合剂；应用促排泄剂；利用代谢抑制剂；血浆置换或血浆过滤；平衡清除法6. 酶的缺失；酶活性降低；酶诱导；酶补充7. 禁其所忌；酶缺乏；底物；中间产物；食谱；配以药物8. 基因修正；基因替代；基因添加；基因增强；基因抑制和基因失活9. 反义核酸（RNA 或 DNA）技术；反义 ribozyme；ribozyme 技术10. 体细胞基因治疗；生殖细胞基因治疗11 in vivo；直接活体转移； ex vivo；回体转移；物理；化学；生物学12选择合适的疾病；掌握该病分子缺陷的本质；矫正遗传病的治疗（或正常）基因得到克隆；克隆基因的有效表达；克隆基因的有效调节；可利用的
29、动物模型。13人群中的发病率；疾病对病人的危害性；患者对家庭和社会的影响；其他治疗方面的可用性。14肝细胞；神经细胞；内皮细胞；肌细胞（三）是非判断题1. 错。应为：染色体病目前不仅无法根治，改善症状也很困难。2. 对。3. 错。应为：药物治疗可以在胎儿出生前进行，这时可以大幅度地减轻胎儿出生后的遗传病症状。4. 对。5. 错。应为：当遗传病发展到各种症状已经出现，机体器官已经受到损害，这时治疗的作用就仅限于对症。6. 错。应为：在临床上很多情况下，直接输入酶制剂，往往受到机体免疫功16能的作用而被破坏，因而不能有效地发挥作用。7. 对。8. 对。9. 错。应为：反义技术封闭某些特定基因的表达
30、，以达到抑制有害基因表达的目的。10. 对。（四）名词解释1. 对于某些遗传病，由于其沉积物可弥散入血，并保持血与组织之间的动态平衡。如果把一定的酶制剂注入血液以清除底物，则平衡被打破，组织中沉积物可不断进入血液而被清除，周而复始，以达到逐渐去除“毒物”的目的。2在某些情况下，酶活性不足不是结构基因的缺失，而是其表达功能“关闭” ，可使用药物、激素和营养物质使其“开启” ，诱导其合成相应的酶。3此法是把所用的酶进行一定的改造，用靶细胞表面特殊受体的抗体包裹，注入体内后，更易为靶细胞的某些结合部位所识别并与之特异性结合。4所谓基因治疗就是运用重组 DNA 技术，将具有正常基因及其表达所需的序列导
31、入到病变细胞或体细胞中，以替代或补偿缺陷基因的功能，或抑制基因的过度表达，从而达到治疗遗传性或获得性疾病的目的。5指将致病基因的突变碱基序列纠正，而正常部分予以保留。6指去除整个变异基因，用有功能的正常基因取代之，使致病基因得到永久地更正。7指将目的基因导入病变细胞或其他细胞，目的基因的表达产物可以补偿缺陷细胞的功能或使原有的功能得到加强。8反义技术封闭某些特定基因的表达，以达到抑制有害基因表达的目的。反义技术是反义核酸（RNA 或 DNA）技术，ribozyme 技术及反义 ribozyme 的总称。9指外源基因克隆至一个合适的载体，首先导入体外培养的自体或异体（有特定条件）的细胞，经筛选后
32、将能表达外源基因的受体细胞重新输回受试者体内。10是将受精卵早期胚胎细胞作为目标进行的基因治疗。11三链形成寡核苷酸是指一段 DNA 或 RNA 寡核苷酸在 DNA 大沟中以、17Hoogsteen 氢键与 DNA 高嘌呤区结合，形成三链结构。TFO 可与启动子区或结构基因结合而抑制基因转录。12意义链和反义链 RNA 共存抑制基因表达的效率达到单一意义链或反义链RNA 的 10 倍以上，这种双链 RNA（dsRNA）介导的转录后基因沉默(post-transcription gene silencing ,PTGS)现象称为 RNA 干扰，简称为 RNAi。13非定点导入外源正常基因，而没有
33、去除或修复有缺陷的基因。即间接疗法，此法难度较小，是目前多采用的策略，并已付诸实践。（五）问答题1从基因突变到临床表现的出现，这其间涉及许多过程，每一过程都可能成为遗传病治疗的着眼点。遗传病治疗的策略包括 5 个方面：针对突变基因的体细胞基因的修饰与改善；针对突变基因转录的基因表达调控；蛋白质功能的改善；在代谢水平上对代谢底物或产物的控制；临床水平的内、外科治疗以及心理治疗等。2遗传病的传统治疗方法大致上可分以下三类：外科治疗、内科治疗和饮食治疗：外科治疗：当遗传病发展到已出现各种临床症状尤其是器官组织已出现了损伤，应用外科手术的方法对病损器官进行切除、修补或替换，可有效地减轻或改善症状。手术
34、疗法主要包括手术矫正和器官移植两方面。内科治疗：若在出生后，当遗传病发展到各种症状已经出现，机体器官已经受到损害，这时治疗的作用就仅限于对症。治疗原则是补其所缺、禁其所忌和去其所余；饮食疗法治疗遗传病的原则是禁其所忌，即对因酶缺乏而造成的底物或中间产物堆积的患者，制定特殊的食谱或配以药物，以控制底物或中间产物的摄入，减少代谢产物的堆积，达到治疗目的。包括产前治疗和现症患者治疗。3对于一些因酶促反应障碍，导致体内贮积过多的代谢产物，可使用各种理化方法将过多的毒物排除或抑制其生成，使患者的症状得到明显的改善，称为去其所余。主要方法包括：应用螯合剂：如肝豆状核变性是一种铜代谢障碍性疾病，应用青霉胺与
35、铜离子能形成螯合物的原理，给患者服用青霉胺，可除去患者体内细胞中堆积的铜离子。应用促排泄剂：对于家族性高胆固醇血症患者可口服消胆胺治疗。利用代谢抑制剂：由于酶活性过高所造成的生产过剩病，可用代谢抑制剂抑18制酶活性，以降低代谢率。例如，用别嘌呤醇治疗原发性痛风。血浆置换或血浆过滤：血浆置换可除去大量含有毒物的血液，此法已成功应用于重型高胆固醇血症的治疗。血浆过滤是将患者的血液引入含有特定的亲合剂容器内，由于亲和结合剂与血浆中“毒物”选择性结合后不能通过回输滤器，而使患者的血液得到清理，在将血液重新输入患者体内后，获得治疗效果。平衡清除法：对于某些溶酶体贮积症，由于其沉积物可弥散入血，并保持血与
36、组织之间的动态平衡。如果把一定的酶制剂注入血液以清除底物，则平衡被打破，组织中沉积物可不断进入血液而被清除，周而复始，以达到逐渐去除“毒物”的目的。4遗传性代谢病通常是由于基因突变造成酶的缺失或活性降低，可用下列两种方法进行治疗。酶诱导治疗：在某些情况下，酶活性不足不是结构基因的缺失，而是其表达功能“关闭” ，可使用药物、激素和营养物质使其“开启” ，诱导其合成相应的酶。例如雄激素能诱导 1-抗胰蛋白酶的合成，因而可应用于 1-抗胰蛋白酶缺乏症的治疗。酶补充疗法： 给患者体内输入纯化酶制剂是酶补充疗法的重要途径。如给脑苷脂病(Gaucher 病)患者注射 -葡萄糖苷酶制剂，可使患者肝和血液中的
37、脑苷脂含量降低，使症状缓解；在临床上很多情况下，直接输入酶制剂，往往受到机体免疫功能的作用而被破坏，因而不能有效地发挥作用。为了降低外源酶在体内的破坏，延长酶作用的半衰期，目前采用将纯化酶制剂装入载体后再输入给患者的办法。5基因治疗（gene therapy）作为治疗疾病的一种新手段，正愈来愈受到人们的重视和关注。所谓基因治疗就是运用重组 DNA 技术，将具有正常基因及其表达所需的序列导入到病变细胞或体细胞中，以替代或补偿缺陷基因的功能，或抑制基因的过度表达，从而达到治疗遗传性或获得性疾病的目的。基因治疗根据靶细胞的类型可分为生殖细胞基因治疗和体细胞基因治疗。从理论上讲，将受精卵早期胚胎细胞作
38、为目标进行生殖细胞的基因治疗是可行的。但由于受精卵或早期胚胎细胞的遗传改变势必影响后代，伦理学障碍和技术上的困难使生殖细胞治疗目前仍为禁区。体细胞基因治疗只涉及体细胞的遗传转变，不影响下一代，现已被广泛接受作为严重疾病的治疗方法之一，在现代伦理道德上是可行的。方法上易于施行，而且已取得了可喜的成果。196根据宿主病变的不同，基因治疗的策略也不同，概括起来主要有下列几种：基因修正：基因修正指将致病基因的突变碱基序列纠正，而正常部分予以保留。但目前在技术上还无法做到。基因替代：基因替代指去除整个变异基因，用有功能的正常基因取代之，使致病基因得到永久地更正。基因添加（gene augmentatio
39、n）非定点导入外源正常基因，而没有去除或修复有缺陷的基因。即间接疗法，此法难度较小，是目前多采用的策略，并已付诸实践。基因增强：基因增强指将目的基因导入病变细胞或其他细胞，目的基因的表达产物可以补偿缺陷细胞的功能或使原有的功能得到加强。基因抑制和（或）基因失活：导入外源基因去干扰、抑制有害的基因表达。例如，向肿瘤细胞内导入肿瘤抑制基因（如 Rb 或 p53） ，以抑制癌基因的异常表达。此外利用反义技术封闭某些特定基因的表达，以达到抑制有害基因表达的目的。7基因转移的途径有两类：一类是 in vivo，称为直接活体转移；另一类为 ex vivo，称为回体转移。前者指将含外源基因的重组病毒、脂质体
40、或裸露的 DNA 直接导入体内。后者指外源基因克隆至一个合适的载体，首先导入体外培养的自体或异体（有特定条件）的细胞，经筛选后将能表达外源基因的受体细胞重新输回受试者体内。 ex vivo 法比较经典、安全，而且效果较易控制，但是步骤多、技术复杂难度大、不容易推广； in vivo 法操作简便、容易推广，但尚不成熟，存在疗效短、免疫排斥及安全性等问题，它是基因转移研究的方向，只有 in vivo 基因转移方法成熟了，基因治疗才能真正走向临床。基因转移方法可分为物理、化学和生物学等方法。8对于进行成功的基因治疗来说，必要条件是：选择合适的疾病；掌握该病分子缺陷的本质；矫正遗传病的治疗（或正常）基
41、因得到克隆；克隆基因的有效表达；克隆基因的有效调节；可利用的动物模型。9转基因治疗中的靶细胞选用应该是在体内能保持相当长的寿命或者具有分裂能力的细胞，这样才能使被转入的基因能有效地、长期地发挥“治疗”作用。因此干细胞、前体细胞都是理想的转基因治疗靶细胞。以目前的观点看，骨髓细胞是惟一满足以上标准的靶细胞，而骨髓的抽取、体外培养、再植入等所涉及的技术都已20成熟；另一方面，骨髓细胞还构成了许多组织细胞（如单核巨噬细胞）的前体，因此，不仅一些累及血液系统的疾病如 ADA 缺乏症、珠蛋白生成障碍性贫血、镰状细胞贫血、CGD 等以骨髓细胞作为靶细胞，而且一些非血液系统疾病如苯丙酮尿症、溶酶体贮积病等也
42、都以此作为靶细胞。除了骨髓以外，肝细胞、神经细胞、内皮细胞、肌细胞也可作为靶细胞来研究或实施转基因治疗。10转基因过程中应注意：必须考虑到被转基因在靶细胞中具有适当的表达效率。尽管在某些遗传病，正常基因 2%5%的表达量就可能不会发病，但像地中海贫血等疾病则需要较高的表达水平；被转基因的表达必须受到严格的调控，做到这一点虽然很难，但在某些疾病，过少的基因表达不能达到治疗目的，而过多的表达又会引起不良反应，因此，这就需要严格的体外试验和动物试验；大片段基因的转染以及不分裂细胞的转染都需要特别的考虑，否则难以达到预期效果。11腺苷脱氨酶（adenylate deaminase，ADA）缺乏症 这是
43、一种 AR 病，因ADA 缺乏，致脱氨腺苷酸增多，改变了甲基化的能力，产生毒性反应，患者 T 淋巴细胞受损，引起反复感染等症状。Anderson 等提出了一项关于 ADA 缺乏症的临床基因治疗方案，具体内容是：先分离病人外周血 T 淋巴细胞，在体外培养；在培养时，用 IL-2 等促细胞生长因子刺激它生长，一旦 T 淋巴细胞分裂后就用含正常 ADA 基因的反转录病毒载体 LASN 导入这种细胞，然后回输病人，以达到用正常的 ADA 基因替代有缺陷的 ADA 基因的目的，实现基因治疗。该方案分别于 1990 年和 1991 年，对两例 ADA 缺乏症女孩进行临床基因治疗。12对肿瘤的基因治疗分为对宿主细胞的修饰和对肿瘤细胞的修饰。对宿主细胞的修饰包括将一些对细胞毒药物有抗性的基因转移至造血前体细胞以降低治疗药物对骨髓的毒性,这样就可以用高剂量的药物杀伤肿瘤细胞而不破坏骨髓细胞。涉及免疫系统，如果抗肿瘤应答（如 CTL、TIL 等）已经存在，导入细胞因子的基因有可能扩大抗肿瘤效应。对肿瘤
